| 英文缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| 英文摘要 | 第14-22页 |
| 前言 | 第22-26页 |
| 实验技术路线 | 第26-27页 |
| 第一部分 体细胞核移植和诱导产生多能干细胞 研究进展 | 第27-83页 |
| 参考文献 | 第66-83页 |
| 第二部分 不同核移植方法对小鼠体细胞核移植效率的影响 | 第83-100页 |
| 1 材料与方法 | 第83-95页 |
| ·主要材料 | 第83-90页 |
| ·主要仪器 | 第83-84页 |
| ·主要试剂 | 第84-85页 |
| ·溶液的配制 | 第85-90页 |
| ·实验方法与步骤 | 第90-95页 |
| ·实验动物 | 第90页 |
| ·小鼠卵母细胞的获取 | 第90页 |
| ·供体细胞的分离和培养 | 第90-91页 |
| ·细胞的冷冻保存 | 第91页 |
| ·细胞的复苏 | 第91-92页 |
| ·去核 | 第92-94页 |
| ·核移植 | 第94页 |
| ·反向核移植法 | 第94页 |
| ·激活和培养 | 第94-95页 |
| ·统计分析 | 第95页 |
| 2 结果 | 第95-96页 |
| ·不同去核方法对小鼠卵母细胞的去核效率的影响 | 第95-96页 |
| ·胞质内注射法和反向核移植的核移植效果比较 | 第96页 |
| 3 讨论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第三部分 单一和联合化学激活方法对小鼠体细胞核移植胚胎体外发育的影响 | 第100-114页 |
| 1 材料与方法 | 第100-104页 |
| ·主要材料 | 第100-102页 |
| ·主要仪器 | 第100-101页 |
| ·主要试剂 | 第101页 |
| ·溶液的配制 | 第101-102页 |
| ·实验方法与步骤 | 第102-104页 |
| ·实验动物 | 第102页 |
| ·供体细胞的分离和培养 | 第102-103页 |
| ·体细胞核移植 | 第103页 |
| ·激活 | 第103-104页 |
| ·培养和细胞计数 | 第104页 |
| ·统计分析 | 第104页 |
| 2 结果 | 第104-109页 |
| ·单一激活方法对小鼠体细胞核移植胚胎体外发育的影响 | 第104-106页 |
| ·联合激活方法对小鼠体细胞核移植胚胎体外发育的影响 | 第106-109页 |
| 3 讨论 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-114页 |
| 第四部分 一步法和二步法培养系统对小鼠体细胞核移植胚胎体外发育的影响 | 第114-128页 |
| 1 材料与方法 | 第114-116页 |
| ·主要试剂 | 第114-115页 |
| ·实验方法与步骤 | 第115-116页 |
| ·去核和核移植 | 第115页 |
| ·激活和培养 | 第115-116页 |
| ·统计分析 | 第116页 |
| 2 结果 | 第116-123页 |
| ·核移植胚胎在一步法和二步法培养系统中的发育情况 | 第116-120页 |
| ·牛磺酸对核移植胚胎体外发育的影响 | 第120-123页 |
| 3 讨论 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-128页 |
| 第五部分 近交系小鼠体细胞核移植囊胚的微卫星 DNA 鉴定 | 第128-137页 |
| 1 材料与方法 | 第128-133页 |
| ·主要材料 | 第128-130页 |
| ·主要仪器 | 第128-129页 |
| ·主要试剂 | 第129页 |
| ·溶液的配制 | 第129-130页 |
| ·实验方法与步骤 | 第130-133页 |
| ·囊胚的构建 | 第130-131页 |
| ·引物 | 第131-132页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第132页 |
| ·巢式PCR 扩增 | 第132-133页 |
| 2 结果 | 第133-134页 |
| 3 讨论 | 第134-135页 |
| 参考文献 | 第135-137页 |
| 第六部分 体细胞核移植胚胎 ES 细胞样集落分离 | 第137-150页 |
| 1 材料与方法 | 第137-141页 |
| ·主要试剂 | 第137-138页 |
| ·实验方法与步骤 | 第138-141页 |
| ·实验动物 | 第138页 |
| ·细胞饲养层的制备 | 第138-139页 |
| ·囊胚的构建 | 第139页 |
| ·核移植囊胚的培养 | 第139页 |
| ·重构胚中 ES 细胞样集落的培养 | 第139-140页 |
| ·ES 细胞样集落碱性磷酸酶染色 | 第140页 |
| ·ES 细胞样集落多分化潜能鉴定 | 第140-141页 |
| 2 结果 | 第141-146页 |
| ·ES 细胞分离培养过程 | 第141-142页 |
| ·小鼠核移植重构胚中 ES 细胞样集落的分离培养 | 第142页 |
| ·ntES 细胞样集落生长状况 | 第142-143页 |
| ·ES 细胞 AKP 组织化学染色 | 第143-144页 |
| ·体内分化 | 第144-145页 |
| ·体外分化 | 第145-146页 |
| 3 讨论 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-150页 |
| 第七部分 小鼠成纤维细胞诱导产生多能干细胞 | 第150-181页 |
| 1 材料与方法 | 第150-163页 |
| ·主要材料 | 第150-152页 |
| ·主要仪器 | 第150-151页 |
| ·主要试剂 | 第151-152页 |
| ·质粒与菌种 | 第152页 |
| ·PCR 引物 | 第152页 |
| ·实验方法与步骤 | 第152-163页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第152-153页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第153-154页 |
| ·逆转录为cDNA | 第154页 |
| ·引物的设计与合成 | 第154-156页 |
| ·PCR 扩增 | 第156页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第156-157页 |
| ·目的片断和pEGFP-N1 的双酶切 | 第157-158页 |
| ·分别将酶切产物纯化回收 | 第158页 |
| ·目的片段与载体的连接,转化 | 第158-159页 |
| ·阳性克隆质粒扩增 | 第159-160页 |
| ·重组载体的PCR 和双酶切鉴定 | 第160-161页 |
| ·测序 | 第161页 |
| ·转染 | 第161-162页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞和鼠尾成纤维细胞的培养 | 第162页 |
| ·多能干细胞培养 | 第162-163页 |
| 2 结果 | 第163-178页 |
| ·目的片断电泳 | 第163页 |
| ·扩增阳性克隆，质粒酶切电泳，测序 | 第163-176页 |
| ·转染 | 第176-177页 |
| ·多能干细胞样集落生长状况 | 第177-178页 |
| 3 讨论 | 第178-180页 |
| 参考文献 | 第180-181页 |
| 致谢 | 第181-183页 |
| 学习期间发表论文 | 第183页 |
