| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 第1章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 SARA简介 | 第13页 |
| 1.2 SARA的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 SARA的发病原因 | 第14页 |
| 1.4 SARA的发病机理 | 第14-15页 |
| 1.5 瘤胃上皮细胞的屏障功能及特点 | 第15-16页 |
| 1.5.1 瘤胃上皮的特点 | 第15页 |
| 1.5.2 SARA与瘤胃上皮屏障功能 | 第15-16页 |
| 1.6 脂多糖与NF-κB信号转导通路 | 第16-19页 |
| 1.6.1 脂多糖的结构与性质 | 第16-17页 |
| 1.6.2 LPS诱导的系统性炎症反应 | 第17页 |
| 1.6.3 NF-κB信号通路的结构和信号的激活 | 第17-18页 |
| 1.6.4 增进炎症反应的炎性因子 | 第18-19页 |
| 1.7 SARA与 LPS | 第19-20页 |
| 1.7.1 SARA状态下生成的LPS及转移 | 第19页 |
| 1.7.2 SARA状态下的LPS对机体免疫反应的影响 | 第19-20页 |
| 1.7.3 SARA状态下LPS引起的代谢反应 | 第20页 |
| 1.8 甘草提取物的药理作用及其在动物生产中的应用 | 第20-22页 |
| 1.8.1 抗病毒作用 | 第20-21页 |
| 1.8.2 抗炎作用 | 第21页 |
| 1.8.3 甘草提取物对瘤胃发酵的影响 | 第21页 |
| 1.8.4 甘草的开发前景 | 第21-22页 |
| 1.9 研究的意义、目的、内容和技术路线 | 第22-24页 |
| 1.9.1 研究意义和目的 | 第22页 |
| 1.9.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 1.9.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第2章 山羊瘤胃上皮原代细胞的分离培养与细胞免疫荧光鉴定 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-26页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.1.3 器械和仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.4 试验动物 | 第26页 |
| 2.2 测定项目和方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 瘤胃上皮细胞原代培养与分离 | 第26-27页 |
| 2.2.2 山羊瘤胃上皮细胞计数、传代和纯化培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 细胞形态观察 | 第28页 |
| 2.2.4细胞免疫荧光鉴定实验 | 第28页 |
| 2.2.5 MTT法测定细胞增殖活性 | 第28-29页 |
| 2.2.6 细胞冻存 | 第29页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.3.1 山羊瘤胃组织的冲洗和处理 | 第29-30页 |
| 2.3.2 瘤胃组织的分离 | 第30页 |
| 2.3.3 瘤胃组织胰蛋白酶消化步骤 | 第30页 |
| 2.3.4 山羊瘤胃上皮细胞计数、传代和纯化培养 | 第30-31页 |
| 2.3.5 山羊原代瘤胃上皮细胞形态 | 第31-32页 |
| 2.3.6 山羊瘤胃上皮细胞免疫荧光鉴定 | 第32页 |
| 2.3.7 MTT法测定细胞增殖活性 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.4.1 山羊瘤胃上皮细胞体外分离培养 | 第33-34页 |
| 2.4.2 山羊瘤胃上皮细胞角蛋白18 的鉴定 | 第34页 |
| 2.4.3 山羊瘤胃上皮细胞的生长活性的测定 | 第34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第3章 体外LPS诱导的山羊瘤胃上皮细胞损伤模型建立 | 第35-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-41页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 溶液配制 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器及耗材 | 第36-37页 |
| 3.1.4 测定项目和方法 | 第37页 |
| 3.1.5 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第37-41页 |
| 3.1.6 统计分析 | 第41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 3.2.1 复苏细胞 | 第41-42页 |
| 3.2.2 山羊瘤胃上皮细胞总RNA提取的结果 | 第42页 |
| 3.2.3 Real-time PCR标准曲线的绘制结果 | 第42-44页 |
| 3.2.4 扫描电镜观察瘤胃上皮细胞形态结果 | 第44-47页 |
| 3.2.5 LPS诱导炎性因子mRNA表达的差异性检测结果 | 第47页 |
| 3.2.6 MTT法检测LPS对瘤胃上皮细胞存活的影响 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-50页 |
| 第4章 甘草皂苷体外干预LPS诱导的瘤胃上皮细胞损伤炎性信号通路研究 | 第50-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第50-56页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第50-52页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 抗体信息 | 第52页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第52页 |
| 4.1.5 实验方法 | 第52-56页 |
| 4.1.6 甘草皂苷对瘤胃上皮细胞NF-κB通路捉炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-12的mRNA表达的影响 | 第56页 |
| 4.1.7 统计学分析 | 第56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-62页 |
| 4.2.1 甘草皂苷体外干预LPS诱导的瘤胃上皮细胞损伤炎性信号通路研究结果.. | 第56-57页 |
| 4.2.2 分析不同浓度甘草皂苷对Occludin、Zo-1 的分布的影响 | 第57-59页 |
| 4.2.3 分析甘草皂苷对通过LPS诱导后上皮细胞结构完整性的影响 | 第59-61页 |
| 4.2.4 分析不同浓度甘草皂苷对Occludin蛋白表达水平影响结果 | 第61页 |
| 4.2.5 甘草皂苷对瘤胃上皮细胞NF-κB通路炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-12的mRNA表达的影响 | 第61-62页 |
| 4.3 讨论 | 第62-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 第5章 结论 | 第65-66页 |
| 5.1 全文结论 | 第65页 |
| 5.2 本研究创新点 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
