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钟基因cBmall/cClock在单色光影响鸡松果体细胞分泌褪黑激素中的作用机制

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
缩略词第22-24页
第一章 前言第24-48页
    第一部分 文献综述第24-46页
        1 生物节律系统及分子调控机制第24-27页
            1.1 单细胞生物的生物节律系统分子调控机制第24-25页
            1.2 果蝇生物节律系统的分子调控机制第25页
            1.3 哺乳动物生物节律系统的分子调控机制第25-26页
            1.4 禽类生物节律系统的分子调控机制第26-27页
        2 禽类生物钟系统的特点第27-33页
            2.1 松果体第27-31页
            2.2 视网膜第31页
            2.3 下丘脑视交叉上核第31-32页
            2.4 禽类中枢振荡器的相互作用第32-33页
        3 影响动物生物节律系统的调控因素第33-35页
            3.1 光照对动物生物节律的影响第33-35页
            3.2 其他因素对动物生物节律的影响第35页
        4 视蛋白的感光作用第35-40页
            4.1 视蛋白分类第38-39页
            4.2 视蛋白的表达分布第39-40页
            4.3 视蛋白作用信号级联反应方式第40页
        5 cAMP信号通路在光刺激褪黑激素合成的作用研究进展第40-43页
            5.1 cAMP信号通路和视蛋白的关系第40-41页
            5.2 cAMP信号通路和钟基因的关系第41-42页
            5.3 cAMP信号通路和褪黑激素的关系第42-43页
        6 小结第43-46页
    第二部分 研究目的和内容第46-48页
        1 研究目的第46页
        2 研究内容第46-48页
第二章 光照对鸡松果体细胞昼夜节律系统的影响第48-72页
    1 引言第48页
    2 材料和方法第48-57页
        2.1 试验动物第48页
        2.2 仪器设备第48-49页
        2.3 试验试剂第49页
        2.4 组织切片第49-50页
        2.5 HE染色第50-51页
        2.6 鸡原代松果体细胞培养第51页
        2.7 细胞免疫荧光染色第51-52页
        2.8 RT-PCR分析第52-54页
        2.9 蛋白免疫印迹第54-56页
        2.10 褪黑激素水平的检测第56页
        2.11 数据分析第56-57页
    3 结果第57-68页
        3.1 不同日龄鸡松果体组织形态观察第57-58页
        3.2 鸡原代松果体细胞的形态和BMAL1细胞免疫荧光第58页
        3.3 鸡松果体细胞总RNA纯度鉴定第58-59页
        3.4 LD和DD条件下鸡松果体细胞正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律变化第59-62页
        3.5 LD和DD条件下鸡松果体细胞正调控钟基因蛋白水平的昼夜节律变化第62-63页
        3.6 LD和DD条件下鸡松果体细胞负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律变化第63-66页
        3.7 LD和DD条件下鸡松果体细胞cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律变化第66-68页
    4 讨论第68-70页
    5 小结第70-72页
第三章 单色光对松果体细胞昼夜节律系统的影响第72-90页
    1 引言第72-73页
    2 材料和方法第73-74页
        2.1 试验动物第73页
        2.2 仪器设备第73页
        2.3 试验试剂第73页
        2.4 鸡原代松果体细胞培养第73页
        2.5 RT-PCR分析第73页
        2.6 蛋白免疫印迹第73-74页
        2.7 褪黑激素水平的检测第74页
        2.8 数据分析第74页
    3 结果第74-87页
        3.1 单色光下鸡松果体细胞正调控钟基因mRNA水平变化第74-76页
        3.2 单色光对鸡松果体细胞正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第76-77页
        3.3 单色光下鸡松果体细胞正调控钟基因蛋白水平变化第77-78页
        3.4 单色光对鸡松果体细胞正调控钟基因蛋白表达水平的昼夜节律影响第78-79页
        3.5 单色光下鸡松果体细胞负调控钟基因mRNA水平变化第79-80页
        3.6 单色光对鸡松果体细胞负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第80-81页
        3.7 单色光下鸡松果体细胞cAanat mRNA水平和褪黑激素分泌的变化第81-82页
        3.8 单色光对鸡松果体细胞cAanat mRNA水平和褪黑激素分泌的昼夜节律影响第82-83页
        3.9 单色光下鸡松果体细胞视蛋白mRNA水平变化第83-84页
        3.10 单色光对鸡松果体细胞视蛋白mRNA水平昼夜节律影响第84-87页
    4 讨论第87-89页
    5 小结第89-90页
第四章 cOpnp在绿光调控鸡松果体细胞分泌褪黑激素中的作用第90-112页
    1 引言第90页
    2 材料和方法第90-96页
        2.1 试验动物第90页
        2.2 仪器设备第90-91页
        2.3 试验试剂第91页
        2.4 鸡原代松果体细胞培养第91页
        2.5 cOpnp干扰试验第91-92页
        2.6 cOpnp过表达试验第92-95页
        2.7 QRT-PCR分析第95页
        2.8 褪黑激素水平的检测第95页
        2.9 数据分析第95-96页
    3 结果第96-110页
        3.1 FAM-siRNA转染验证转染效率和转染量第96-97页
        3.2 cOpnp-siRNAs筛选和干扰效率验证第97页
        3.3 cOpnp过表达效率验证第97-98页
        3.4 cOpnp干扰后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第98-100页
        3.5 cOpnp过表达后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第100-101页
        3.6 cOpnp干扰后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第101-103页
        3.7 cOpnp过表达后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第103-105页
        3.8 cOpnp干扰后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第105-106页
        3.9 cOpnp过表达后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第106-110页
    4 讨论第110-111页
    5 小结第111-112页
第五章 cBmal1在绿光调控松果体细胞分泌褪黑激素中的作用第112-134页
    1 引言第112-113页
    2 材料和方法第113-114页
        2.1 试验动物第113页
        2.2 仪器设备第113页
        2.3 试验试剂第113页
        2.4 鸡原代松果体细胞培养第113页
        2.5 cBmal1干扰试验第113-114页
        2.6 cBmal1过表达试验第114页
        2.7 QRT-PCR分析第114页
        2.8 蛋白免疫印迹第114页
        2.9 褪黑激素水平的检测第114页
        2.10 数据分析第114页
    3 结果第114-131页
        3.1 cBmall-siRNAs筛选和干扰效率验证第114-115页
        3.2 cBmal1过表达效率验证第115-116页
        3.3 cBmal1干扰后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第116-118页
        3.4 cBmal1过表达后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第118-119页
        3.5 cBmal1干扰后对正调控钟基因蛋白水平的昼夜节律影响第119-120页
        3.6 cBmall过表达后对正调控钟基因蛋白水平的昼夜节律影响第120-122页
        3.7 cBmal1干扰后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第122-123页
        3.8 cBmal1过表达后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第123-125页
        3.9 cBmal1干扰后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第125-127页
        3.10 cBmal1过表达后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第127-131页
    4 讨论第131-133页
    5 小结第133-134页
第六章 cClock在绿光调控松果体细胞分泌褪黑激素中的作用第134-156页
    1 引言第134页
    2 材料和方法第134-136页
        2.1 试验动物第134-135页
        2.2 仪器设备第135页
        2.3 试验试剂第135页
        2.4 鸡原代松果体细胞培养第135页
        2.5 cClock干扰试验第135页
        2.6 cClock过表达试验第135页
        2.7 QRT-PCR分析第135页
        2.8 蛋白免疫印迹第135-136页
        2.9 褪黑激素水平的检测第136页
        2.10 数据分析第136页
    3 结果第136-152页
        3.1 cClock-siRNAs筛选和干扰效率验证第136-137页
        3.2 cClock过表达效率验证第137-138页
        3.3 cClock干扰后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第138-139页
        3.4 cClock过表达后对正调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第139-140页
        3.5 cClock干扰后对正调控钟基因蛋白水平的昼夜节律影响第140-141页
        3.6 cClock过表达后对正调控钟基因蛋白水平的昼夜节律影响第141-143页
        3.7 cClock干扰后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第143-144页
        3.8 cClock过表达后对负调控钟基因mRNA水平的昼夜节律影响第144-146页
        3.9 cClock干扰后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第146-148页
        3.10 cClock过表达后对cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的昼夜节律影响第148-152页
    4 讨论第152-154页
    5 小结第154-156页
第七章 cAMP信号通路在鸡松果体细胞分泌褪黑激素的昼夜节律调控中的作用第156-166页
    1 前言第156页
    2 材料和方法第156-158页
        2.1 试验动物第156页
        2.2 仪器设备第156-157页
        2.3 试验试剂第157页
        2.4 鸡原代松果体细胞培养第157页
        2.5 cAMP相关药物添加第157-158页
        2.6 QRT-PCR分析第158页
        2.7 蛋白免疫印迹第158页
        2.8 褪黑激素水平的检测第158页
        2.9 数据分析第158页
    3 结果第158-162页
        3.1 药物浓度验证第158-159页
        3.2 添加不同药物对鸡松果体细胞正调控钟基因mRNA水平的影响第159页
        3.3 添加不同药物对鸡松果体细胞正调控钟基因蛋白表达水平的影响第159-160页
        3.4 添加不同药物对鸡松果体细胞负调控钟基因mRNA水平的影响第160-161页
        3.5 添加不同药物对鸡松果体细胞cAanat mRNA和褪黑激素分泌水平的影响第161-162页
    4 讨论第162-164页
    5 小结第164-166页
第八章 全文讨论第166-174页
    1 家禽松果体生物钟调控的特点第166-167页
    2 单色光对鸡生物钟中枢振荡器的调控第167-168页
    3 单色绿光调控鸡松果体细胞分泌褪黑激素的作用机制第168-172页
    4 总结第172-174页
第九章 结论和创新点第174-178页
    1 结论第174-176页
    2 创新点第176-178页
参考文献第178-198页
致谢第198-200页
作者简介第200-201页

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