中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第10-23页 |
1.1 枇杷叶简介 | 第10-11页 |
1.1.1 枇杷叶 | 第10页 |
1.1.2 枇杷叶活性成分 | 第10-11页 |
1.1.2.1 挥发油 | 第10页 |
1.1.2.2 三萜酸类 | 第10-11页 |
1.1.2.3 倍半萜类 | 第11页 |
1.1.2.4 多酚类 | 第11页 |
1.1.2.5 有机酸类 | 第11页 |
1.2 多酚类的简介及应用 | 第11-13页 |
1.2.1 多酚的简介 | 第11-12页 |
1.2.2 多酚的应用 | 第12-13页 |
1.3 多酚的提取及分离纯化 | 第13-16页 |
1.3.1 溶剂提取法 | 第13-14页 |
1.3.2 超声波提取法 | 第14页 |
1.3.3 微波提取法 | 第14-15页 |
1.3.4 超临界萃取法 | 第15页 |
1.3.5 色谱层析法 | 第15-16页 |
1.4 多酚的生物活性 | 第16-19页 |
1.4.1 抗氧化活性 | 第16-17页 |
1.4.2 降血脂作用 | 第17页 |
1.4.3 抗肿瘤活性 | 第17-18页 |
1.4.4 降血糖作用 | 第18页 |
1.4.5 抗菌作用 | 第18页 |
1.4.6 其他活性 | 第18-19页 |
1.5 胰岛素抵抗研究进展 | 第19-21页 |
1.5.1 对胰岛素抵抗的认识 | 第19页 |
1.5.2 胰岛素抵抗的形成机理 | 第19-20页 |
1.5.3 肥胖导致胰岛素抵抗的机制 | 第20-21页 |
1.5.4 胰岛素抵抗的防治方法 | 第21页 |
1.6 本课题的主要研究内容与创新之处 | 第21-23页 |
1.6.1 本课题的主要研究内容 | 第21-22页 |
1.6.2 本课题的主要创新之处 | 第22-23页 |
第二章 实验仪器、材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.2 实验材料和试剂配制 | 第24-26页 |
2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2.2 实验试剂配制 | 第25-26页 |
2.2.2.1 PBS配方(1×) | 第25页 |
2.2.2.2 MTT溶液 | 第25页 |
2.2.2.3 DMEM完全培养基 | 第25-26页 |
2.2.2.4 细胞冻存液 | 第26页 |
2.2.2.5 小鼠饲料 | 第26页 |
2.3 实验方法 | 第26-37页 |
2.3.1 枇杷叶多酚组分的制备及成分分析 | 第26-29页 |
2.3.1.1 多酚类物质的测定方法 | 第26-27页 |
2.3.1.2 枇杷叶多酚组分的有机溶剂提取 | 第27-28页 |
2.3.1.3 大孔吸附树脂柱层析分离枇杷叶多酚 | 第28-29页 |
2.3.2 枇杷叶多酚抗氧化活性评价 | 第29-31页 |
2.3.2.1 对β-胡萝卜亚油酸氧化体系的抑制实验 | 第29-30页 |
2.3.2.2 枇杷叶多酚对AAPH诱导HAEC氧化应激保护作用研究 | 第30-31页 |
2.3.3 枇杷叶多酚对HAEC细胞胰岛素抵抗模型抑制作用 | 第31页 |
2.3.3.1 细胞培养 | 第31页 |
2.3.3.2 胰岛素诱导建立HAEC细胞胰岛素抵抗模型 | 第31页 |
2.3.3.3 多酚样品对HAEC细胞胰岛素抵抗模型的抑制作用 | 第31页 |
2.3.4 批杷叶多酚抑制HAEC细胞胰岛素抵抗的机理研究 | 第31-34页 |
2.3.4.1 细胞RNA和总蛋白的提取 | 第31-32页 |
2.3.4.2 定量PCR分析HAEC细胞胰岛素信号传导相关基因mRNA的相对表达水平 | 第32-34页 |
2.3.4.3 Western Blot法分析IRS-1、PI3K、GLUT4等相关蛋白表达 | 第34页 |
2.3.5 枇杷叶多酚改善小鼠胰岛素抵抗作用研究 | 第34-37页 |
2.3.5.1 小鼠胰岛素抵抗模型建立 | 第35页 |
2.3.5.2 小鼠葡萄糖口服耐量(OGTT)和胰岛素耐受(ITT)实验 | 第35页 |
2.3.5.3 小鼠解剖以及脏器指数 | 第35页 |
2.3.5.4 小鼠生化指标的测定 | 第35页 |
2.3.5.5 小鼠的器官组织化学分析 | 第35-37页 |
第三章 结果与讨论 | 第37-67页 |
3.1 枇杷叶多酚组分的提取纯化 | 第37-44页 |
3.1.1 多酚类物质的测定方法 | 第37页 |
3.1.2 枇杷叶多酚的乙醇提取 | 第37-40页 |
3.1.2.1 单因素试验 | 第37-38页 |
3.1.2.2 正交试验 | 第38-39页 |
3.1.2.3 枇杷叶多酚提取结果 | 第39-40页 |
3.1.3 大孔吸附树脂分离纯化枇杷叶多酚 | 第40-44页 |
3.1.3.1 大孔吸附树脂的选择 | 第40页 |
3.1.3.2 HZ802树脂分离纯化枇杷叶多酚条件探索 | 第40-42页 |
3.1.3.3 枇杷叶多酚动态吸附曲线 | 第42-43页 |
3.1.3.4 枇杷叶多酚动态洗脱曲线 | 第43-44页 |
3.1.3.5 枇杷叶多酚纯化结果与比较 | 第44页 |
3.1.4 小结 | 第44页 |
3.2 枇杷叶多酚抗氧化评价 | 第44-48页 |
3.2.1 对β-胡萝卜亚油酸氧化体系的抑制 | 第44-45页 |
3.2.2 枇杷叶多酚对AAPH诱导HAEC细胞氧化应激损伤保护作用研究 | 第45-48页 |
3.3.2.1 AAPH诱导建立HAEC细胞氧化损伤模型 | 第46页 |
3.3.2.2 枇杷叶多酚对HAEC细胞氧化应激保护作用 | 第46-48页 |
3.2.3 小结 | 第48页 |
3.3 枇杷叶多酚对HAEC细胞胰岛素抵抗模型抑制作用 | 第48-50页 |
3.3.1 胰岛素诱导HAEC细胞胰岛素抵抗模型建立 | 第48-49页 |
3.3.2 多酚样品对HAEC细胞胰岛素抵抗模型的抑制作用 | 第49页 |
3.3.3 小结 | 第49-50页 |
3.4 枇杷叶多酚抑制HAEC细胞胰岛素抵抗的机理研究 | 第50-55页 |
3.4.1 细胞总RNA和总蛋白提取结果 | 第50-51页 |
3.4.2 定量PCR测定HAEC细胞中相关基因的mRNA相对表达水平 | 第51-53页 |
3.4.3 Western Blot法分析IRS-1、PI3K、GLUT4等蛋白表达结果 | 第53-55页 |
3.4.4 小结 | 第55页 |
3.5 枇杷叶多酚对小鼠胰岛素抵抗作用的研究 | 第55-67页 |
3.5.1 肥胖小鼠模型建立 | 第55-56页 |
3.5.2 小鼠口服葡萄糖耐量(OGTT)和胰岛素耐受(ITT)实验 | 第56-59页 |
3.5.3 小鼠内脏脂肪含量比较 | 第59页 |
3.5.4 小鼠生化指标分析 | 第59-64页 |
3.5.5 小鼠的器官HE染色 | 第64-65页 |
3.5.6 小结 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
建议 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简历、在学期间的研究成果及发表学术论文 | 第75页 |