| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 第一部分 引言 | 第10-29页 |
| 一、泛素和泛素化作用 | 第10-15页 |
| （一） 泛素 | 第10-11页 |
| （二） 泛素化作用 | 第11-13页 |
| （三） 泛素化过程中的酶 | 第13-14页 |
| （四） 泛素类似蛋白（Ubl-Ubiquitin-like proteins） | 第14-15页 |
| 二、去泛素化作用 | 第15-16页 |
| 三、去泛素化酶（DUB） | 第16-27页 |
| （一） DUBs 的作用 | 第17-19页 |
| （二） DUBs 亚家族 | 第19-27页 |
| 四、半胱氨酸酶的作用机理 | 第27-28页 |
| 五、本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第29-40页 |
| 一、实验材料 | 第29-33页 |
| （一） 主要试剂 | 第29页 |
| （二） 质粒及菌株 | 第29-30页 |
| （三） 底物和抑制剂 | 第30页 |
| （四） 引物和测序 | 第30-31页 |
| （五） 药品及缓冲液 | 第31-32页 |
| （六） 实验仪器 | 第32-33页 |
| 二、实验方法 | 第33-40页 |
| （一） 表达载体的构建 | 第33-35页 |
| （二） 蛋白的表达和纯化 | 第35-37页 |
| （三） 底物的合成和纯化 | 第37-38页 |
| （四） 酶活性分析 | 第38-39页 |
| （五） 蛋白二级结构分析 | 第39-40页 |
| 第三部分 实验结果 | 第40-75页 |
| 一、USP2 催化机制研究 | 第40-67页 |
| （一） USP2-WT 活性分析 | 第40-45页 |
| （二） 氧离子洞在USP2 催化过程中的作用 | 第45-55页 |
| （三） 催化中心三联体在USP2 催化过程中的作用 | 第55-61页 |
| （四） USP2 抑制活性分析 | 第61-63页 |
| （五） 二级结构分析 | 第63-64页 |
| （六） 催化中心以外的结构对酶活的影响 | 第64-67页 |
| 二、USP8 催化机制研究 | 第67-75页 |
| （一） 载体的构建和表达 | 第67-68页 |
| （二） USP8-WT 和突变体的活性分析 | 第68-75页 |
| 第四部分 讨论 | 第75-83页 |
| 一、催化机制研究 | 第75-80页 |
| （一） USP2 的催化机制分析 | 第75-77页 |
| （二） USP2 与Ub、Ubal 复合物构象模型分析 | 第77-79页 |
| （三） USP8 的催化机制 | 第79-80页 |
| 二、底物特异性研究 | 第80-83页 |
| （一） USP2 的底物特异性研究 | 第80-81页 |
| （二） USP8 的底物特异性研究 | 第81页 |
| （三） 不同检测方法的比较分析 | 第81-83页 |
| 第五部分 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-106页 |
| 一、图表 | 第94-103页 |
| 二、英文缩略词 | 第103-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简历 | 第107-108页 |
| 在学期间参与的科研项目和公开发表的论文 | 第108页 |
