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Gαq基因表达调控机制的研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
第一章 前言第11-15页
    1.1 自身免疫性疾病与Gαq第11-12页
    1.2 组蛋白乙酰化和基因表达调控第12-15页
第二章 实验材料与方法第15-35页
    2.1 实验材料第15-18页
        2.1.1 实验细胞第15页
        2.1.2 主要的试剂第15-16页
        2.1.3 主要的仪器第16-17页
        2.1.4 主要的溶液的配制第17-18页
    2.2 实验方法第18-35页
        2.2.1 细胞培养第18-19页
        2.2.2 细胞的冻存和复苏第19页
        2.2.3 细胞加药刺激第19页
        2.2.4 琼脂糖凝胶电泳第19-21页
        2.2.5 从提取mRNA到实时定量PCR分析第21-23页
        2.2.6 蛋白印迹分析Gaq、 GATA-1蛋白水平的表达第23-26页
        2.2.7 流式检测细胞凋亡第26-27页
        2.2.8 免疫沉淀检测TSA处理后GATA-1表达第27页
        2.2.9 染色质免疫沉淀实验(CHIP)证明GATA-1作用于GNAQ启动子区第27-31页
        2.2.10 凝胶迁移实验(EMSA)证明GATA-1与GNAQ启动子区结合第31-35页
第三章 实验结果第35-47页
    3.1 293T 细胞中可表达Gαq第35页
    3.2 TSA对293T细胞Gαq mRNA水平的影响第35-36页
    3.3 TSA对293T细胞Gαq蛋白水平的影响第36页
    3.4 浓度为0-200nM的TSA对293T细胞的凋亡无影响第36-37页
    3.5 HDACs家族成员在293T细胞中的表达第37-38页
    3.6 TSA处理能够明显提高细胞内组蛋白H3和H4的乙酰化水平第38页
    3.7 GNAQ的启动子序列及转录因子的筛选第38-40页
    3.8 TSA对293T细胞GATA-1 mRNA水平的影响第40-41页
    3.9 TSA对293T细胞GATA-1蛋白水平的影响第41-42页
    3.10 免疫沉淀验证TSA处理后GATA-1的表达升高第42-43页
    3.11 CHIP验证GNAQ基因启动子区(-607~-411)为GATA-1结合位点第43-44页
    3.12 EMSA验证GATA-1与GNAQ基因启动子区(-569~-559)结合第44-47页
第四章 讨论第47-51页
附录第51-53页
综述第53-63页
参考文献第63-67页
致谢第67-68页

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