| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1 水牛的繁殖特性 | 第14-17页 |
| 1.1 水牛的发情周期 | 第15页 |
| 1.2 水牛的发情特点 | 第15-16页 |
| 1.3 水牛发情周期生殖激素变化规律的研究 | 第16页 |
| 1.4 非损伤性的方法应用于动物激素水平的研究 | 第16-17页 |
| 2 唾液的性状 | 第17-22页 |
| 2.1 唾液激素测定研究与应用 | 第18-19页 |
| 2.2 唾液与血浆性激素浓度的关系 | 第19-20页 |
| 2.3 唾液生殖激素浓度变化的影响因素 | 第20页 |
| 2.3.1 唾液生殖激素的转运机制 | 第20页 |
| 2.3.2 唾液分泌速率的影响 | 第20页 |
| 2.4 唾液结晶与动物发情排卵的关系 | 第20-21页 |
| 2.5 水牛体液激素测定的研究进展 | 第21-22页 |
| 3 蛋白质组学 | 第22-30页 |
| 3.1 蛋白质组学概述 | 第22-23页 |
| 3.2 蛋白质组学研究技术 | 第23-27页 |
| 3.2.1 蛋白质分离纯化技术 | 第23页 |
| 3.2.2 蛋白质鉴定技术 | 第23-24页 |
| 3.2.3 蛋白质的定量技术 | 第24-27页 |
| 3.2.4 蛋白质组生物信息学 | 第27页 |
| 3.3 唾液蛋白组学研究 | 第27-30页 |
| 3.3.1 唾液的收集方法的研究应用 | 第28页 |
| 3.3.2 唾液蛋白组学研究技术的应用 | 第28-29页 |
| 3.3.3 唾液蛋白组学在疾病方面的应用 | 第29页 |
| 3.3.4 唾液蛋白组学生物标记中的应用 | 第29-30页 |
| 3.3.5 唾液蛋白组学在其他方面的研究 | 第30页 |
| 4 水牛唾液蛋白组学研究 | 第30-31页 |
| 5 研究的目的意义 | 第31-32页 |
| 第二章 水牛发情周期唾液和血液生殖激素变化规律的研究 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 1.1 试验牛的选择 | 第33页 |
| 1.2 试验牛的发情鉴定 | 第33页 |
| 1.3 样品的收集 | 第33-34页 |
| 1.3.1 血样的采集方法 | 第33-34页 |
| 1.3.2 唾液的采集方法 | 第34页 |
| 1.4 血清的制备与保存 | 第34页 |
| 1.5 血清、唾液激素浓度的测定 | 第34-38页 |
| 1.5.1 测定的设备与药品 | 第34-35页 |
| 1.5.2 测定方法 | 第35-38页 |
| 1.6 水牛唾液和血液生殖激素的测定 | 第38页 |
| 1.7 数据分析 | 第38-39页 |
| 2 结果 | 第39-44页 |
| 2.1 自然发情水牛血清E2、P4水平在整个发情周期中的变化 | 第39-41页 |
| 2.1.1 自然发情水牛血清和唾液E2水平在整个发情周期中的变化 | 第39页 |
| 2.1.2 自然发情水牛血清和唾液P4水平在整个发情周期中的变化 | 第39-40页 |
| 2.1.3 自然发情水牛唾液E2和P4水平在整个发情周期中的变化 | 第40-41页 |
| 2.2 自然发情水牛血清FSH、LH水平在整个发情周期中的变化 | 第41-43页 |
| 2.2.1 自然发情水牛血清和唾液FSH水平在整个发情周期中的变化 | 第41-42页 |
| 2.2.2 自然发情水牛血清和唾液LH水平在整个发情周期中的变化 | 第42-43页 |
| 2.2.3 自然发情水牛唾液FSH和LH水平在整个发情周期中的变化 | 第43页 |
| 2.3 自然发情水牛唾液和血清FSH、LH、E2、P4水平相关性分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 3.1 水牛发情周期唾液和血液生殖激素的变化规律分析 | 第44-45页 |
| 3.2 水牛发情周期唾液和血液生殖激素相关性分析 | 第45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 第三章 水牛唾液结晶几何结构研究 | 第46-55页 |
| 1 试验材料 | 第47-48页 |
| 1.1 试验动物 | 第47页 |
| 1.2 试验方法 | 第47-48页 |
| 1.3 唾液结晶的分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-53页 |
| 2.1 母水牛发情周期不同阶段唾液结晶形状的判定 | 第48-50页 |
| 2.2 母水牛发情周期唾液结晶与卵巢卵泡发育的关系 | 第50-52页 |
| 2.3 母水牛发情周期唾液结晶分形几何分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 3.1 水牛唾液结晶与其发情的关系分析 | 第53-54页 |
| 3.2 水牛唾液结晶分维值的分析 | 第54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 第四章 水牛发情期唾液生殖激素、唾液结晶和卵泡变化的关联分析 | 第55-64页 |
| 1 材料与方法 | 第56-57页 |
| 1.1 试验牛的选择 | 第56页 |
| 1.2 试验牛的发情鉴定 | 第56页 |
| 1.3 样品的收集 | 第56页 |
| 1.3.1 血样的采集方法 | 第56页 |
| 1.3.2 唾液的采集方法 | 第56页 |
| 1.4 血清的制备与保存 | 第56页 |
| 1.5 血清、唾液激素浓度的测定 | 第56-57页 |
| 1.6 唾液结晶制作 | 第57页 |
| 1.7 统计分析 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-61页 |
| 2.1 水牛发情期唾液生殖激素变化 | 第57-59页 |
| 2.2 水牛发情期卵巢卵泡发育变化 | 第59页 |
| 2.3 水牛发情期唾液结晶的变化 | 第59-61页 |
| 2.4 水牛唾液发情鉴定的方法验证 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 3.1 水牛发情期激素水平变化规律分析 | 第61-62页 |
| 3.2 水牛唾液结晶与激素相关性分析 | 第62页 |
| 3.3 水牛发情鉴定方法的生产中验证 | 第62-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 第五章 水牛发情周期唾液蛋白质ITRAQ鉴定及生物信息学分析 | 第64-105页 |
| 1 试验材料 | 第65-67页 |
| 1.1 试验材料 | 第65页 |
| 1.2 主要仪器及试剂 | 第65-67页 |
| 1.2.1 主要仪器 | 第65-66页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.2.3 主要溶液的配制 | 第67页 |
| 2 试验方法 | 第67-72页 |
| 2.1 蛋白质提取 | 第67-68页 |
| 2.2 蛋白质Bradford定量 | 第68页 |
| 2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和检测蛋白质 | 第68-69页 |
| 2.4 丙酮沉淀蛋白质 | 第69-70页 |
| 2.5 蛋白质的封闭,还原及酶解 | 第70页 |
| 2.6 ITRAQ标记样品 | 第70-71页 |
| 2.7 合并标记好的样品 | 第71页 |
| 2.8 脱盐 | 第71页 |
| 2.9 酶切 | 第71-72页 |
| 2.10 质谱检测 | 第72页 |
| 3 水牛唾液差异蛋白的统计 | 第72-73页 |
| 4 GO功能注释 | 第73页 |
| 5 COG注释 | 第73-74页 |
| 6 水牛唾液蛋白KEGG pathway代谢通路分析 | 第74页 |
| 7 结果与分析 | 第74-101页 |
| 7.1 Bradford定量标准曲线绘制 | 第74-75页 |
| 7.2 唾液样品蛋白的测定 | 第75-77页 |
| 7.2.1 唾液样品的蛋白含量测定 | 第75页 |
| 7.2.2 水牛唾液蛋白质的电泳检测 | 第75-77页 |
| 7.3 水牛唾液蛋白质的鉴定 | 第77-80页 |
| 7.3.1 水牛唾液蛋白质鉴定结果 | 第77-78页 |
| 7.3.2 水牛唾液蛋白Unique肽段数分布 | 第78页 |
| 7.3.3 水牛唾液鉴定肽段长度分布 | 第78-79页 |
| 7.3.4 水牛唾液蛋白质的覆盖度分布 | 第79-80页 |
| 7.4 鉴定和差异蛋白质的功能注释 | 第80-81页 |
| 7.5 蛋白定量统计结果 | 第81页 |
| 7.6 鉴定水牛唾液蛋白的GO功能注释 | 第81-84页 |
| 7.7 差异蛋白的GO富集分析 | 第84-87页 |
| 7.8 水牛唾液蛋白的COG注释 | 第87-88页 |
| 7.9 水牛唾液蛋白的pathway代谢通路注释 | 第88-89页 |
| 7.10 差异蛋白的注释 | 第89-92页 |
| 7.10.1 Stage1:stage4 | 第89-90页 |
| 7.10.2 Stage2:stage4 | 第90-91页 |
| 7.10.3 Stage3:stage4 | 第91-92页 |
| 7.11 差异富集蛋白VENN分析 | 第92-93页 |
| 7.12 差异蛋白的KEGG pathway富集分析 | 第93-99页 |
| 7.13 相互作用蛋白质组预测 | 第99-101页 |
| 8 讨论 | 第101-104页 |
| 8.1 水牛唾液样品的采集对蛋白组学研究的影响 | 第101-102页 |
| 8.2 水牛唾液样品的同位素标记相对和绝对定量技术鉴定 | 第102页 |
| 8.3 水牛唾液ITRAQ方法不足分析 | 第102-103页 |
| 8.4 水牛唾液差异蛋白的研究 | 第103页 |
| 8.5 蛋白质互作网络分析 | 第103-104页 |
| 9 结论 | 第104-105页 |
| 第六章 水牛唾液发情周期筛选特异蛋白的筛选及验证 | 第105-116页 |
| 1 材料与方法 | 第105-107页 |
| 1.1 主要试剂和材料 | 第105-106页 |
| 1.2 主要仪器及耗材 | 第106页 |
| 1.3 主要溶液的配置 | 第106-107页 |
| 2 实验方法 | 第107-108页 |
| 2.1 唾液蛋白的提取及定量 | 第107页 |
| 2.2 SDS-PAGE | 第107-108页 |
| 2.3 统计分析 | 第108页 |
| 3 结果 | 第108-114页 |
| 3.1 水牛发情周期蛋白含量的测定 | 第108-109页 |
| 3.2 水牛发情周期唾液蛋白含量和PH变化的关系 | 第109-110页 |
| 3.3 水牛发情阶段唾液蛋白质含量和PH浓度的关系 | 第110-111页 |
| 3.4 水牛发情周期唾液差异蛋白的表达 | 第111-112页 |
| 3.5 水牛发情阶段唾液差异蛋白的表达 | 第112-114页 |
| 4 讨论 | 第114-115页 |
| 5 小结 | 第115-116页 |
| 结论 | 第116-117页 |
| 创新点及下一步工作计划 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-132页 |
| 缩略词 | 第132-133页 |
| 附录 | 第133-139页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
