| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 盐胁迫 | 第12-15页 |
| 1.1 盐胁迫对植物的毒害作用 | 第12-13页 |
| 1.2 植物的耐盐机制 | 第13-15页 |
| 2 干旱胁迫 | 第15-18页 |
| 2.1 干旱对植物的毒害 | 第15-16页 |
| 2.2 植物干旱胁迫信号转导 | 第16-17页 |
| 2.3 植物干旱胁迫的耐受机制 | 第17-18页 |
| 3 植物泛素/26S蛋白酶体途径 | 第18-19页 |
| 4 F-box蛋白研究进展 | 第19-23页 |
| 4.1 F-box蛋白结构 | 第20页 |
| 4.2 F-box蛋白生物学功能 | 第20-23页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第23-26页 |
| 第一章 拟南芥SDR功能预测与转基因材料构建 | 第26-42页 |
| 1 材料与方法 | 第26-34页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第26-28页 |
| 1.2 载体构建 | 第28-29页 |
| 1.3 PCR反应 | 第29-30页 |
| 1.4 总DNA提取 | 第30页 |
| 1.5 总RNA提取 | 第30页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第30-31页 |
| 1.7 实时荧光定量PCR | 第31页 |
| 1.8 DNA琼脂糖凝胶电泳回收及质粒提取 | 第31页 |
| 1.9 SDR基因的遗传转化 | 第31-32页 |
| 1.10 拟南芥转化与筛选 | 第32页 |
| 1.11 洋葱表皮侵染与共培养 | 第32页 |
| 1.12 阳性植株鉴定 | 第32-34页 |
| 1.13 生物信息学分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.1 AtSDR基因结构与蛋白质结构 | 第34-35页 |
| 2.2 AtSDR同源序列比对与进化树分析 | 第35-36页 |
| 2.3 35S::SDR和35S::AntiSDR载体构建 | 第36-38页 |
| 2.4 35::eGFP和35::(SDR+eGFP)载体构建与验证 | 第38-39页 |
| 2.5 启动子顺式作用元件分析 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 拟南芥SDR调节盐胁迫和干旱胁迫的反应 | 第42-54页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 1.2 载体构建 | 第42页 |
| 1.3 PCR反应 | 第42页 |
| 1.4 总DNA提取 | 第42页 |
| 1.5 总RNA提取 | 第42页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第42页 |
| 1.7 实时荧光定量PCR | 第42页 |
| 1.8 DNA琼脂糖凝胶电泳回收及质粒提取 | 第42页 |
| 1.9 SDR基因的遗传转化 | 第42页 |
| 1.10 拟南芥转化与筛选 | 第42-43页 |
| 1.11 洋葱表皮侵染与共培养 | 第43页 |
| 1.12 转基因材料鉴定 | 第43页 |
| 1.13 Western blot分析 | 第43-44页 |
| 1.14 种子萌发率,子叶变绿和根长测定 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-53页 |
| 2.1 阳性植株鉴定 | 第45-47页 |
| 2.2 非生物胁迫以及ABA处理下SDR的表达分析 | 第47页 |
| 2.3 SDR在植物中的组织表达模式与蛋白亚细胞定位 | 第47-48页 |
| 2.4 35S:SDR和35S:AntiSDR植株对盐胁迫敏感性鉴定 | 第48-51页 |
| 2.5 35S:SDR和35S:AntiSDR植株对干旱胁迫敏感性鉴定 | 第51-52页 |
| 2.6 35S:SDR影响了胁迫响应基因的表达 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 3.1 SDR参与植物对盐胁迫和干旱胁迫的响应 | 第53-54页 |
| 第三章 利用酵母双杂交系统筛选SDR相互作用蛋白 | 第54-66页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第54-55页 |
| 1.2 载体构建 | 第55-56页 |
| 1.3 PCR反应 | 第56页 |
| 1.4 总RNA提取 | 第56页 |
| 1.5 cDNA合成 | 第56页 |
| 1.6 DNA琼脂糖凝胶电泳回收及质粒提取 | 第56页 |
| 1.7 SDR基因的遗传转化 | 第56页 |
| 1.8 酵母感受态制备及转化 | 第56页 |
| 1.9 诱饵载体pGBKT7-SDR的毒性与自激活作用检验 | 第56页 |
| 1.10 通过酵母融合筛选相互作用分子 | 第56-57页 |
| 1.11 阳性克隆的严谨筛选与文库质粒纯化 | 第57页 |
| 1.12 菌落PCR鉴定 | 第57页 |
| 1.13 酵母质粒提取 | 第57页 |
| 1.14 转化大肠杆菌送测序 | 第57-58页 |
| 1.15 基因序列分析 | 第58页 |
| 1.16 文库质粒回转含诱饵的酵母 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-63页 |
| 2.1 重组质粒pGBKT7-SDR构建及鉴定 | 第58页 |
| 2.2 重组诱饵载体pGBKT7-SDR的毒性及自激活检测 | 第58-59页 |
| 2.3 文库滴度检测 | 第59-60页 |
| 2.4 杂交效率检测 | 第60页 |
| 2.5 阳性克隆严谨筛选 | 第60-62页 |
| 2.6 阳性克隆菌落PCR | 第62页 |
| 2.7 文库质粒回转含诱饵的酵母 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 全文小结 | 第66-68页 |
| 创新点 | 第68-70页 |
| 存在问题 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 攻读硕士学位期间已发表的论文 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
