| 致谢 | 第9-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1 引言 | 第15-16页 |
| 2 靶向基因组编辑技术原理 | 第16-20页 |
| 2.1 NHEJ修复途径 | 第16-17页 |
| 2.2 HR修复途径 | 第17-19页 |
| 2.3 其他修复途径 | 第19-20页 |
| 3 CRISPR/Cas系统介导的基因组编辑技术 | 第20-26页 |
| 3.1 CRISPR/Cas系统发展进程 | 第20-21页 |
| 3.2 CRISPR/Cas系统分类 | 第21-22页 |
| 3.3 CRISPR/Cas系统作用机制 | 第22-23页 |
| 3.4 CRISPR/Cas9系统在果蝇基因组编辑中的应用 | 第23-25页 |
| 3.5 CRISPR/Cas9系统的优势和局限 | 第25-26页 |
| 4 果蝇章鱼胺受体的研究 | 第26-30页 |
| 4.1 引言 | 第26-27页 |
| 4.2 章鱼胺受体的信号转导途径 | 第27-29页 |
| 4.3 果蝇章鱼胺受体的研究进展 | 第29-30页 |
| 5 展望 | 第30-31页 |
| 第二章 利用CRISPR/Cas9技术敲除果蝇white基因 | 第31-50页 |
| 1 引言 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-44页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第32页 |
| 2.2 主要质粒和菌株 | 第32-33页 |
| 2.3 主要试剂和仪器 | 第33页 |
| 2.4 CRISPR/Cas9靶位点的选择 | 第33-34页 |
| 2.5 Cas9 mRNA的制备 | 第34-36页 |
| 2.6 gRNA的制备 | 第36-38页 |
| 2.7 pDCC6-W1,pDCC6-W2载体制备 | 第38-41页 |
| 2.8 注射样品的配制 | 第41-42页 |
| 2.9 果蝇胚胎的显微注射 | 第42-43页 |
| 2.10 突变检测 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-49页 |
| 3.1 white基因序列分析和靶位点选择 | 第44-45页 |
| 3.2 Cas9 mRNA和gRNA的制备 | 第45-46页 |
| 3.3 pDCC6-W1;pDCC6-W2载体制备 | 第46页 |
| 3.4 G1代突变检测 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 利用tRNA-gRNA技术实现多位点打靶CG18208基因 | 第50-65页 |
| 1 引言 | 第50-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-58页 |
| 2.1 供试昆虫 | 第51页 |
| 2.2 CG18208基因靶位点选 | 第51-52页 |
| 2.3 Donor质粒制备 | 第52-54页 |
| 2.4 pCFD5-OA3质粒制备 | 第54-56页 |
| 2.5 果蝇胚胎显微注射 | 第56页 |
| 2.6 CG18208突变检测 | 第56-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-64页 |
| 3.1 CG18208 CDS序列分析和靶位点选择 | 第58-59页 |
| 3.2 pCFD5-OA3载体制备 | 第59-60页 |
| 3.3 GO代果蝇突变检 | 第60-62页 |
| 3.4 HRMA分析结果 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 总结 | 第65-66页 |
| 1 本研究的创新之处 | 第65页 |
| 2 本研究存在的问题 | 第65页 |
| 3 今后的研究方向 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-79页 |
