英文缩略词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-20页 |
研究背景 | 第20-23页 |
第一部分 观察肺微血管内皮细胞体外单层融合特征和评估细胞通透性 | 第23-43页 |
1. 引言 | 第23-24页 |
2. 材料和方法 | 第24-33页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-33页 |
·试剂配制 | 第26-28页 |
·RPMVECs 分离和培养 | 第28页 |
·RPMVECs 鉴定 | 第28-30页 |
·RPMVECs 通透性检测 | 第30-32页 |
·实验方案 | 第32-33页 |
·统计学处理 | 第33页 |
3. 结果 | 第33-40页 |
·RPMVECs 特征 | 第33-35页 |
·Transwell 上RPMVECs 单层融合特征 | 第35-38页 |
·硝酸醋酸混合纤维膜上RPMVECs 单层融合特征 | 第38-39页 |
·静息状态RPMVECs 通透系数 | 第39-40页 |
·三种方法评估LPS 对RPMVECs 通透性的影响 | 第40页 |
4. 讨论 | 第40-43页 |
第二部分 src 抑制的蛋白激酶 C 底物调控大鼠肺微血管内皮细胞通透性 | 第43-79页 |
1. 引言 | 第43-44页 |
2. 材料与方法 | 第44-62页 |
·实验材料 | 第44-46页 |
·实验方法 | 第46-62页 |
·主要试剂配制 | 第46-50页 |
·MTT 法检测细胞活性 | 第50-51页 |
·RT-PCR | 第51-54页 |
·Western-blotting | 第54-57页 |
·PKC 底物蛋白磷酸化检测 | 第57-58页 |
·RPMVECs 转染 | 第58-61页 |
·其他实验方法 | 第61页 |
·实验方案 | 第61-62页 |
·统计学处理 | 第62页 |
3. 结果 | 第62-74页 |
·不同浓度BIM、H89 和金雀异黄素对RPMVECs 活性的影响 | 第62-63页 |
·IL-1β、TNF-α激活RPMVECs 的PKC 信号通路 | 第63-64页 |
·IL-1β、TNF-α刺激增加RPMVECs 中SSeCKS 基因和蛋白表达 | 第64-65页 |
·BIM、H89 和金雀异黄素对炎症因子诱导 RPMVECs 表达 SSeCKS 基因和蛋白的调控 | 第65-67页 |
·siRNA 转染RPMVECs 的特性 | 第67-72页 |
·SSeCKS 沉默和BIM 对炎症因子诱导RPMVECs 通透性变化的调控 | 第72-74页 |
4. 讨论 | 第74-79页 |
第三部分 蛋白激酶C 参与白介素-17F 诱导肺微血管内皮细胞通透性增加的调控 | 第79-102页 |
1. 引言 | 第79-80页 |
2. 材料和方法 | 第80-89页 |
·实验材料 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-88页 |
·试剂配制 | 第81-82页 |
·SSeCKS 蛋白磷酸化检测 | 第82-83页 |
·RPMVECs 膜蛋白和细胞质蛋白分步提取和检测 | 第83-85页 |
·分析SSeCKS 蛋白与F-actin 骨架关联 | 第85-86页 |
·RPMVECs 的F-actin 染色 | 第86-87页 |
·其他实验方法 | 第87页 |
·实验方案 | 第87-88页 |
·统计学处理 | 第88-89页 |
3. 结果 | 第89-99页 |
·不同浓度IL-17F对RPMVECs 活性的影响 | 第89页 |
·IL-17F 刺激对RPMVECs 通透性的影响 | 第89-91页 |
·PKC 抑制剂对 IL-17F 诱导 RPMVECs 通透性增加的影响 | 第91-93页 |
·IL-17F 及PKC 抑制剂对RPMVECs 中F-actin 的影响 | 第93-95页 |
·IL-17F 诱导RPMVECs 中SSeCKS 基因和蛋白表达 | 第95-97页 |
·IL-17F 诱导SSeCKS 蛋白部分生物学特征变化 | 第97-99页 |
4. 讨论 | 第99-102页 |
全文结论 | 第102-103页 |
不足之处和工作计划 | 第103页 |
参考文献 | 第103-114页 |
附录 1 个人简历 | 第114-116页 |
附录 2 致谢 | 第116-117页 |
附录 3 综述 | 第117-133页 |