| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 抗生素生物合成的分子生物学研究进展 | 第13-38页 |
| ·抗生素生物合成相关基因的研究策略 | 第13-16页 |
| ·链霉菌抗生素生物合成基因的功能分析 | 第16-17页 |
| ·抗生素生物合成基因簇的研究进展 | 第17-32页 |
| ·组合生物合成简介 | 第32-34页 |
| ·嘧肽霉素的介绍 | 第34-38页 |
| 第二章 不吸水链霉菌辽宁变种的紫外诱变 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·野生型嘧肽霉素产生菌的紫外诱变 | 第40页 |
| ·不产素突变株的形态变化 | 第40-42页 |
| ·不产素突变株的传代稳定性 | 第42页 |
| ·高产菌株的选育 | 第42-43页 |
| ·发酵液活性测定 | 第43-44页 |
| ·突变菌株的分子生物学验证 | 第44-46页 |
| 3 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 原生质体法建立不吸水链霉菌的质粒转化系统 | 第47-70页 |
| 第一节 突变株UV2136原生质体的制备和再生 | 第47-57页 |
| 1 材料与方法 | 第47-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-56页 |
| ·菌丝生长适宜条件的选择 | 第50-53页 |
| ·酶解系统适宜条件的选择 | 第53-55页 |
| ·再生条件的选择 | 第55-56页 |
| 3 小结 | 第56-57页 |
| 第二节 突变株UV2136转化系统的建立和优化 | 第57-70页 |
| 1 材料与方法 | 第57-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-68页 |
| ·突变株UV2136抗药性标记的筛选 | 第61-62页 |
| ·质粒pIJ702向突变株UV2136的转化 | 第62-67页 |
| ·大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pWHM3向突变株UV2136的转化 | 第67-68页 |
| 3 小结 | 第68-70页 |
| 第四章 接合转移在不吸水链霉菌中的应用 | 第70-86页 |
| 第一节 接合转移质粒载体的构建 | 第70-83页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-82页 |
| ·菌株04-2-2的抗药性分析 | 第72-73页 |
| ·pKC1139-tsr的构建 | 第73-77页 |
| ·pSET152-tsr的构建 | 第77-82页 |
| 3 小结 | 第82-83页 |
| 第二节 接合转移在不吸水链霉菌辽宁变种中的应用 | 第83-86页 |
| 1 材料与方法 | 第83-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-85页 |
| ·pKC1139-tsr向不吸水链霉菌辽宁变种的转化 | 第84-85页 |
| ·pSET152-tsr不能转化不吸水链霉菌辽宁变种 | 第85页 |
| 3 小结 | 第85-86页 |
| 第五章 嘧肽霉素生物合成基因CytoA、B、C的克隆和功能分析 | 第86-109页 |
| 1 材料与方法 | 第86-91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-108页 |
| ·链霉菌基因组DNA最佳酶切条件的摸索 | 第91-92页 |
| ·含互补基因的转化子的获得 | 第92-93页 |
| ·插入片段的获得 | 第93-94页 |
| ·插入片断的序列分析 | 第94-97页 |
| ·克隆基因的功能分析 | 第97-108页 |
| 3 小结 | 第108-109页 |
| 第六章 cytoD的克隆和功能分析 | 第109-121页 |
| 1 材料与方法 | 第109-110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-120页 |
| ·CGA合酶基因片段的获得 | 第110-112页 |
| ·利用地高辛标记检测不吸水链霉菌中的同源片段 | 第112-113页 |
| ·不吸水链霉菌中CGA合酶基因同源片段的克隆 | 第113页 |
| ·不吸水链霉菌中CGA合酶基因同源片段的序列分析 | 第113-115页 |
| ·生物合成相关基因cytoD的功能分析 | 第115-120页 |
| 3 小节 | 第120-121页 |
| 第七章 结论与讨论 | 第121-126页 |
| 1 嘧肽霉素的紫外诱变 | 第121页 |
| 2 嘧肽霉素生物合成阻断突变株的原生质体制备和再生 | 第121-122页 |
| 3 嘧肽霉素生物合成阻断突变株基因转移系统的建立 | 第122-123页 |
| 4 接合转移建立不吸水链霉菌辽宁变种的质粒转移系统 | 第123页 |
| 5 嘧肽霉素生物合成相关基因cytoA、cytoB、cytoC的克隆和功能分析 | 第123-124页 |
| 6 嘧肽霉素生物合成基因cytoD的克隆和序列分析 | 第124页 |
| 7 本论文的创新与不足之处 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 附录 | 第140页 |
