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氧化葡萄糖酸杆菌高密度培养及生物催化合成羟基酸的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 前言第16-36页
   ·高密度培养技术第16-17页
   ·生物催化与生物转化第17-19页
   ·手性技术第19-20页
     ·手性技术与手性产品第19页
     ·手性化合物的制备方法第19-20页
       ·手性源第19-20页
       ·消旋体拆分第20页
       ·不对称合成第20页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的特性第20-21页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的基因组特征与脱氢酶第21-23页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的应用于开发第23-27页
     ·维生素C的生产第24页
     ·合成米格列醇第24-25页
     ·合成葡萄糖酸和酮基葡萄糖酸第25-26页
     ·合成二羟基丙酮第26-27页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌在手性催化方面的应用第27-28页
   ·羟基乙酸的性质和应用及生产工艺第28-30页
     ·羟基乙酸的性质及应用第28-29页
     ·羟基乙酸的制备方法第29-30页
       ·化学法第29页
       ·生物法第29-30页
   ·β-羟基异丁酸的应用和生产工艺第30-34页
     ·β-羟基异丁酸的应用第30-34页
     ·β-羟基异丁酸的制备方法第34页
       ·化学法第34页
       ·生物法第34页
   ·本研究论文选题的依据和意义以及主要研究内容第34-36页
第二章 氧化葡萄糖酸杆菌的高密度培养第36-53页
   ·引言第36页
   ·材料与方法第36-40页
     ·实验材料第36-37页
       ·菌种第36页
       ·试剂第36-37页
       ·实验仪器第37页
     ·实验方法第37页
       ·菌种活化第37页
       ·菌体摇瓶培养第37页
       ·菌体发酵罐培养第37页
     ·分析方法第37-40页
       ·菌体浓度测定第37-38页
       ·乙二醇的测定第38页
       ·乙二醇标准曲线制作第38-39页
       ·羟基乙酸的测定第39页
       ·羟基乙酸标准曲线第39-40页
       ·细胞催化活性的测定第40页
   ·结果与讨论第40-52页
     ·不同保藏菌株性能考察第40页
     ·培养基优化第40-44页
       ·碳源的选择第40-41页
       ·氮源的选择第41-42页
       ·无机盐的选择第42页
       ·均匀设计实验第42-44页
       ·模型的验证第44页
     ·菌体培养条件的优化第44-48页
       ·培养温度对菌体生长和细胞催化活性的影响第44页
       ·pH对菌体生长和细胞催化活性的影响第44-46页
       ·溶氧对菌体生长和细胞催化活性的影响第46-47页
       ·培养时间对菌体生长和细胞催化活性的影响第47-48页
     ·发酵罐放大培养第48-51页
       ·分批发酵第48-49页
       ·补料分批发酵第49-51页
     ·优化前后细胞催化活性的比较第51-52页
   ·本章小结第52-53页
第三章 氧化葡萄糖酸杆菌催化乙二醇生成羟基酸的研究第53-68页
   ·引言第53页
   ·材料与方法第53-55页
     ·实验材料第53-54页
       ·菌种第53-54页
       ·试剂第54页
       ·实验仪器第54页
     ·实验方法第54页
       ·菌体的培养第54页
       ·乙二醇转化反应第54页
     ·分析方法第54-55页
       ·乙二醇的测定第54页
       ·羟基乙酸的测定第54-55页
   ·结果与讨论第55-67页
     ·乙二醇催化反应关键酶的确定第55-56页
     ·静息细胞催化乙二醇生成羟基乙酸的反应过程研究第56-64页
       ·反应温度对催化乙二醇反应的影响第56页
       ·溶氧对催化乙二醇反应的影响第56-59页
         ·摇床转速对催化乙二醇反应的影响第56-57页
         ·添加氧载体对催化乙二醇反应的影响第57-59页
       ·pH对乙二醇转化的影响第59页
       ·细胞浓度对催化乙二醇反应的影响第59-60页
       ·底物浓度对催化乙二醇反应的影响第60-61页
       ·羟基乙酸浓度对催化乙二醇反应的影响 #46.第61页
       ·添加不同金属离子对乙二醇转化的影响第61-62页
       ·菌体培养阶段添加醇类物质对菌体转化能力的影响第62-63页
       ·细胞的重复使用第63-64页
     ·3.7L生物反应器放大研究第64-67页
       ·不同细胞浓度下转化乙二醇生成羟基乙酸第64-65页
       ·用流加方式转化乙二醇第65-67页
   ·本章小结第67-68页
第四章 生物反应分离耦合技术制备羟基乙酸第68-82页
   ·引言第68页
   ·材料与方法第68-72页
     ·实验材料第68-69页
       ·菌种第68-69页
       ·试剂第69页
       ·实验仪器第69页
     ·实验方法第69-72页
       ·分离介质的筛选第69页
       ·树脂的预处理第69-70页
       ·树脂的性能研究第70页
       ·细胞的固定化第70-71页
       ·原位分离第71-72页
   ·结果与讨论第72-81页
     ·分离介质的筛选及性能考察第72-77页
       ·离子交换树脂的筛选第72-73页
       ·D315树脂静态吸附羟基乙酸的平衡时间第73-74页
       ·pH值对树脂D315吸附羟基乙酸的影响第74-75页
       ·温度对D315树脂吸附羟基乙酸的影响第75-76页
       ·溶液中乙二醇浓度对D315树脂吸附羟基乙酸的影响第76页
       ·D315树脂对乙二醇的吸附能力第76-77页
     ·洗脱系统的研究第77页
     ·反应分离耦合工艺的研究第77-81页
       ·固定化细胞原位分离转化乙二醇生成羟基乙酸工艺的研究第78-80页
         ·固定化细胞和游离细胞活性的比较第78页
         ·固定化细胞催化稳定性第78-79页
         ·原位分离体系中固定化细胞转化乙二醇的过程第79-80页
       ·中空纤维膜反应器原位分离转化乙二醇生成羟基乙酸工艺的研究第80-81页
   ·本章小结第81-82页
第五章 羟基乙酸的分离纯化第82-87页
   ·引言第82页
   ·材料和方法第82-83页
     ·主要仪器和材料第82页
     ·实验方法第82-83页
       ·羟基乙酸转化液第82-83页
       ·脱色第83页
       ·离子交换树脂的处理第83页
       ·离子交换树脂纯化羟基乙酸第83页
       ·结晶第83页
     ·分析方法第83页
       ·乙二醇和羟基乙酸的测定第83页
       ·脱色率的测定第83页
     ·具体步骤第83页
   ·结果与讨论第83-86页
     ·羟基乙酸转化液脱色第83-85页
       ·活性炭用量对脱色的影响第83-85页
       ·时间对活性炭吸附及脱色的影响第85页
     ·阴离子交换第85页
     ·阳离子交换第85页
     ·羟基乙酸结晶的研究第85-86页
   ·本章小结第86-87页
第六章 氧化葡萄糖酸杆菌立体选择催化2-甲基-1,3-丙二醇合成(R)-β-羟基异丁酸第87-103页
   ·引言第87页
   ·材料与方法第87-91页
     ·实验材料第87-88页
       ·菌种第87-88页
       ·试剂第88页
       ·实验仪器第88页
     ·实验方法第88页
       ·菌体培养第88页
       ·2-甲基-1,3-丙二醇转化反应第88页
     ·分析方法第88-91页
       ·2-甲基-1,3-丙二醇测定方法的确定第88-89页
       ·2-甲基-1,3-丙二醇标准曲线制作第89页
       ·β-羟基异丁酸测定方法的确定第89-90页
       ·β-羟基异丁酸标准曲线的制作第90页
       ·β-羟基异丁酸对映体过量值测定条件的确定第90-91页
       ·光学纯度的计算第91页
     ·产物的分离纯化第91页
   ·结果与讨论第91-102页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌静息细胞催化2-甲基-1,3-丙二醇生成的产物鉴定第91-96页
       ·氧化葡萄糖酸杆菌静息细胞催化2-甲基-1,3-丙二醇时的产物生成情况第91-93页
       ·产物的分离纯化第93-94页
       ·产物的鉴定第94-95页
       ·产物β-羟基异丁酸的精制第95-96页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌中负责催化2-甲基-1,3-丙二醇的关键酶的确定第96-97页
     ·静息细胞转化2-甲基-1,3-丙二醇生成(R)-β-羟基异丁酸的反应过程研究第97-101页
       ·底物浓度对产物生成和选择性的影响第97-98页
       ·细胞浓度对反应的影响第98-99页
       ·pH对2-甲基-1,3-丙二醇转化反应的影响第99-100页
       ·温度对2-甲基-1,3-丙二醇转化的影响第100页
       ·在培养基中添加诱导物对反应的影响第100-101页
     ·3.7L生物反应器放大反应第101-102页
   ·本章小结第102-103页
第7章 结论与展望第103-106页
   ·结论第103-104页
   ·展望第104-106页
参考文献第106-115页
博士期间论文发表情况第115-116页
致谢第116-118页

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