| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 第1章 Numb和Numblike在大鼠听觉感受上皮发育过程中的表达情况研究 | 第9-17页 |
| 1 材料与方法 | 第9-12页 |
| ·新生大鼠听觉感受上皮western blot实验 | 第9-11页 |
| ·新生大鼠听觉感受上皮real-time PCR实验 | 第11-12页 |
| ·耳蜗组织半定量RT-PCR实验 | 第12页 |
| ·统计学分析 | 第12页 |
| 2 结果 | 第12-15页 |
| ·新生大鼠听觉感受上皮内Numb和Numblike在蛋白水平表达情况 | 第12页 |
| ·新生大鼠听觉感受上皮内Numb和Numblike在mRNA水平表达情况 | 第12-13页 |
| ·Numb的四种亚型在大鼠耳蜗发育过程中表达的动态变化 | 第13-15页 |
| 3 讨论 | 第15-16页 |
| 4 结论 | 第16-17页 |
| 第2章 Numb和Numblike在大鼠听觉感受上皮发育过程中的定位研究 | 第17-23页 |
| 1 材料与方法 | 第17-18页 |
| ·冰冻切片制备 | 第17页 |
| ·免疫荧光染色 | 第17-18页 |
| ·激光共聚焦扫描 | 第18页 |
| 2 结果 | 第18-21页 |
| 3 讨论 | 第21-22页 |
| 4 结论 | 第22-23页 |
| 第3章 脂质体转染耳蜗铺片方法的建立 | 第23-29页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| ·pIRES-EGFP质粒抽提 | 第23-24页 |
| ·新生大鼠耳蜗铺片培养 | 第24页 |
| ·新生大鼠耳蜗铺片转染实验 | 第24页 |
| ·免疫荧光染色和激光共聚焦扫描 | 第24页 |
| ·统计学分析 | 第24-25页 |
| 2 结果 | 第25-28页 |
| ·质粒pIRES-EGFP的提取和鉴定 | 第25页 |
| ·不同浓度的转染试剂对耳蜗铺片的转染效率 | 第25页 |
| ·不同浓度的转染试剂对毛细胞的损伤程度 | 第25-28页 |
| 3 讨论 | 第28页 |
| 4 结论 | 第28-29页 |
| 第4章 Numb和Numblike在新生大鼠耳蜗铺片内的过量表达研究 | 第29-35页 |
| 1 材料与方法 | 第29-30页 |
| ·Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP质粒构建 | 第29页 |
| ·Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP质粒抽提 | 第29页 |
| ·新生大鼠耳蜗铺片培养 | 第29页 |
| ·新生大鼠耳蜗铺片转染实验 | 第29页 |
| ·western blot及real-time PCR | 第29-30页 |
| ·免疫荧光染色 | 第30页 |
| ·统计学分析 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-33页 |
| ·质粒Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP的提取和鉴定 | 第30页 |
| ·Numb和Numblike在耳蜗铺片内的过量表达研究 | 第30-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 结论 | 第34-35页 |
| 结束语 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 综述:Notch信号通路与耳蜗毛细胞发育 | 第40-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |