致谢 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-21页 |
1 病原学 | 第11-14页 |
1.1 发现与分类 | 第11-12页 |
1.2 基因组结构特点 | 第12-13页 |
1.3 形态及染色特性 | 第13-14页 |
1.4 运动性及抵抗力 | 第14页 |
1.5 体外培养 | 第14页 |
2 流行病学 | 第14-16页 |
2.1 流行特点 | 第14页 |
2.2 传播途径 | 第14-15页 |
2.3 地理分布及宿主范围 | 第15页 |
2.4 动物感染情况 | 第15-16页 |
3 致病机理 | 第16页 |
4 临床症状 | 第16-17页 |
5 诊断方法 | 第17-19页 |
5.1 显微镜检测方法 | 第17-18页 |
5.2 血清学检测方法 | 第18页 |
5.3 分子生物学检测方法 | 第18-19页 |
6 结语 | 第19-21页 |
第二部分 羊嗜血支原体巢式PCR检测方法的建立与应用 | 第21-33页 |
引言 | 第21页 |
1 材料与方法 | 第21-25页 |
1.1 主要试剂及仪器 | 第21页 |
1.2 样品来源 | 第21页 |
1.3 DNA的提取 | 第21-22页 |
1.4 引物设计与合成 | 第22-23页 |
1.5 优化巢式PCR反应体系及反应条件 | 第23页 |
1.6 最适退火温度的筛选 | 第23页 |
1.7 产物的回收、克隆及测序 | 第23-24页 |
1.8 特异性试验 | 第24页 |
1.9 敏感性试验 | 第24页 |
1.10 重复性试验 | 第24页 |
1.11 临床样本检测 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-30页 |
2.1 巢式PCR扩增 | 第25页 |
2.2 巢式PCR反应体系及反应条件 | 第25-28页 |
2.3 最适退火温度筛选结果 | 第28-29页 |
2.4 序列测定及同源性分析 | 第29页 |
2.5 特异性试验结果 | 第29页 |
2.6 敏感性试验结果 | 第29页 |
2.7 重复性试验结果 | 第29-30页 |
2.8 临床样本检测结果 | 第30页 |
3 结论与讨论 | 第30-33页 |
3.1 本文建立的巢式PCR方法具有良好的特异性和敏感性 | 第30-31页 |
3.2 嗜血支原体有潜在的人兽共患风险 | 第31-33页 |
第三部分 我国部分地区羊嗜血支原体分子流行病学研究 | 第33-41页 |
引言 | 第33页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
1.1 样品来源 | 第33页 |
1.2 主要仪器及耗材 | 第33-34页 |
1.3 主要试剂及其制备 | 第34-35页 |
1.4 DNA提取 | 第35页 |
1.5 巢式PCR扩增 | 第35页 |
1.6 PCR产物鉴定 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-38页 |
2.1 羊嗜血支原体PCR扩增结果 | 第35页 |
2.2 不同农场不同地区羊嗜血支原体感染情况 | 第35页 |
2.3 不同品种羊嗜血支原体感染情况 | 第35-37页 |
2.4 不同年龄、不同性别和不同饲养方式羊嗜血支原体感染情况 | 第37-38页 |
3 结论与讨论 | 第38-41页 |
3.1 河南、云南、陕西等8省区均有羊嗜血支原体感染且感染率差异较大 | 第38-39页 |
3.2 中国部分地区羊嗜血支原体总体感染率较高 | 第39页 |
3.3 不同性别、不同饲养方式下羊嗜血支原体感染率差异显著 | 第39-41页 |
第四部分 基于16SrRNA基因的羊嗜血支原体种系发育分析 | 第41-49页 |
引言 | 第41页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
1.1 样品来源 | 第41页 |
1.2 主要仪器与耗材 | 第41页 |
1.3 主要试剂及其制备 | 第41页 |
1.4 PCR扩增(16SrRNA基因的扩增) | 第41页 |
1.5 PCR产物鉴定 | 第41页 |
1.6 测序及序列分析 | 第41-43页 |
1.7 核苷酸序列登录号 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-44页 |
2.1 PCR扩增结果 | 第43页 |
2.2 羊嗜血支原体16SrRNA基因序列分析 | 第43-44页 |
2.3 基于羊嗜血支原体16SrRNA基因的种系发育分析 | 第44页 |
3 结论与讨论 | 第44-49页 |
3.1 ‘Candidatus M.haemovis’可能是M.ovis16S rRNA基因的另一个不同拷贝 | 第44-47页 |
3.2 M.ovis分离株可能存在人兽共患风险 | 第47-49页 |
全文结论&创新点 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
ABSTRACT | 第57-59页 |
个人简历 | 第61页 |