| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
| 1 盐芥—耐盐研究模式植物 | 第11-15页 |
| ·盐芥的形态特征与分布 | 第11页 |
| ·盐芥在进化上耐盐机制的相关研究 | 第11-15页 |
| ·发育和形态 | 第12页 |
| ·胁迫耐受性 | 第12-13页 |
| ·代谢物 | 第13页 |
| ·盐芥基因的功能描述 | 第13-14页 |
| ·基因表达 | 第14-15页 |
| 2 活性氧 | 第15-20页 |
| ·活性氧的产生及作用机理 | 第15页 |
| ·活性氧对机体的损害 | 第15-18页 |
| ·活性氧导致生物体膜的损伤 | 第15-16页 |
| ·活性氧导致蛋白质、核酸的损伤 | 第16页 |
| ·活性氧导致酶的损伤 | 第16-17页 |
| ·ROS 与疾病 | 第17页 |
| ·细胞外ATP(eATP)可诱导活性氧的积累 | 第17-18页 |
| ·ROS 的生理功能 | 第18-20页 |
| ·参与免疫反应 | 第18-19页 |
| ·在细胞程序性死亡过程中起着传导作用 | 第19-20页 |
| ·参与根毛生长作用 | 第20页 |
| 3 NADPH 氧化酶 | 第20-25页 |
| ·Rboh 结构具有相似性 | 第20-21页 |
| ·多基因Rboh 家族的分工 | 第21-23页 |
| ·Rboh 的膜定位和超氧化物生成物的区隔化 | 第23页 |
| ·钙离子对Rboh 活性的影响 | 第23-24页 |
| ·钙离子对Rboh 活性进行直接调控 | 第23页 |
| ·ROS 产物和Ca2+的信号传导 | 第23-24页 |
| ·其它的调控机制：烷基化作用以及小GTPases | 第24页 |
| ·动物体中Rboh 的组织分化及表达 | 第24-25页 |
| 4 基因沉默及其生物学意义 | 第25-27页 |
| ·基因沉默 | 第25页 |
| ·基因沉默技术的生物学意义 | 第25-27页 |
| ·抑制转座子的转座，保护基因组的完整性 | 第25-26页 |
| ·病毒防御 | 第26页 |
| ·调控基因表达 | 第26-27页 |
| 第二部分 实验论文 | 第27-43页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·酶、化学试剂及试剂盒 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·质粒提取液 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·用到的软件 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-35页 |
| ·盐芥ThRbohF 基因沉默载体的构建 | 第29-33页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·PCR 扩增 | 第29页 |
| ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第30页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第30-31页 |
| ·质粒向大肠杆菌中的转化(热激法) | 第31页 |
| ·质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·沉默载体的构建 | 第32页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第32-33页 |
| ·花浸染法转化盐芥 | 第33-34页 |
| ·浸染用盐芥的准备 | 第33页 |
| ·转化用农杆菌的准备 | 第33页 |
| ·Floral dip 法转化盐芥 | 第33页 |
| ·Basta 抗性苗的筛选 | 第33-34页 |
| ·盐芥ThRobhF 基因表达的半定量RT-PCR 技术分析 | 第34-35页 |
| ·转基因植株RNA 的提取 | 第34页 |
| ·RNA 的定量及RNA 的反转录 | 第34-35页 |
| ·半定量RT-PCR | 第35页 |
| 3 实验结果与分析 | 第35-42页 |
| ·盐芥ThRbohF 基因部分片段的克隆及序列分析 | 第35-38页 |
| ·盐芥ThRbohF 基因的DNA 序列及对应的氨基酸序列 | 第35-36页 |
| ·盐芥ThRbohF 与拟南芥AtRboh 家族部分成员的同源性分析 | 第36-38页 |
| ·盐芥ThRbohF 基因沉默载体的构建 | 第38-41页 |
| ·盐芥ThRbohF 的PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第39页 |
| ·ThRbohF 部分片段反向重复连入pRT1011 载体 | 第39-40页 |
| ·植物表达载体的酶切验证 | 第40页 |
| ·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第40-41页 |
| ·盐芥的遗传转化与筛选 | 第41页 |
| ·转基因植株的分析 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| ·Clustal 及blast 对ThRbohF 基因序列进行分析 | 第42页 |
| ·ThRbohF 基因沉默载体的构建 | 第42页 |
| ·后期工作 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 攻读硕士研究生期间发表的论文 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
