中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
引言 | 第14-18页 |
第一部分 文献研究 | 第18-22页 |
1 中医基本证候的蛋白质组学研究 | 第18-19页 |
2 中医治则治法的蛋白质组学研究 | 第19页 |
3 中药作用靶点的蛋白质组学研究 | 第19-20页 |
4 中药复方作用机理的蛋白质组学研究 | 第20-21页 |
5 小结 | 第21-22页 |
第二部分 益气除痰方抗小鼠LEWIS肺癌的2D-DIGE蛋白质组学实验研究 | 第22-53页 |
1 材料 | 第22-29页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·细胞株和实验动物 | 第24页 |
·药物制备 | 第24页 |
·主要试剂的配置 | 第24-29页 |
2 方法 | 第29-36页 |
·中药抑瘤实验 | 第29页 |
·蛋白样品制备 | 第29-31页 |
·荧光染料标记 | 第31页 |
·荧光差异双向凝胶电泳(2D-DIGE) | 第31-32页 |
·凝胶图像分析 | 第32页 |
·差异候选蛋白的质谱鉴定 | 第32-33页 |
·Western blot验证差异蛋白的表达情况 | 第33-35页 |
·qRT-PCR法从基因水平对差异蛋白的验证(没有合适的抗体) | 第35-36页 |
·统计学分析 | 第36页 |
3 结果 | 第36-49页 |
·益气除痰方可抑制小鼠LEWIS肺癌的生长 | 第36-38页 |
·各组小鼠生存期比较 | 第38-39页 |
·胶图分析 | 第39页 |
·质谱鉴定结果 | 第39-47页 |
·Western blot法对差异蛋白进行表达差异鉴定 | 第47-48页 |
·qRT-PCR验证的四个蛋白基因表达的差异 | 第48-49页 |
·生物信息学分析结果 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
·益气除痰方具有抑制肺癌生长和转移作用 | 第49-50页 |
·2D-DIGE在蛋白质组学实验的应用 | 第50页 |
·MALDI-TOF/TOF-MS在蛋白质组学实验的应用 | 第50-51页 |
·上皮-间质细胞转变(EMT)与肿瘤转移的关系 | 第51页 |
·内质网UPR与肿瘤发生发展的关系 | 第51-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
第三部分 益气除痰方抑制VIMENTIN表达是否与EMT相关 | 第53-67页 |
1 材料 | 第53-54页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54-60页 |
·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织Vimentin的表达 | 第54-56页 |
·益气除痰方对A549细胞MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-14表达的影响 | 第56-59页 |
·益气除痰方对LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织MMP-2、MMP-14表达的影响 | 第59页 |
·统计分析 | 第59-60页 |
3 结果 | 第60-63页 |
·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织Vimentin的表达 | 第60-61页 |
·益气除痰方含药血清对A549细胞迁移的影响 | 第61页 |
·益气除痰方对A549细胞MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-14mRNA的影响 | 第61页 |
·益气除痰方对LEWIS肺癌实体瘤生长和肺转移的影响 | 第61-62页 |
·益气除痰方对LEWIS肺癌移植瘤MMP-2、MMP-14表达的影响 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
·益气除痰方通过抑制肺癌MMP的表达发挥抗转移作用 | 第63-64页 |
·益气除痰方抑制LEWIS肺癌Vimentin的表达发挥抗转移作用 | 第64页 |
·EMT与肿瘤转移相关 | 第64-65页 |
·EMT与肺癌 | 第65页 |
5 小结 | 第65-67页 |
第四部分 内质网UPR调控蛋白P4HB在非小细胞肺癌表达意义的探讨 | 第67-80页 |
1 材料 | 第67-68页 |
·主要试剂和药物 | 第67-68页 |
·主要仪器 | 第68页 |
2 方法 | 第68-72页 |
·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织P4HB的表达 | 第68页 |
·组织芯片研究P4HB在肺癌、癌旁组织及正常肺组织的表达 | 第68-69页 |
·流式细胞术检测益气除痰方对DDP刺激的A549细胞凋亡的影响 | 第69-70页 |
·细胞免疫组化检测中药含药血清对A549肺癌细胞P4HB表达的影响 | 第70-71页 |
·RT-PcR法检测中药含药血清对A549肺癌细胞P4HB InRNA表达的影响 | 第71-72页 |
3 结果 | 第72-77页 |
·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织P4HB的表达 | 第72-74页 |
·组织芯片研究P4HB在肺癌、癌旁组织及正常肺组织的表达 | 第74-75页 |
·流式细胞术检测益气除痰方对A549细胞凋亡的影响 | 第75页 |
·细胞免疫组化检测P4HB的表达 | 第75-76页 |
·RT-PCR检测P4HB的表达 | 第76-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
·内质网UPR是细胞应激条件下的自身保护机制 | 第77页 |
·内质网应激与肿瘤的发生、发展 | 第77-78页 |
·脯氨酰羟化酶(PHD)与肿瘤 | 第78页 |
·内质网UPR与肿瘤治疗的关系 | 第78-79页 |
·内质网UPR调控机制 | 第79页 |
5 小结 | 第79-80页 |
全文总结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
附录1 英汉缩略语名词对照 | 第89-91页 |
附录2 典型肺癌病例及临床病理VIMENTIN、P4HB免疫组化结果 | 第91-110页 |
附录3 附图 | 第110-119页 |
创新性及科学意义 | 第119-120页 |
研究生在学期间发表的论文及参加的科研项目 | 第120-121页 |
致谢 | 第121页 |