| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 水稻黄单胞菌致病机理研究进展 | 第11-19页 |
| 1 水稻黄单胞菌概述 | 第11-12页 |
| 2 植物病原细菌致病相关基因 | 第12-13页 |
| 3 黄单胞菌的主要致病生化因子 | 第13-16页 |
| ·多糖 | 第13页 |
| ·毒素 | 第13-14页 |
| ·胞外酶 | 第14页 |
| ·依赖于hrp基因的效应分子 | 第14-15页 |
| ·依赖于dsp基因的效应分子 | 第15页 |
| ·生长激素 | 第15-16页 |
| 4 水稻白叶枯病菌的基因组结构 | 第16页 |
| 5 基因的水平转移与病原菌的进化 | 第16-17页 |
| 6 病原菌致病生化因子的调控 | 第17-19页 |
| ·群体感应调节系统 | 第17-18页 |
| ·双组分调控系统 | 第18-19页 |
| 第二章 可扩散性信号分子DSF的研究进展 | 第19-27页 |
| 1 DSF调节单元及依赖DSF的生物学功能 | 第19-20页 |
| 2 RpfC和RpfG组成一个双组分系统来感应和转换DSF信号 | 第20页 |
| 3 DSF信号传导受到第二信使cyclic-di-GMP的调节 | 第20-21页 |
| 4 全局性转录调节因子Clp与DSF信号传导有关 | 第21页 |
| 5 Clp通过多级调控网络调节DSF的信号传导 | 第21-22页 |
| 6 DSF类型QS系统在其它细菌种类中的保守性 | 第22-27页 |
| 第三章 结论和展望 | 第27-29页 |
| 第二部分 研究内容 | 第29-79页 |
| 第一章 水稻细菌性条斑病菌clp基因的克隆及功能研究 | 第29-55页 |
| 1 材料与方法 | 第30-43页 |
| ·试验所涉及的菌株、质粒和引物 | 第30页 |
| ·培养基及抗生素 | 第30-32页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第34页 |
| ·DNA酶切、连接和PCR扩增产物回收 | 第34-35页 |
| ·质粒的转化 | 第35-36页 |
| ·PCR反应 | 第36-37页 |
| ·整合突变体的构建 | 第37-38页 |
| ·互补菌株的构建 | 第38-40页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第40页 |
| ·铁载体(siderophore)的检测 | 第40页 |
| ·生物膜的检测 | 第40页 |
| ·胞外多糖(EPS)的检测 | 第40-41页 |
| ·游动性和趋化应答试验 | 第41页 |
| ·细胞形态和鞭毛观察 | 第41页 |
| ·烟草过敏反应和致病性的测定 | 第41页 |
| ·总RNA的提取及RT-PCR扩增 | 第41-43页 |
| ·序列分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-53页 |
| ·clp基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·clp基因的序列分析 | 第44-45页 |
| ·clp基因突变株的构建 | 第45页 |
| ·clp互补菌株的构建 | 第45-47页 |
| ·clp基因的突变不影响Rs105正常生长 | 第47页 |
| ·clp基因突变后不影响胞外纤维素酶的产生 | 第47-48页 |
| ·clp基因突变后未能影响细菌铁载体(siderophore)的产生 | 第48页 |
| ·clp基因与水稻细菌性条斑病菌生物膜的形成有关 | 第48-49页 |
| ·clp基因的突变未能改变细胞形态 | 第49页 |
| ·clp基因突变后影响胞外多糖(EPS)的产生 | 第49-50页 |
| ·clp基因对水稻细菌性条斑病菌游动性和鞭毛活力很重要 | 第50-51页 |
| ·clp基因的突变体丧失趋化性 | 第51页 |
| ·clp基因突变影响条斑病菌的致病性,但不影响过敏性反应 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第52-53页 |
| 3 讨论与结论 | 第53-55页 |
| ·clp基因可能与胞外多糖产生相关 | 第53页 |
| ·clp基因可能与细菌性条斑病菌鞭毛活力,游动性和趋化性相关 | 第53-54页 |
| ·clp基因与细菌性条斑病菌致病性相关,但不影响过敏性反应 | 第54-55页 |
| 第二章 水稻白叶枯病菌clp基因的克隆与功能验证 | 第55-71页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·试验所涉及的菌株、质粒和引物 | 第56-57页 |
| ·培养基及抗生素 | 第57页 |
| ·细菌基因组DNA、质粒的提取 | 第57页 |
| ·质粒的转化 | 第57页 |
| ·缺失突变体的构建 | 第57页 |
| ·互补菌株的构建 | 第57页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第57页 |
| ·铁载体(siderophore)的检测 | 第57页 |
| ·生物膜的检测 | 第57页 |
| ·胞外多糖(EPS)的检测 | 第57-58页 |
| ·游动性和趋化应答试验 | 第58页 |
| ·细胞形态和鞭毛观察 | 第58页 |
| ·HR和致病性的测定 | 第58页 |
| ·总RNA的提取及RT-PCR扩增 | 第58页 |
| ·序列分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-68页 |
| ·clp基因的克隆 | 第58-59页 |
| ·clp基因的序列分析 | 第59-60页 |
| ·clp突变株的构建 | 第60-62页 |
| ·互补菌株的构建 | 第62页 |
| ·clp基因的突变不影响白叶枯菌正常生长 | 第62-63页 |
| ·clp基因突变后没有影响胞外维素酶的产生 | 第63-64页 |
| ·clp基因缺失突变后影响细菌铁载体(siderophore)的产生 | 第64页 |
| ·clp基因的突变对白叶枯病菌的生物膜形成有影响 | 第64-65页 |
| ·clp基因突变后影响胞外多糖(EPS)的产生 | 第65页 |
| ·clp基因的突变未能改变细胞形态 | 第65-66页 |
| ·clp基因对鞭毛活性起重要作用 | 第66-67页 |
| ·clp基因的突变体丧失趋化性 | 第67页 |
| ·clp基因的突变影响PXO99致病性,但不影响烟草过敏性反应 | 第67页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第67-68页 |
| 3 讨论与结论 | 第68-71页 |
| ·clp基因可能与胞外多糖产生相关 | 第68-69页 |
| ·clp基因可能影响鞭毛的活力进而影响游动性和趋化性 | 第69页 |
| ·clp基因与水稻白叶枯病菌致病性相关,对过敏性反应没有影响 | 第69-71页 |
| 第三章 水稻白叶枯菌clp基因缺失与插入突变比较 | 第71-79页 |
| 1 材料和方法 | 第71-73页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第71-72页 |
| ·培养基及抗生素 | 第72页 |
| ·细菌基因组DNA、质粒的提取 | 第72页 |
| ·酶切、连接 | 第72页 |
| ·质粒的转化 | 第72页 |
| ·两亲交配 | 第72页 |
| ·整合突变体的构建 | 第72-73页 |
| ·互补菌株的构建 | 第73页 |
| ·突变体在MMX中的生长情况测定 | 第73页 |
| ·烟草过敏反应和致病性的测定 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-77页 |
| ·clp基因插入突变株的构建 | 第73-74页 |
| ·PCR验证 | 第74-75页 |
| ·两种突变株没有影响细菌的正常生长 | 第75页 |
| ·两种突变株都减弱细菌致病性 | 第75-76页 |
| ·两种突变株与胞外纤维素酶的关系 | 第76页 |
| ·两种突变株其他功能的检测 | 第76-77页 |
| 3 讨论与结论 | 第77页 |
| 下一步工作设想 | 第77-79页 |
| 发表或待发表的论文 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 附录 | 第89-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
