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禽腺病毒血清4型新型检测方法的建立

致谢第4-8页
英文缩写词表第8-9页
摘要第9-11页
文献综述第11-24页
    1 禽腺病毒生物学特点第11-14页
        1.1 禽腺病毒的形态特征及理化性质第11-12页
        1.2 禽腺病毒主要蛋白及功能第12-14页
    2 禽腺病毒血清4型的流行病学研究第14-15页
    3 禽腺病毒的检测方法第15-20页
        3.1 病原的分离鉴定第15页
        3.2 血清学检测方法第15-17页
        3.3 分子生物学检测方法第17-20页
    4 重组酶聚合酶扩增技术第20-23页
    5 本研究的目的与意义第23-24页
试验研究第24-58页
    试验一:禽腺病毒血清4型RPA-LFD快速检测方法的建立第24-31页
        1 材料与方法第24-27页
            1.1 材料第24-25页
            1.2 DNA的提取第25页
            1.3 RPA引物设计第25页
            1.4 FAd V-4 hexon基因标准质粒的构建第25-26页
            1.5 RPA-LFD反应体系及反应条件的确定第26-27页
            1.6 试验结果的判定标准第27页
            1.7 特异性评价第27页
            1.8 敏感性评价第27页
            1.9 RPA-LFD方法检测FAd V-4 的应用第27页
        2 结果第27-30页
            2.1 RPA反应体系及反应条件的优化第27-29页
            2.2 特异性评价第29页
            2.3 敏感性评价第29-30页
            2.4 临床样品的检测第30页
        3 小结与讨论第30-31页
    试验二:基于FAd V-4 中国流行株Fiber2蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立第31-42页
        1 材料与方法第31-35页
            1.1 材料第31-32页
            1.2 p ET32a-fiber2-knob表达载体的构建第32-33页
            1.3 重组蛋白knob的表达纯化与免疫原性分析第33-34页
            1.4 重组knob蛋白间接ELISA方法的建立第34页
            1.5 特异性试验第34页
            1.6 敏感性试验第34-35页
            1.7 重复性试验第35页
            1.8 符合率试验第35页
            1.9 临床血清样品检测第35页
        2 结果第35-40页
            2.1 重组质粒p ET32a-fiber2-knob的构建第35-36页
            2.2 重组蛋白的表达纯化western blotting分析第36页
            2.3 间接ELISA最佳反应条件的确定第36-38页
            2.4 间接ELISA方法判定标准的确定第38页
            2.5 特异性试验第38页
            2.6 敏感性试验第38页
            2.7 重复性试验第38-39页
            2.8 准确性试验第39页
            2.9 临床血清样品检测第39-40页
        3 小结与讨论第40-42页
    试验三:抗禽腺病毒hexon469-775aa单克隆抗体的制备与鉴定第42-52页
        1 材料与方法第42-47页
            1.1 材料第42页
            1.2 抗原的制备第42-45页
            1.3 动物免疫第45页
            1.4 检测FAd V-4 抗体的间接ELISA方法的建立第45页
            1.5 细胞融合与单克隆抗体筛选第45-47页
            1.6 单克隆抗体的鉴定第47页
            1.7 中和活性检测第47页
        2 结果第47-51页
            2.1 重组p ET32a-hexon469-775aa质粒的鉴定第47-48页
            2.2 重组Hexon469-775aa蛋白的表达、纯化与反应原性分析第48-49页
            2.3 抗体检测ELISA方法的最佳条件第49页
            2.4 杂交瘤细胞株的获得第49-50页
            2.5 单抗亚类的鉴定第50页
            2.6 单抗反应原性分析第50页
            2.7 单抗特异性的鉴定第50-51页
            2.8 单克隆抗体中和活性的鉴定第51页
        3 小结与讨论第51-52页
    试验四.禽腺病毒双抗体夹心ELISA检测抗原的方法建立第52-58页
        1 材料与方法第52-54页
            1.1 材料第52页
            1.2 双抗体夹心ELISA方法的基本步骤第52-53页
            1.3 禽腺病毒双抗体夹心ELISA方法的建立第53-54页
            1.4 特异性试验第54页
            1.5 敏感性试验第54页
            1.6 重复性试验第54页
            1.7 符合率试验第54页
        2 结果第54-56页
            2.1 双抗体夹心ELISA最佳反应条件的确定第54-55页
            2.2 双抗体夹心ELISA判定标准的确定第55页
            2.3 特异性试验第55页
            2.4 敏感性试验第55-56页
            2.5 重复性试验第56页
            2.6 符合率试验第56页
        3 小结与讨论第56-58页
全文总结第58-59页
参考文献第59-68页
ABSTRACT第68-70页
附作者读研期间发表文章第71页

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