摘要 | 第5-9页 |
abstract | 第9-13页 |
英文缩略词 | 第16-17页 |
第一部分 旋毛虫成虫特异性DNase Ⅱ-1和DNase Ⅱ-7原核表达与鉴定 | 第17-62页 |
1.材料与方法 | 第18-38页 |
1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
1.2 主要仪器 | 第19页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第19-24页 |
1.4 实验动物、旋毛虫虫种 | 第24页 |
1.5 主要方法 | 第24-38页 |
2.结果 | 第38-59页 |
2.1 生物信息学分析 | 第38-44页 |
2.2 TsDNase Ⅱ-1/7特异性引物设计 | 第44-45页 |
2.3 TsDNase Ⅱ-1/7基因的PCR扩增 | 第45页 |
2.4 TsDNase Ⅱ-1/7重组质粒的构建 | 第45-47页 |
2.5 rTsDNase Ⅱ-1/7蛋白的SDS-PAGE分析 | 第47-49页 |
2.6 ELISA检测rTsDNase Ⅱ-1/7特异性免疫血清的抗体效价及抗体反应 | 第49-51页 |
2.7 旋毛虫TsDNase Ⅱ-1/7的westernblot分析 | 第51-52页 |
2.8 旋毛虫不同虫期TsDNase Ⅱ-1/7的转录水平鉴定 | 第52页 |
2.9 TsDNase Ⅱ-1/7在旋毛虫不同发育时期虫体表面的表达与定位 | 第52-54页 |
2.10 TsDNase Ⅱ-1/7在旋毛虫不同发育时期虫体内部的表达 | 第54-55页 |
2.11 rTsDNase Ⅱ-1/7免疫血清对肠道感染性幼虫体外侵入IEC的抑制作用 | 第55-56页 |
2.12 rTsDNase Ⅱ-1/7免疫血清介导的抗体依赖的细胞毒作用(ADCC) | 第56-57页 |
2.13 小鼠经rTsDNase Ⅱ-1/7免疫后的旋毛虫肌幼虫攻击感染实验 | 第57-59页 |
3.讨论 | 第59-60页 |
4.小结 | 第60-62页 |
第二部分 旋毛虫TsDNase ⅡDNA疫苗的构建及其诱导的保护性免疫 | 第62-90页 |
1.实验材料 | 第62-74页 |
1.1 主要试剂及试剂配制 | 第62-63页 |
1.2 主要仪器 | 第63页 |
1.3 实验动物、旋毛虫虫种、菌株和细胞系 | 第63-64页 |
1.4 主要方法 | 第64-74页 |
1.5 统计学处理 | 第74页 |
2.结果 | 第74-87页 |
2.1 真核表达质粒pcDNA3.1-TsDNase Ⅱ-1/7的双酶切鉴定 | 第74页 |
2.2 重组表达载体pcDNA3.1-TsDNase Ⅱ-1/7电转减毒沙门氏菌鉴定 | 第74-75页 |
2.3 重组沙门氏菌ΔcyaSL1344/pcDNA3.1-TsDNase Ⅱ-1/7稳定性鉴定 | 第75-76页 |
2.4 pcDNA3.1-TsDNase Ⅱ-1/7重组质粒的体外表达验证 | 第76-77页 |
2.5 小鼠体内TsDNase Ⅱ-1/7基因转录检测 | 第77页 |
2.6 小鼠体内rTsDNase Ⅱ-1/7蛋白表达检测 | 第77-79页 |
2.7 TsDNase Ⅱ-1/7DNA疫苗免疫血清的抗体效价及免疫后血清抗体变化 | 第79-80页 |
2.8 间接ELISA法检测肠道冲洗液中的IgA | 第80-81页 |
2.9 DNA疫苗免疫小鼠的细胞因子测定 | 第81-82页 |
2.10 TsDNase Ⅱ-1/7在旋毛虫不同发育时间虫体的表达与定位 | 第82-85页 |
2.11 小鼠TsDNase Ⅱ-1/7DNA疫苗免疫后旋毛虫肌幼虫攻击感染实验 | 第85-86页 |
2.12 旋毛虫雌虫72h新生幼虫产量测定 | 第86-87页 |
3.讨论 | 第87-88页 |
4.小结 | 第88-90页 |
全文结论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-96页 |
综述 脱氧核糖核酸酶Ⅱ研究进展 | 第96-113页 |
参考文献 | 第108-113页 |
个人简历、博士期间发表的学术论文 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |