| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 我国及贵州羊养殖业目前现状 | 第11页 |
| 1.2 我国及贵州省羊养殖业的废弃物排放概况 | 第11-12页 |
| 1.3 畜禽粪便对环境及人体危害 | 第12-13页 |
| 1.4 畜禽粪便资源化处理技术 | 第13-14页 |
| 1.4.1 饲料化 | 第13-14页 |
| 1.4.2 能源化 | 第14页 |
| 1.4.3 肥料化 | 第14页 |
| 1.5 堆肥的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.5.1 堆肥的原理、分类及现状 | 第14-16页 |
| 1.5.2 堆肥的影响因素 | 第16-17页 |
| 1.5.3 堆肥腐熟度评价指标 | 第17-18页 |
| 1.5.3.1 物理评价指标 | 第17页 |
| 1.5.3.2 化学评价指标 | 第17-18页 |
| 1.5.3.3 生物学指标评价法 | 第18页 |
| 1.5.4 堆肥存在的问题 | 第18页 |
| 1.6 堆肥复合菌剂的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.6.1 堆肥复合菌剂的应用 | 第18-19页 |
| 1.6.2 堆肥复合菌剂存在的问题 | 第19-20页 |
| 1.7 微生物降解纤维素的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.7.1 纤维素降解细菌 | 第20页 |
| 1.7.2 纤维素降解真菌 | 第20-21页 |
| 1.7.3 纤维素降解放线菌 | 第21页 |
| 1.8 堆肥过程中微生物菌群的影响 | 第21-22页 |
| 1.9 研究的意义及内容 | 第22-24页 |
| 1.9.1 研究的意义 | 第22-23页 |
| 1.9.2 研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 1.10 研究技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 纤维素降解菌的筛选 | 第25-39页 |
| 2.1 试验材料及仪器设备 | 第25-27页 |
| 2.1.1 原料 | 第25页 |
| 2.1.2 筛菌样品来源 | 第25页 |
| 2.1.3 培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第26页 |
| 2.1.6 溶液及缓冲液的配置 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 纤维素降解菌的分离、纯化与保藏 | 第27页 |
| 2.2.2 纤维素降解菌的筛选 | 第27页 |
| 2.2.3 滤纸条降解试验 | 第27页 |
| 2.2.4 纤维素降解菌株酶活力测定 | 第27-29页 |
| 2.2.4.1 粗纤维素酶液的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.4.2 葡萄糖标准曲线绘制 | 第28页 |
| 2.2.4.3 酶活力测定 | 第28-29页 |
| 2.2.5 纤维素降解菌的分子鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.5.1 细菌基因组DNA提取 | 第29页 |
| 2.2.5.2 菌株16SrDNA序列扩增 | 第29页 |
| 2.2.5.3 真菌基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.5.4 菌株ITS基因序列扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.5.5 PCR扩增序列测定及分析 | 第30页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.3.1 纤维素降解菌的分离 | 第30页 |
| 2.3.2 纤维素降解菌的初筛 | 第30-31页 |
| 2.3.3 纤维素酶降解菌株的滤纸条崩解试验 | 第31-33页 |
| 2.3.4 纤维素降解菌株的酶活定量测定 | 第33-34页 |
| 2.3.5 纤维素降解菌株的分子鉴定 | 第34-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 高效纤维素降解复合菌剂的构建 | 第39-46页 |
| 3.1 试验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 药品、试剂和仪器 | 第39页 |
| 3.1.2 菌株和培养基 | 第39页 |
| 3.1.3 溶液和缓冲液配制 | 第39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 纤维素降解菌菌株间拮抗性试验 | 第39页 |
| 3.2.2 复合菌剂组合和筛选 | 第39-40页 |
| 3.2.2.1 滤纸条降解试验 | 第40页 |
| 3.2.2.2 酶活测定 | 第40页 |
| 3.2.2.3 秸秆降解试验 | 第40页 |
| 3.2.3 复合菌菌株与R菌剂拮抗试验 | 第40-41页 |
| 3.2.4 复合菌剂的制备 | 第41页 |
| 3.2.5 数据分析 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.3.1 纤维素降解菌株拮抗性研究 | 第41页 |
| 3.3.2 不同组合复合菌剂滤纸条降解试验 | 第41-42页 |
| 3.3.3 不同组合复合菌剂酶活测定 | 第42页 |
| 3.3.4 不同组合复合菌剂降解秸秆试验 | 第42-43页 |
| 3.3.5 复合菌剂菌株与R菌剂拮抗性试验 | 第43页 |
| 3.3.6 复合菌剂M的制备 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 3.5 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 复合微生物菌剂在羊粪堆肥中应用研究 | 第46-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46页 |
| 4.1.1 堆肥原料 | 第46页 |
| 4.1.2 堆肥微生物菌剂 | 第46页 |
| 4.1.3 试验试剂 | 第46页 |
| 4.1.4 仪器设备 | 第46页 |
| 4.2 堆肥试验 | 第46-50页 |
| 4.2.1 堆体的建立 | 第46-47页 |
| 4.2.2 菌剂的添加 | 第47页 |
| 4.2.3 堆肥管理 | 第47页 |
| 4.2.4 堆肥样品的采集 | 第47页 |
| 4.2.5 堆肥理化特性测定 | 第47-48页 |
| 4.2.5.1 气味与色度 | 第47页 |
| 4.2.5.2 温度测定 | 第47页 |
| 4.2.5.3 含水率测定 | 第47页 |
| 4.2.5.4 pH值、电导率(EC)和E4/E6值测定 | 第47-48页 |
| 4.2.5.5 种子发芽指数(GI) | 第48页 |
| 4.2.6 纤维素和半纤维素含量的测定 | 第48页 |
| 4.2.7 滤纸酶、羧甲基纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活测定 | 第48页 |
| 4.2.8 生物有机肥指标检测 | 第48页 |
| 4.2.8.1 有机质、总氮、速效磷和速效钾测定 | 第48页 |
| 4.2.8.2 有效活菌数测定 | 第48页 |
| 4.2.8.3 粪大肠菌群数的测定 | 第48页 |
| 4.2.8.4 蛔虫卵死亡率的测定 | 第48页 |
| 4.2.9 堆肥过程中微生物的多样性分析 | 第48-50页 |
| 4.2.9.1 样品采集 | 第48页 |
| 4.2.9.2 堆肥样品总DNA的提取 | 第48-49页 |
| 4.2.9.3 建库测序 | 第49页 |
| 4.2.9.4 数据分析 | 第49页 |
| 4.2.9.5 多样性分析 | 第49-50页 |
| 4.2.10 数据分析 | 第50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-72页 |
| 4.3.1 堆肥过程中物理化学和生物学特性的变化 | 第50-55页 |
| 4.3.1.1 堆肥过程中感官变化 | 第50-51页 |
| 4.3.1.2 堆肥过程中温度的变化 | 第51-52页 |
| 4.3.1.3 堆肥过程中含水率的变化 | 第52-53页 |
| 4.3.1.4 堆肥过程中pH值的变化 | 第53页 |
| 4.3.1.5 堆肥过程中电导率对堆肥的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.1.6 堆肥过程中E4/E6值的变化 | 第54页 |
| 4.3.1.7 堆肥过程中发芽指数的变化 | 第54-55页 |
| 4.3.2 堆肥过程中纤维素、半纤维素和纤维素酶的变化 | 第55-58页 |
| 4.3.2.1 堆肥过程中纤维素含量的变化 | 第55-56页 |
| 4.3.2.2 堆肥过程中半纤维素含量的变化 | 第56-57页 |
| 4.3.2.3 堆肥过程中纤维素酶活性变化 | 第57-58页 |
| 4.3.3 堆肥过程中营养指标的变化 | 第58-61页 |
| 4.3.3.1 堆肥过程中接种菌剂对有机质的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.3.2 堆肥过程中接种菌剂对碳氮比的影响 | 第59页 |
| 4.3.3.3 堆肥过程中接种菌剂对全氮的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.3.4 堆肥过程中接种菌剂对速效磷的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.3.5 堆肥过程中接种菌剂对速效钾的影响 | 第61页 |
| 4.3.4 接种微生物菌剂发酵堆肥中微生物和蛔虫卵数量比较 | 第61-62页 |
| 4.3.5 堆肥过程中细菌群落结构组成变化 | 第62-66页 |
| 4.3.5.1 堆肥过程中细菌群落结构分析 | 第62-64页 |
| 4.3.5.2 物种多样性分析 | 第64-66页 |
| 4.3.5.3 细菌群落结构变化与环境因子相关性分析 | 第66页 |
| 4.3.6 堆肥过程中真菌群落结构及多样性 | 第66-71页 |
| 4.3.6.1 堆肥过程中真菌群落结构分析 | 第66-68页 |
| 4.3.6.2 物种多样性分析 | 第68-71页 |
| 4.3.6.3 真菌群落结构变化与环境因子相关性分析 | 第71页 |
| 4.3.7 堆肥发酵效果综合评价 | 第71-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-76页 |
| 4.4.1 接种微生物菌剂对堆肥温度的影响 | 第73页 |
| 4.4.2 翻堆对堆肥的影响 | 第73页 |
| 4.4.3 接种微生物菌剂对堆体中纤维素和半纤维素的影响 | 第73-74页 |
| 4.4.4 菌剂对堆肥肥效的影响 | 第74页 |
| 4.4.5 堆肥过程中微生物群落变化 | 第74-76页 |
| 4.5 小结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
