摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 甲壳动物性别决定与性别分化的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 性别决定与性染色体 | 第12页 |
1.1.2 性别分化与内分泌器官 | 第12-13页 |
1.1.3 性别分化与相关基因 | 第13页 |
1.2 甲壳动物促雄性腺的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 促雄性腺的形态结构及位置 | 第14-15页 |
1.2.2 促雄性腺的功能研究 | 第15页 |
1.3 IAG基因的研究进展 | 第15-16页 |
1.3.1 IAG的化学性质与结构 | 第15-16页 |
1.3.2 IAG的功能研究 | 第16页 |
1.4 RNAI干扰在甲壳动物的应用研究 | 第16-17页 |
1.5 墨吉明对虾IAG基因研究的目的及意义 | 第17-18页 |
2 墨吉明对虾IAG基因cDNA及基因组DNA序列的生物信息学分析 | 第18-39页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验动物 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第19-31页 |
2.2.1 墨吉明对虾总RNA提取 | 第19页 |
2.2.2 墨吉明对虾cDNA模板的合成 | 第19-20页 |
2.2.3 墨吉明对虾IAG编码区(ORF)序列片段的扩增 | 第20-22页 |
2.2.4 墨吉明对虾IAG基因cDNA全长的获得 | 第22-28页 |
2.2.5 墨吉明对虾IAG基因组序列的克隆 | 第28-30页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第30-31页 |
2.3 实验结果与分析 | 第31-37页 |
2.3.1 FmIAG基因结构和序列分析 | 第31-35页 |
2.3.2 FmIAG氨基酸的序列比对和同源性分析 | 第35-36页 |
2.3.3 FmIAG的系统进化树分析 | 第36-37页 |
2.4 讨论 | 第37-39页 |
3 墨吉明对虾IAG基因的时空表达分析 | 第39-44页 |
3.1 材料与方法 | 第39-41页 |
3.1.1 试验试剂和仪器 | 第39页 |
3.1.2 实验对虾 | 第39页 |
3.1.3 样品总RNA的提取 | 第39-40页 |
3.1.4 表达引物设计和内参引物的选择 | 第40页 |
3.1.5 反转录第一链cDNA模板合成 | 第40页 |
3.1.6 荧光定量PCR扩增 | 第40-41页 |
3.1.7 荧光定量数据处理 | 第41页 |
3.2 结果与分析 | 第41-43页 |
3.2.1 FmIAG在对虾不同组织中的表达情况 | 第41页 |
3.2.2 FmIAG在对虾不同蜕皮期中的表达变化 | 第41页 |
3.2.3 FmIAG在对虾幼体发育时期中的表达特征 | 第41-43页 |
3.3 讨论 | 第43-44页 |
4 墨吉明对虾IAG基因RNA干扰实验 | 第44-48页 |
4.1 实验材料 | 第44页 |
4.1.1 实验对虾 | 第44页 |
4.1.2 试剂与材料 | 第44页 |
4.2 实验方法 | 第44-45页 |
4.2.1 T7接头引物设计和模板制备 | 第44页 |
4.2.2 FmIAG-dsRNA合成 | 第44-45页 |
4.2.3 FmIAG-dsRNA注射 | 第45页 |
4.2.4 样品提取 | 第45页 |
4.2.5 荧光定量数据处理 | 第45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-47页 |
4.4 讨论 | 第47-48页 |
5 墨吉明对虾IAG基因与眼柄的关系研究 | 第48-51页 |
5.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.1 实验对虾 | 第48页 |
5.1.2 试剂和材料 | 第48页 |
5.2 实验方法 | 第48-49页 |
5.2.1 单侧眼柄剪除实验 | 第48页 |
5.2.2 短时组织孵育实验 | 第48-49页 |
5.2.3 荧光定量数据处理 | 第49页 |
5.3 结果与分析 | 第49-50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
6 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61-62页 |
导师简介 | 第62页 |