| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 橡胶树白粉病概述 | 第11-15页 |
| 1.1.1 橡胶树 | 第11-12页 |
| 1.1.2 橡胶树白粉菌的发生及危害情况 | 第12页 |
| 1.1.3 病害症状 | 第12-13页 |
| 1.1.4 病原菌形态及生物学特性 | 第13页 |
| 1.1.5 病害侵染循环和侵染过程 | 第13-14页 |
| 1.1.6 病害流行规律 | 第14页 |
| 1.1.7 病害防治措施 | 第14-15页 |
| 1.2 病害监测 | 第15页 |
| 1.3 病原菌监测 | 第15-17页 |
| 1.3.1 玻片法 | 第16页 |
| 1.3.2 孢子捕捉器法 | 第16-17页 |
| 1.4 橡胶树白粉菌的检测方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 形态学检测 | 第17页 |
| 1.4.2 常规PCR检测 | 第17-18页 |
| 1.5 nested-PCR在植物病原菌检测方面的应用 | 第18页 |
| 1.5.1 nested-PCR的原理 | 第18页 |
| 1.5.2 nested-PCR的检测应用 | 第18页 |
| 1.6 LAMP在植物病原菌检测方面的应用 | 第18-20页 |
| 1.6.1 LAMP的概述 | 第18-19页 |
| 1.6.2 LAMP技术反应原理 | 第19-20页 |
| 1.6.3 LAMP技术反应结果方式 | 第20页 |
| 1.6.4 LAMP的应用 | 第20页 |
| 1.7 本研究目的意义 | 第20-21页 |
| 1.8 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.9 技术路线 | 第22-23页 |
| 2 材料方法 | 第23-36页 |
| 2.1 供试材料 | 第23页 |
| 2.2 主要仪器及试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.2 主要试剂及配制 | 第24页 |
| 2.3 试验方法 | 第24-30页 |
| 2.3.1 供试菌株的收集与保存 | 第24-25页 |
| 2.3.2 供试材料DNA的提取 | 第25-27页 |
| 2.3.3 DNA浓度测定 | 第27页 |
| 2.3.4 特异性引物设计与合成 | 第27-30页 |
| 2.4 反应体系条件的优化 | 第30-31页 |
| 2.4.1 常规PCR反应体系优化 | 第30页 |
| 2.4.2 nested-PCR反应体系优化 | 第30页 |
| 2.4.3 LAMP反应体系优化 | 第30-31页 |
| 2.5 特异性引物检测 | 第31-32页 |
| 2.5.1 常规PCR引物特异性检测 | 第31页 |
| 2.5.2 nested-PCR引物特异性检测 | 第31页 |
| 2.5.3 LAMP引物特异性检测 | 第31-32页 |
| 2.6 引物灵敏度检测 | 第32-33页 |
| 2.6.1 常规PCR灵敏度检测 | 第32页 |
| 2.6.2 nested-PCR灵敏度检测 | 第32页 |
| 2.6.3 LAMP灵敏度检测 | 第32-33页 |
| 2.7 人工接种橡胶树叶片中橡胶白粉菌的检测 | 第33-34页 |
| 2.7.1 人工接种方法 | 第33-34页 |
| 2.7.2 常规PCR检测 | 第34页 |
| 2.7.3 nested-PCR检测 | 第34页 |
| 2.7.4 LAMP检测 | 第34页 |
| 2.8 切胶回收及测序 | 第34-36页 |
| 2.8.1 切胶回收 | 第34-35页 |
| 2.8.2 克隆转化及测序 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-64页 |
| 3.1 供试材料DNA的提取 | 第36页 |
| 3.2 引物特异性检测与序列比对 | 第36-44页 |
| 3.2.1 ITS序列中设计所设计的引物的扩增 | 第36-38页 |
| 3.2.2 常规PCR引物特异性检测 | 第38-39页 |
| 3.2.3 nested-PCR引物特异性检测 | 第39-42页 |
| 3.2.4 LAMP引物特异性检测 | 第42-44页 |
| 3.3 扩增体系的优化 | 第44-47页 |
| 3.3.1 常规PCR扩增体系的优化 | 第44-45页 |
| 3.3.2 nested-PCR扩增体系的优化 | 第45页 |
| 3.3.3 LAMP扩增体系的优化 | 第45-47页 |
| 3.4 引物灵敏度检测 | 第47-50页 |
| 3.4.1 常规PCR灵敏度检测 | 第47-48页 |
| 3.4.2 nested-PCR灵敏度检测 | 第48-49页 |
| 3.4.3 LAMP灵敏度检测 | 第49-50页 |
| 3.5 人工接种橡胶树叶片中橡胶白粉菌的检测 | 第50-62页 |
| 3.5.1 常规PCR检测 | 第50-51页 |
| 3.5.2 nested-PCR检测 | 第51-52页 |
| 3.5.3 LAMP检测 | 第52-54页 |
| 3.5.4 数据分析 | 第54-62页 |
| 3.6 便携式孢子捕捉器玻片上DNA的提取 | 第62-64页 |
| 3.6.1 玻片上橡胶树白粉菌分生孢子的收集 | 第62-63页 |
| 3.6.2 OMEGA真菌试剂盒法及CTAB法提取DNA | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-69页 |
| 4.1 特异性引物的设计 | 第64-65页 |
| 4.2 nested-PCR对橡胶树白粉菌的检测 | 第65-66页 |
| 4.3 LAMP对橡胶树白粉菌的检测 | 第66-67页 |
| 4.3.1 LAMP的引物纯化方式 | 第66页 |
| 4.3.2 LAMP引物的筛选 | 第66页 |
| 4.3.3 LAMP检测结果判断 | 第66-67页 |
| 4.3.4 LAMP在橡胶树白粉菌方面的检测结果 | 第67页 |
| 4.4 人工接种橡胶树白粉菌需注意的问题 | 第67-68页 |
| 4.5 分子检测技术在其他方面的应用 | 第68-69页 |
| 5 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 攻读硕士期间发表或者待发表的文章 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |