中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-25页 |
一、天然免疫概述 | 第11-19页 |
1. RIG-I样受体家族(RLRs) | 第12-17页 |
2. 其它模式识别受体 | 第17-19页 |
二、干扰素研究进展 | 第19-22页 |
1. 干扰素的分类 | 第20-21页 |
2. 干扰素的生物学功能 | 第21页 |
3. 干扰素调节的宿主基因 | 第21-22页 |
三、长链非编码RNA研究进展 | 第22-25页 |
材料与方法 | 第25-40页 |
一、材料 | 第25-32页 |
1. 细胞系和病毒 | 第25页 |
2. 质粒 | 第25-26页 |
3. 抗体 | 第26-27页 |
4. 部分生化试剂 | 第27-29页 |
5. 工具酶 | 第29页 |
6. 溶液配制 | 第29-31页 |
7. 主要仪器 | 第31-32页 |
8. 数据处理和分析软件 | 第32页 |
二、实验方法 | 第32-40页 |
1. 细胞培养 | 第32页 |
2. 病毒的制备及抗病毒实验 | 第32-33页 |
3. lncRNA差异表达芯片制备与分析 | 第33-34页 |
4. lncRNA对病毒感染的影响 | 第34-35页 |
5. 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35页 |
6. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE) | 第35-36页 |
7. 荧光实时定量RT-PCR | 第36-37页 |
8. 荧光素酶报告基因实验 | 第37页 |
9. 免疫荧光实验和细胞内免疫印迹 | 第37-38页 |
10. RNA FISH检测lncATV在细胞的定位 | 第38-39页 |
11. 统计分析 | 第39-40页 |
实验结果 | 第40-74页 |
一、三种类型干扰素调节的lncRNA表达谱 | 第40-46页 |
1. 干扰素处理条件的确定 | 第40-42页 |
2. 干扰素处理Huh7细胞的样本质量的验证 | 第42页 |
3. 三种类型干扰素调节的lncRNA表达谱分析 | 第42-44页 |
4. 芯片结果的验证 | 第44-46页 |
二、lncATV的生物学特性 | 第46-52页 |
1. lncATV的克隆 | 第46-47页 |
2. 干扰素处理诱导lncATV的表达 | 第47页 |
3. 病毒感染诱导lncATV的表达 | 第47-48页 |
4. lncATV的蛋白编码能力预测 | 第48-49页 |
5. lncATV在不同细胞中的保守性 | 第49-50页 |
6. lncATV在不同细胞中的表达水平差异 | 第50页 |
7. lncATV在细胞内的定位 | 第50-52页 |
三、lncATV影响多种病毒的感染 | 第52-61页 |
1. 沉默lncATV抑制HCV的感染 | 第52-54页 |
2. 沉默lncATV抑制ZIKV的感染 | 第54-55页 |
3. 沉默lncATV抑制NDV病毒的感染 | 第55-57页 |
4. 沉默lncATV抑制SeV病毒的感染 | 第57-58页 |
5. 过表达lncATV促进HCV的感染 | 第58-59页 |
6. 在Hep2细胞中沉默lncATV抑制NDV和Sev病毒的感染 | 第59-61页 |
四、lncATV调节细胞内的天然免疫反应 | 第61-70页 |
1. 沉默lncATV增强RIG-I介导的IFN-β和ISRE的报告基因活性 | 第61-62页 |
2. 过表达lncATV抑制RIG-I介导的ISRE的激活 | 第62-63页 |
3. 过表达lncATV抑制病毒诱导的IFN-β和ISRE报告基因活性 | 第63-64页 |
4. 沉默lncATV显著激活RLR信号通路 | 第64-66页 |
5. 沉默lncATV显著激活Ⅰ型干扰素介导的天然免疫反应 | 第66-68页 |
6. 过表达lncATV抑制RLR和Ⅰ型干扰素信号通路 | 第68-70页 |
五、lncATV调节天然免疫的机制研究 | 第70-74页 |
1. 不同刺激剂的作用下沉默lncATV对IFN-β报告基因的影响 | 第70-71页 |
2. 不同天然免疫刺激剂作用下沉默lncATV对ISRE报告基因的影响 | 第71-72页 |
3. 在RIG-I缺失的Huh7.5.1中敲低lncATV对病毒感染的影响 | 第72页 |
4. 利用siRNA敲低内源RIG-I对lncATV发挥抗病毒作用的影响 | 第72-74页 |
讨论 | 第74-77页 |
结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
文献综述 | 第86-96页 |
参考文献 | 第93-96页 |
缩略语 | 第96-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
个人简历及发表文章 | 第100页 |