| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-34页 |
| ·微生物固氮的方式 | 第12-13页 |
| ·豆科植物与根瘤菌的共生固氮 | 第13-16页 |
| ·豆科植物中参与共生固氮的基因 | 第16-26页 |
| ·根瘤形成相关植物基因及其信号传导途径 | 第17-23页 |
| ·参与根瘤功能的植物基因 | 第23-24页 |
| ·根瘤衰老及类菌体分化相关的植物基因 | 第24-26页 |
| ·研究共生固氮差异表达植物基因的策略和技术 | 第26-30页 |
| ·抑制差减杂交 | 第26-27页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术 | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·RNAi技术 | 第29-30页 |
| ·紫云英共生基因的研究进展 | 第30-32页 |
| ·研究目的和意义 | 第32-34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-49页 |
| ·材料 | 第34-37页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·营养液与培养基 | 第34-35页 |
| ·常用贮存液和缓冲液 | 第35-36页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第36页 |
| ·主要耗材 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-49页 |
| ·基因文库序列分析 | 第37页 |
| ·紫云英总DNA、RNA的提取及mRNA的分离制备 | 第37-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·总RNA的纯化 | 第38页 |
| ·半定量RT-PCR | 第38-39页 |
| ·cDNA末端快速扩增法(RACE)钓取目的基因全长cDNA | 第39-46页 |
| ·基因特异性引物设计 | 第40-41页 |
| ·5'-RACE | 第41-44页 |
| ·3'-RACE | 第44-46页 |
| ·RACE产物的克隆测序及目的基因全长cDNA的获取 | 第46页 |
| ·序列分析 | 第46-47页 |
| ·目的基因时空表达研究 | 第47-49页 |
| ·目的基因在不同时期的表达研究 | 第47页 |
| ·目的基因在不同植物器官中的表达研究 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量PCR结果数据分析方法 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-72页 |
| ·cDNA克隆文库序列和聚类分析 | 第49-56页 |
| ·基因表达、信号转导和核糖体蛋白 | 第50页 |
| ·初生和次生代谢 | 第50-51页 |
| ·膜及转运相关基因 | 第51页 |
| ·防御与细胞应激 | 第51-52页 |
| ·未知蛋白、假设蛋白和无同源性基因 | 第52-56页 |
| ·半定量RT-PCR验证分析 | 第56-58页 |
| ·RNA抽提、纯化和浓度调节 | 第56页 |
| ·半定量RT-PCR | 第56-57页 |
| ·AsG6、AsC2、AsB3、AsT6编码蛋白和表达分析 | 第57-58页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第58-61页 |
| ·RNA样品的纯化和浓度调整 | 第58-59页 |
| ·对荧光定量PCR引物的验证 | 第59页 |
| ·各样品中18S rRNA基因的表达 | 第59-61页 |
| ·AsA8基因克隆和表达分析 | 第61-67页 |
| ·基因全长获取和序列分析 | 第61-64页 |
| ·时空表达分析 | 第64-67页 |
| ·AsA8在各样品中的融解曲线和扩增曲线 | 第64-65页 |
| ·荧光定量PCR数据分析 | 第65-67页 |
| ·AsD5基因克隆和表达分析 | 第67-72页 |
| ·基因编码区获取和序列分析 | 第67-68页 |
| ·时空表达分析 | 第68-72页 |
| ·AsD5在各样品中的融解曲线和扩增曲线 | 第68-69页 |
| ·荧光定量PCR数据分析 | 第69-72页 |
| 4 讨论 | 第72-80页 |
| ·AsA8与茉莉酸 | 第72-74页 |
| ·AsD5与质体蓝素 | 第74-75页 |
| ·其他4个下调表达基因 | 第75-78页 |
| ·进一步研究设想 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 附录 | 第98-99页 |
