| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第18-38页 |
| 1.1 前言 | 第18-19页 |
| 1.2 环境污染物的毒性机制研究 | 第19-21页 |
| 1.2.1 环境内分泌干扰物的毒性机制研究 | 第19-20页 |
| 1.2.2 手性污染物的毒性机制研究 | 第20-21页 |
| 1.2.3 纳米材料的毒性机制研究 | 第21页 |
| 1.3 多氯联苯(PCBs)的研究现状 | 第21-25页 |
| 1.3.1 PCBs的污染情况 | 第21-22页 |
| 1.3.2 PCBs的人群健康风险 | 第22-23页 |
| 1.3.3 PCBs的毒性效应研究 | 第23-25页 |
| 1.4 环境雌激素17β-雌二醇的毒性研究 | 第25-26页 |
| 1.4.1 环境中E2的来源 | 第25页 |
| 1.4.2 E2的危害 | 第25-26页 |
| 1.5 机体铁代谢稳态及调控机制研究进展 | 第26-30页 |
| 1.5.1 机体铁代谢的平衡 | 第26-27页 |
| 1.5.2 Hepcidin-Ferroportin轴在铁代谢中的作用 | 第27-28页 |
| 1.5.3 Hepcidin受调控因子 | 第28-29页 |
| 1.5.4 Ferroportin受调控因子 | 第29-30页 |
| 1.6 纳米银(AgNPs)的研究现状 | 第30-33页 |
| 1.6.1 AgNPs的简介及应用 | 第30-32页 |
| 1.6.2 AgNPs的环境生物效应 | 第32页 |
| 1.6.3 AgNPs的分析及表征 | 第32-33页 |
| 1.7 AgNPs的潜在毒性和机制研究进展 | 第33-38页 |
| 1.7.1 AgNPs对动物和人体的影响 | 第33-34页 |
| 1.7.2 AgNPs的致毒机理 | 第34-38页 |
| 第二章 实验部分 | 第38-68页 |
| 2.1 PCB153/PCB126的细胞毒性以及对细胞铁代谢的影响 | 第38-45页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第38页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 2.1.3 细胞培养 | 第39页 |
| 2.1.4 细胞毒性实验 | 第39-40页 |
| 2.1.5 实时荧光定量PCR检测 | 第40-41页 |
| 2.1.6 DCF法检测细胞ROS | 第41页 |
| 2.1.7 Western blot检测蛋白表达 | 第41-43页 |
| 2.1.8 ELISA检测胞内GSH-Px和CRP的含量 | 第43-44页 |
| 2.1.9 双荧光素酶报告基因实验 | 第44-45页 |
| 2.2 PCB126对动物模型铁代谢平衡影响 | 第45-49页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第45页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第45页 |
| 2.2.3 动物模型全血以及组织收集 | 第45-46页 |
| 2.2.4 动物模型肝脏RNA提取 | 第46页 |
| 2.2.5 动物肝脏RNA的反转录与荧光定量PCR检测 | 第46-47页 |
| 2.2.6 血清铁的检测 | 第47页 |
| 2.2.7 组织铁的检测 | 第47-48页 |
| 2.2.8 组织学分析 | 第48-49页 |
| 2.3 环境雌激素17β-雌二醇对机体铁代谢的影响 | 第49-53页 |
| 2.3.1 材料与试剂 | 第49-50页 |
| 2.3.2 实验仪器 | 第50页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第50页 |
| 2.3.4 细胞增殖实验 | 第50-51页 |
| 2.3.5 基因表达量测定 | 第51页 |
| 2.3.6 Western blot检测蛋白含量 | 第51-52页 |
| 2.3.7 FPN启动子ERE序列预测与点突变质粒构建 | 第52页 |
| 2.3.8 双荧光素酶报告基因检测 | 第52页 |
| 2.3.9 小鼠卵巢切除后的机体铁代谢检测 | 第52-53页 |
| 2.4 AgNPs通过改变组蛋白甲基化修饰影响基因表达 | 第53-60页 |
| 2.4.1 材料与试剂 | 第53页 |
| 2.4.2 AgNPs的表征 | 第53-54页 |
| 2.4.3 细胞培养 | 第54页 |
| 2.4.4 细胞增殖检测 | 第54页 |
| 2.4.5 细胞内ROS检测 | 第54页 |
| 2.4.6 定量PCR检测编码血红蛋白基因(β-globin) | 第54页 |
| 2.4.7 分子动力学模拟(Molecular dynamics simulation,MDS) | 第54-55页 |
| 2.4.8 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第55-57页 |
| 2.4.9 Western blot和血红蛋白含量测定 | 第57-58页 |
| 2.4.10 核蛋白的提取 | 第58-59页 |
| 2.4.11 AgNPs与H3/H4体外结合实验(pull-down) | 第59页 |
| 2.4.12 免疫共沉淀 | 第59-60页 |
| 2.4.13 免疫共沉淀产物中Ag含量检测(ICP-MS) | 第60页 |
| 2.5 从DNA甲基化层面研究锐劲特对斑马鱼胚胎-幼鱼发育毒性的对映体选择性 | 第60-68页 |
| 2.5.1 材料与试剂 | 第60页 |
| 2.5.2 实验仪器 | 第60-61页 |
| 2.5.3 斑马鱼的饲养与胚胎收集 | 第61页 |
| 2.5.4 斑马鱼胚胎-幼鱼的发育毒性评估 | 第61-62页 |
| 2.5.5 斑马鱼幼鱼基因组DNA提取 | 第62页 |
| 2.5.6 DNA甲基化测序(MeDIP-Seq) | 第62-66页 |
| 2.5.7 生物信息学分析 | 第66-68页 |
| 第三章 PCB153/PCB126的细胞毒性以及对细胞铁代谢的影响 | 第68-74页 |
| 3.1 前言 | 第68页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第68-74页 |
| 3.2.1 筛选PCB153或PCB126对HepG2细胞的毒性浓度 | 第68-69页 |
| 3.2.2 PCB153或PCB126对HepG2细胞铁代谢的影响 | 第69-70页 |
| 3.2.3 PCBs影响hepcidin基因表达的分子机制研究 | 第70-74页 |
| 第四章 PCB126对动物模型铁代谢平衡影响 | 第74-82页 |
| 4.1 前言 | 第74页 |
| 4.2 结果 | 第74-80页 |
| 4.2.1 PCB126抑制野生型(WT)小鼠hepcidin表达 | 第74-76页 |
| 4.2.2 PCB126导致小鼠肝脏的脂肪堆积 | 第76-78页 |
| 4.2.3 PCB126对hepcidin敲除小鼠铁代谢的影响 | 第78-80页 |
| 4.3 讨论(结合第三章内容) | 第80-82页 |
| 第五章 环境雌激素17β-雌二醇对机体铁代谢的影响 | 第82-94页 |
| 5.1 前言 | 第82-83页 |
| 5.2 结果 | 第83-91页 |
| 5.2.1 E2抑制THP-1细胞(经PMA诱导分化)内FPN基因的表达 | 第83-85页 |
| 5.2.2 多细胞系验证E2对FPN的转录抑制效应 | 第85-87页 |
| 5.2.3 E2抑制BMDM细胞中FPN的转录 | 第87-89页 |
| 5.2.4 E2通过FPN启动子上ERE调控其转录 | 第89-90页 |
| 5.2.5 在E2缺失小鼠中FPN的表达量升高 | 第90-91页 |
| 5.3 讨论 | 第91-94页 |
| 第六章 AgNPs通过改变组蛋白甲基化修饰影响基因表达 | 第94-108页 |
| 6.1 前言 | 第94页 |
| 6.2 结果 | 第94-106页 |
| 6.2.1 筛选AgNPs在MEL细胞中的亚致死浓度 | 第94-98页 |
| 6.2.2 AgNPs抑制β-globin基因表达 | 第98-99页 |
| 6.2.3 AgNPs降低总体H3甲基化和组蛋白甲基化酶的水平 | 第99-100页 |
| 6.2.4 AgNPs抑制β-globin基因座上H3K4me3与H3K79me1甲基化 | 第100-102页 |
| 6.2.5 MDS预测AgNPs与H3和H4的潜在作用 | 第102-103页 |
| 6.2.6 体外实验证实AgNPs与H3或H4的相互作用 | 第103-106页 |
| 6.3 讨论 | 第106-108页 |
| 第七章 从DNA甲基化层面研究锐劲特对斑马鱼胚胎-幼鱼的对映体选择发育毒性 | 第108-117页 |
| 7.1 前言 | 第108-109页 |
| 7.2 结果与讨论 | 第109-117页 |
| 7.2.1 锐劲特对斑马鱼胚胎-幼鱼急性发育毒性的对映体差异 | 第109-110页 |
| 7.2.2 斑马鱼胚胎-幼鱼基因组甲基化测定 | 第110-112页 |
| 7.2.3 R-(-)-或S-(+)-fipronil暴露下基因组DNA差异甲基化表达 | 第112页 |
| 7.2.4 Gene Ontology(GO)注释分析差异甲基化基因功能 | 第112-117页 |
| 第八章 全文总结与工作展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-141页 |
| 作者简历 | 第141-142页 |
| 本人学习经历 | 第141页 |
| 本人在攻读学位期间发表的学术论文 | 第141-142页 |
| 攻读学位期间获奖情况 | 第142页 |
