摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 国内外研究现状 | 第11-16页 |
1.1.1 植物耐盐机制 | 第11页 |
1.1.2 Na~+运输蛋白 | 第11-13页 |
1.1.3 类受体蛋白激酶 | 第13-15页 |
1.1.4 有丝分裂原活化蛋白激酶 | 第15-16页 |
1.2 瑞香狼毒 | 第16-17页 |
1.3 研究内容 | 第17-19页 |
第二章 ScMPK6、ScSrlk、ScSOS1基因的相关分析 | 第19-37页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第19页 |
2.1.1 植物材料和菌株 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂、酶与载体 | 第19页 |
2.1.3 实验仪器与设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-27页 |
2.2.1 各种溶液及培养基的配制 | 第19-20页 |
2.2.2 PCR引物设计 | 第20页 |
2.2.3 实验材料栽培与处理 | 第20-21页 |
2.2.4 提取总RNA | 第21页 |
2.2.5 合成cDNA第一链 | 第21-22页 |
2.2.6 PCR反应 | 第22-23页 |
2.2.7 目的片段回收 | 第23页 |
2.2.8 回收产物与克隆载体的连接 | 第23-24页 |
2.2.9 制备感受态细胞(CaCl_2法) | 第24-25页 |
2.2.10 连接产物转化大肠杆菌(蓝白斑筛选) | 第25页 |
2.2.11 菌落PCR | 第25-26页 |
2.2.12 质粒提取与酶切验证 | 第26页 |
2.2.13 基因序列分析 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
2.3.1 瑞香狼毒总RNA样品质量检测 | 第27-28页 |
2.3.2 目的基因片段的筛选与克隆 | 第28-29页 |
2.3.3 瑞香狼毒ScMPK6、ScSrlk、ScSOS1基因生物信息学分析 | 第29-34页 |
2.4 讨论 | 第34-37页 |
第三章 ScMPK6、ScSrlk、ScSOS1表达谱分析 | 第37-45页 |
3.1 材料与试剂 | 第37页 |
3.1.1 材料 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
3.1.3 实验仪器与设备 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-40页 |
3.2.1 qRT-PCR引物设计 | 第37-38页 |
3.2.2 RNA的提取与的cDNA第一链合成 | 第38页 |
3.2.3 ScSrlk基因目标序列的克隆 | 第38-39页 |
3.2.4 qRT-PCR | 第39-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-42页 |
3.3.1 瑞香狼毒总RNA样品质量检测 | 第40页 |
3.3.2 定量引物的筛选 | 第40-41页 |
3.3.3 瑞香狼毒ScMPK6、ScSrlk、ScSOS1基因的熔解曲线 | 第41页 |
3.3.4 盐胁迫处理下瑞香狼毒ScMPK6、ScSrlk、ScSOS1基因的表达谱 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-45页 |
第四章 ScMPK6与ScSrlk蛋白的互作关系 | 第45-57页 |
4.1 材料与试剂 | 第45-46页 |
4.1.1 材料 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
4.1.3 实验仪器与设备 | 第45-46页 |
4.2 实验方法 | 第46-52页 |
4.2.1 各种溶液的配制 | 第46-47页 |
4.2.2 ScMPK6与ScSrlk双分析荧光互补实验 | 第47-50页 |
4.2.3 ScMPK6与ScSrlk蛋白的原核表达 | 第50-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-56页 |
4.3.1 目标基因的克隆 | 第52-53页 |
4.3.2 ScMPK6、ScSrlk蛋白的互作验证 | 第53-54页 |
4.3.3 ScMPK6、ScSrlk蛋白的原核诱导表达 | 第54-56页 |
4.4 讨论 | 第56-57页 |
结论与展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-69页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第69-70页 |