| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| ·木薯是重要的能源作物 | 第9-10页 |
| ·植物的抗寒研究机理 | 第10-14页 |
| ·植物低温生理生化变化 | 第11页 |
| ·植物的抗寒基因的表达及调控 | 第11-12页 |
| ·低温信号转导 | 第12-13页 |
| ·低温逆境蛋白 | 第13-14页 |
| ·miRNA研究进展 | 第14-24页 |
| ·miRNA的分子机制 | 第14-16页 |
| ·miRNA的生物合成 | 第14-15页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第15-16页 |
| ·miRNA的研究方法 | 第16-19页 |
| ·miRNA的获取方法 | 第16-17页 |
| ·miRNA的检测方法 | 第17-19页 |
| ·植物miRNA数据库 | 第19-20页 |
| ·植物miRNA功能 | 第20-24页 |
| ·miRNA与植物的生长发育 | 第20-21页 |
| ·miRNA与植物激素的调节及信号转导 | 第21-22页 |
| ·miRNA与植物的抗逆胁迫反应 | 第22-23页 |
| ·植物miRNA与靶基因的关系及应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·植物的材料及其低温处理 | 第25-26页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第26-27页 |
| ·miRNA差异表达分析 | 第27-31页 |
| ·miRNA获取 | 第28页 |
| ·计算机预测 | 第28页 |
| ·胁迫材料Solexa测序 | 第28页 |
| ·miRNA引物设计 | 第28-29页 |
| ·miRNA的提取 | 第29-30页 |
| ·miRNA 3’末端加Poly(A) | 第30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| ·RT-PCR检测 | 第30-31页 |
| ·实时定量PCR对miRNA进行相对定量分析 | 第31页 |
| ·miRNA靶基因预测 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-59页 |
| ·木薯品系的低温胁迫反应 | 第32-33页 |
| ·small RNA检测及qRT-PCR检测 | 第33-36页 |
| ·small RNA质控检测及PCR反应体系优化 | 第33-34页 |
| ·qRT-PCR检测 | 第34-36页 |
| ·miRNA表达水平分析 | 第36-37页 |
| ·未处理对照下miRNA表达水平 | 第36-37页 |
| ·低温胁迫下miRNA表达水平 | 第37页 |
| ·不同胁迫过程中miRNA的差异表达 | 第37-47页 |
| ·在未处理对照下miRNA的表达 | 第37页 |
| ·在低温胁迫下miRNA的表达 | 第37-40页 |
| ·低温诱导AT下表达的miRNA | 第38页 |
| ·诱导后寒害AH下表达的miRNA | 第38-39页 |
| ·非诱导直接寒害NAH下表达的miRNA | 第39-40页 |
| ·未处理对照和低温胁迫下miRNA的表达异同 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-47页 |
| ·不同胁迫过程中miRNA的表达模式 | 第47-56页 |
| ·miRNA表达模式的确定 | 第47页 |
| ·miRNA表达模式 | 第47-55页 |
| ·未处理对照下miRNA的表达模式 | 第48-49页 |
| ·低温诱导AT下miRNA的表达模式 | 第49-52页 |
| ·诱导后寒害AH下miRNA的表达模式 | 第52页 |
| ·非诱导直接寒害NAH下miRNA的表达模式 | 第52-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| ·木薯低温胁迫miRNA的靶基因预测 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-65页 |
| ·低温胁迫处理及表达模式分类的可行性评价 | 第59页 |
| ·植物耐低温miRNA与抗寒性关联性 | 第59-60页 |
| ·植物miRNA的组织特异性 | 第60-61页 |
| ·植物miRNA的功能 | 第61-64页 |
| ·植物miRNA及其靶基因 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录1 苗期培养营养液配制 | 第72-73页 |
| 附录2 胁迫处理下23个miRNA的表达水平总结 | 第73-76页 |
| 附录3 预测得到的12个miRNA在蓖麻编码区中互作的42对标靶基因及主要功能 | 第76-78页 |
| 附录4 测序得到的11个miRNA在拟南芥编码区中互作的138对标靶基因及主要功能 | 第78-82页 |
| 研究生期间发表的论文情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |