| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 硫酸软骨素 | 第11-16页 |
| 1.1.1 硫酸软骨素的结构 | 第11页 |
| 1.1.2 硫酸软骨素的性质 | 第11-13页 |
| 1.1.3 硫酸软骨素的现状研究 | 第13页 |
| 1.1.4 硫酸软骨素的应用 | 第13-15页 |
| 1.1.5 低分子量硫酸软骨素 | 第15页 |
| 1.1.6 低分子量硫酸软骨素的制备方法 | 第15-16页 |
| 1.2 硫酸软骨素酶 | 第16-20页 |
| 1.2.2 ChSase的种类 | 第16-18页 |
| 1.2.3 ChSase的药理作用 | 第18-19页 |
| 1.2.4 ChSase的应用 | 第19-20页 |
| 1.2.5 ChSase的克隆表达研究 | 第20页 |
| 1.3 本课题研究的目的及意义 | 第20页 |
| 1.4 本课题研究的主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 多形拟杆菌中ChSase克隆与表达载体构建 | 第22-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 菌种的活化与培养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 基因组DNA的获取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 ChSase信号肽分析 | 第24页 |
| 2.2.4 ChSase同源建模及分子对接 | 第24页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| 2.2.6 引物设计与合成 | 第25-27页 |
| 2.2.7 重组克隆载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.8 重组表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-35页 |
| 2.3.1 多形拟杆菌菌种活化及基因组DNA抽提 | 第28-29页 |
| 2.3.2 ChSase同源建模及分子对接 | 第29-32页 |
| 2.3.3 ChSase信号肽分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 ChSase引物设计及PCR结果 | 第33-34页 |
| 2.3.5 重组质粒构建 | 第34-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-37页 |
| 第三章 重组ChSase-ABCI的表达及性质表征 | 第37-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 3.2.1 ChSase-ABCI酶活力测定方法 | 第37页 |
| 3.2.2 蛋白含量测定方法 | 第37-38页 |
| 3.2.3 变性聚丙烯凝胶电泳 | 第38-40页 |
| 3.2.4 重组ChSase-ABCI表达 | 第40页 |
| 3.2.5 重组ChSase-ABCI的纯化 | 第40-41页 |
| 3.2.6 ChSase-ABCI的性质表征 | 第41-42页 |
| 3.2.7 LC-MS分析 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-54页 |
| 3.3.1 重组ChSase-ABCI的表达 | 第43-45页 |
| 3.3.2 重组ChSase-ABCI的纯化 | 第45-46页 |
| 3.3.3 ChSase-ABCI的性质表征 | 第46-53页 |
| 3.3.4 LC-MS分析 | 第53-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 重组ChSase-AC的表达及性质表征 | 第55-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第55页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第55页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 ChSase-AC酶活力测定方法 | 第55页 |
| 4.2.2 蛋白含量测定方法 | 第55页 |
| 4.2.3 重组ChSase-AC表达条件优化 | 第55-56页 |
| 4.2.4 重组ChSase-AC的纯化 | 第56页 |
| 4.2.5 ChSase-AC的性质表征 | 第56-57页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第57-63页 |
| 4.3.1 重组ChSase-AC的表达 | 第57-59页 |
| 4.3.2 重组ChSase-AC的纯化 | 第59-60页 |
| 4.3.3 ChSase-AC的性质表征 | 第60-63页 |
| 4.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第73页 |