| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-24页 |
| 第1章 引言 | 第24-39页 |
| ·α-地中海贫血的概述 | 第24-28页 |
| ·α-地中海贫血的分子基础 | 第24-26页 |
| ·α-地中海贫血的人群分布和人群负荷 | 第26-27页 |
| ·重型α-地中海贫血与发病的关系 | 第27-28页 |
| ·产前诊断的概述 | 第28-29页 |
| ·母体血浆中游离的胎儿DNA | 第29-31页 |
| ·分离和检测游离的胎儿DNA的方法 | 第31-36页 |
| ·基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术 | 第31-32页 |
| ·分子大小分离法 | 第32-33页 |
| ·肽核酸介导的突变序列PCR扩增技术 | 第33-34页 |
| ·数字化PCR | 第34-36页 |
| ·母体血浆cffDNA在产前诊断的应用 | 第36-39页 |
| 第2章 实验材料 | 第39-46页 |
| ·本研究的实验样本 | 第39-40页 |
| ·缺失断裂区内SNP位点筛查的群体样本 | 第39页 |
| ·微测序技术建立的标准品 | 第39页 |
| ·α-地中海贫血高风险家庭样本 | 第39-40页 |
| ·用于母体血浆DNA浓度定量分析的样本 | 第40页 |
| ·用于母体血浆DNA模型建立的样本 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·计算机软件和数据库 | 第43-44页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-46页 |
| 第3章 实验方法 | 第46-74页 |
| ·本研究设计的诊断策略 | 第46-48页 |
| ·α-地中海贫血血液学表型分析 | 第48页 |
| ·红细胞参数分析 | 第48页 |
| ·血红蛋白电泳分析 | 第48页 |
| ·本研究所采取的技术路线 | 第48-50页 |
| ·缺失断裂点内SNP位点的筛选方法 | 第50-52页 |
| ·筛选缺失断裂点内的SNP位点 | 第50-52页 |
| ·候选SNP位点等位基因频率的计算 | 第52页 |
| ·外周血基因组DNA的制备 | 第52-54页 |
| ·酚-氯仿法抽提外周血基因组DNA | 第52-53页 |
| ·磁珠法抽提外周血基因组DNA | 第53-54页 |
| ·基因组DNA浓度和纯度测定 | 第54页 |
| ·母体血浆游离DNA的提取 | 第54-55页 |
| ·母体血浆游离DNA浓度定量分析 | 第55-60页 |
| ·实时荧光定量PCR的工作原理 | 第55-59页 |
| ·血浆游离DNA浓度定量分析 | 第59-60页 |
| ·基于复合PCR扩增的微测序技术 | 第60-67页 |
| ·微测序技术的原理 | 第60-62页 |
| ·引物设计与合成 | 第62页 |
| ·单个SNP位点的检测 | 第62-63页 |
| ·多个SNP位点的检测 | 第63-64页 |
| ·微测序结果分析判断 | 第64页 |
| ·67对高风险夫妇有信息性SNP位点的筛查 | 第64-67页 |
| ·等位基因特异性实时荧光PCR技术 | 第67-71页 |
| ·SNP分型的原理 | 第67页 |
| ·AS-PCR引物设计 | 第67-69页 |
| ·AS-PCR引物的特异性分析 | 第69页 |
| ·人工模拟的母体血浆DNA模板的制备 | 第69-70页 |
| ·AS-PCR技术敏感性和特异性的分析 | 第70页 |
| ·67例高风险地贫孕妇的临床评价 | 第70-71页 |
| ·Gap-PCR技术 | 第71-73页 |
| ·统计学分析 | 第73-74页 |
| 第4章 实验结果 | 第74-111页 |
| ·67个α-地中海贫血高风险家庭成员的表型结果 | 第74页 |
| ·候选SNP位点的确定和等位基因频率分布 | 第74-76页 |
| ·实时荧光定量PCR分析结果 | 第76-81页 |
| ·母体血浆总DNA的定量结果 | 第76-78页 |
| ·母体血浆游离胎儿DNA的定量结果 | 第78-81页 |
| ·检测9个SNP位点的微测序技术的建立 | 第81-87页 |
| ·单个SNP位点扩增体系的建立 | 第81-82页 |
| ·复合PCR体系的建立 | 第82-83页 |
| ·微测序技术检测高风险地贫夫妇 | 第83-87页 |
| ·AS-PCR技术动力学实验分析结果 | 第87-101页 |
| ·AS-PCR引物特异性分析结果 | 第87-92页 |
| ·AS-PCR引物敏感性分析结果 | 第92-97页 |
| ·AS-PCR反应体系特异性和灵敏性分析结果 | 第97-101页 |
| ·AS-PCR技术筛查母体血浆游离胎儿DNA的结果 | 第101-111页 |
| 第5章 分析和讨论 | 第111-120页 |
| ·候选SNP位点的选择和确定 | 第111-113页 |
| ·微测序技术的建立和影响因素 | 第113-114页 |
| ·AS-PCR技术的建立和影响因素 | 第114-116页 |
| ·α-地中海贫血的无创伤性产前诊断 | 第116-118页 |
| ·不足和展望 | 第118-120页 |
| 第6章 全文小结 | 第120-121页 |
| 第7章 参考文献 | 第121-132页 |
| 攻读博士学位期间所发表论文 | 第132-133页 |
| 附录 | 第133-149页 |
| 致谢 | 第149-151页 |
| 英文缩略词表 | 第151-154页 |