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益气除痰方抗小鼠LEWIS肺癌的蛋白质组学及临床病理验证研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
引言第14-18页
第一部分 文献研究第18-22页
 1 中医基本证候的蛋白质组学研究第18-19页
 2 中医治则治法的蛋白质组学研究第19页
 3 中药作用靶点的蛋白质组学研究第19-20页
 4 中药复方作用机理的蛋白质组学研究第20-21页
 5 小结第21-22页
第二部分 益气除痰方抗小鼠LEWIS肺癌的2D-DIGE蛋白质组学实验研究第22-53页
 1 材料第22-29页
   ·主要试剂第22-23页
   ·主要仪器第23-24页
   ·细胞株和实验动物第24页
   ·药物制备第24页
   ·主要试剂的配置第24-29页
 2 方法第29-36页
   ·中药抑瘤实验第29页
   ·蛋白样品制备第29-31页
   ·荧光染料标记第31页
   ·荧光差异双向凝胶电泳(2D-DIGE)第31-32页
   ·凝胶图像分析第32页
   ·差异候选蛋白的质谱鉴定第32-33页
   ·Western blot验证差异蛋白的表达情况第33-35页
   ·qRT-PCR法从基因水平对差异蛋白的验证(没有合适的抗体)第35-36页
   ·统计学分析第36页
 3 结果第36-49页
   ·益气除痰方可抑制小鼠LEWIS肺癌的生长第36-38页
   ·各组小鼠生存期比较第38-39页
   ·胶图分析第39页
   ·质谱鉴定结果第39-47页
   ·Western blot法对差异蛋白进行表达差异鉴定第47-48页
   ·qRT-PCR验证的四个蛋白基因表达的差异第48-49页
   ·生物信息学分析结果第49页
 4 讨论第49-52页
   ·益气除痰方具有抑制肺癌生长和转移作用第49-50页
   ·2D-DIGE在蛋白质组学实验的应用第50页
   ·MALDI-TOF/TOF-MS在蛋白质组学实验的应用第50-51页
   ·上皮-间质细胞转变(EMT)与肿瘤转移的关系第51页
   ·内质网UPR与肿瘤发生发展的关系第51-52页
 5 小结第52-53页
第三部分 益气除痰方抑制VIMENTIN表达是否与EMT相关第53-67页
 1 材料第53-54页
   ·主要试剂第53页
   ·主要仪器第53-54页
 2 方法第54-60页
   ·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织Vimentin的表达第54-56页
   ·益气除痰方对A549细胞MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-14表达的影响第56-59页
   ·益气除痰方对LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织MMP-2、MMP-14表达的影响第59页
   ·统计分析第59-60页
 3 结果第60-63页
   ·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织Vimentin的表达第60-61页
   ·益气除痰方含药血清对A549细胞迁移的影响第61页
   ·益气除痰方对A549细胞MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-14mRNA的影响第61页
   ·益气除痰方对LEWIS肺癌实体瘤生长和肺转移的影响第61-62页
   ·益气除痰方对LEWIS肺癌移植瘤MMP-2、MMP-14表达的影响第62-63页
 4 讨论第63-65页
   ·益气除痰方通过抑制肺癌MMP的表达发挥抗转移作用第63-64页
   ·益气除痰方抑制LEWIS肺癌Vimentin的表达发挥抗转移作用第64页
   ·EMT与肿瘤转移相关第64-65页
   ·EMT与肺癌第65页
 5 小结第65-67页
第四部分 内质网UPR调控蛋白P4HB在非小细胞肺癌表达意义的探讨第67-80页
 1 材料第67-68页
   ·主要试剂和药物第67-68页
   ·主要仪器第68页
 2 方法第68-72页
   ·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织P4HB的表达第68页
   ·组织芯片研究P4HB在肺癌、癌旁组织及正常肺组织的表达第68-69页
   ·流式细胞术检测益气除痰方对DDP刺激的A549细胞凋亡的影响第69-70页
   ·细胞免疫组化检测中药含药血清对A549肺癌细胞P4HB表达的影响第70-71页
   ·RT-PcR法检测中药含药血清对A549肺癌细胞P4HB InRNA表达的影响第71-72页
 3 结果第72-77页
   ·临床肺癌、癌旁组织、肺良性病变组织P4HB的表达第72-74页
   ·组织芯片研究P4HB在肺癌、癌旁组织及正常肺组织的表达第74-75页
   ·流式细胞术检测益气除痰方对A549细胞凋亡的影响第75页
   ·细胞免疫组化检测P4HB的表达第75-76页
   ·RT-PCR检测P4HB的表达第76-77页
 4 讨论第77-79页
   ·内质网UPR是细胞应激条件下的自身保护机制第77页
   ·内质网应激与肿瘤的发生、发展第77-78页
   ·脯氨酰羟化酶(PHD)与肿瘤第78页
   ·内质网UPR与肿瘤治疗的关系第78-79页
   ·内质网UPR调控机制第79页
 5 小结第79-80页
全文总结第80-81页
参考文献第81-89页
附录1 英汉缩略语名词对照第89-91页
附录2 典型肺癌病例及临床病理VIMENTIN、P4HB免疫组化结果第91-110页
附录3 附图第110-119页
创新性及科学意义第119-120页
研究生在学期间发表的论文及参加的科研项目第120-121页
致谢第121页

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