中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
前言 | 第11-18页 |
参考文献 | 第13-18页 |
第一部分 硫化铋纳米材料的制备与表征 | 第18-28页 |
1.实验材料 | 第18-19页 |
1.1 试剂 | 第18页 |
1.2 仪器 | 第18-19页 |
2.实验方法 | 第19-20页 |
2.1 硫化铋纳米颗粒(BiNP)的制备与FITC标记 | 第19页 |
2.2 BiNP溶液浓度的测定 | 第19页 |
2.3 BiNP电镜样品的制备 | 第19-20页 |
2.4 BiNP在不同溶剂中水合粒径及表面电荷的测定 | 第20页 |
2.5 酸碱度对BiNP稳定性的影响 | 第20页 |
2.6 检测BiNP体内CT成像能力 | 第20页 |
3.实验结果 | 第20-24页 |
3.1 BiNP纳米材料的合成以及形态和大小的测定 | 第20-22页 |
3.2 BiNP纳米材料修饰连接异硫氰酸荧光素(FITC) | 第22页 |
3.3 BiNP纳米材料水合粒径以及表面电荷大小的测定 | 第22-23页 |
3.4 酸碱度对BiNP纳米材料稳定性的影响 | 第23-24页 |
3.5 BiNP具有显著的CT成像能力 | 第24页 |
4.讨论 | 第24-25页 |
5.小结 | 第25页 |
参考文献 | 第25-28页 |
第二部分 硫化铋纳米材料的细胞毒性以及内吞动力学的研究 | 第28-42页 |
1.实验材料 | 第28-30页 |
1.1 试剂 | 第28-29页 |
1.2 仪器 | 第29页 |
1.3 溶液配制 | 第29-30页 |
2.实验方法 | 第30-33页 |
2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
2.2 细胞毒性试验 | 第31页 |
2.3 HEK293细胞摄取BiNP的动力学研究 | 第31页 |
2.4 共聚焦显微镜观察 | 第31-32页 |
2.5 透射电子显微镜观察 | 第32页 |
2.6 细胞摄取BiNP的途径研究 | 第32页 |
2.7 BiNP-FITC与溶酶体的共定位 | 第32页 |
2.8 免疫荧光实验 | 第32-33页 |
2.9 统计学分析 | 第33页 |
3.实验结果 | 第33-38页 |
3.1 BiNP对肾细胞的毒性 | 第33-34页 |
3.2 BiNP细胞内吞动力学以及细胞内吞途径的研究 | 第34-37页 |
3.3 BiNP在细胞中的分布 | 第37-38页 |
4.讨论 | 第38-39页 |
5.小结 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三部分 硫化铋纳米材料引起的与自噬相关的肾损伤及其机制的研究 | 第42-66页 |
1.实验材料 | 第42-45页 |
1.1 实验试剂 | 第42-43页 |
1.2 实验仪器 | 第43-44页 |
1.3 溶液配制 | 第44-45页 |
2.实验方法 | 第45-49页 |
2.1 动物实验 | 第45-46页 |
2.2 血样采集 | 第46页 |
2.3 肾脏病理切片制备 | 第46页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第46页 |
2.5 单丹黄酰尸胺染色观察自噬的发生 | 第46-47页 |
2.6 透射电子显微镜观察自噬的超微结构 | 第47页 |
2.7 GFP-LC3质粒转染 | 第47页 |
2.8 Western blot检测自噬相关蛋白的表达 | 第47-48页 |
2.9 细胞内活性氧水平的检测 | 第48页 |
2.10 活性氧对自噬的影响 | 第48页 |
2.11 统计学分析 | 第48-49页 |
3.实验结果 | 第49-60页 |
3.1 BiNP引起血生化和肾脏病理学变化 | 第49-50页 |
3.2 BiNP引发肾脏发生自噬 | 第50-51页 |
3.3 自噬在BiNP引发的急性肾损伤中的作用 | 第51-53页 |
3.4 BiNP诱导HEK293细胞发生自噬 | 第53-56页 |
3.5 BiNP通过AMPK/mTOR信号通路引发自噬 | 第56-57页 |
3.6 活性氧对BiNP引发的自噬的影响 | 第57-60页 |
4.讨论 | 第60-61页 |
5.小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
第四部分 关于灵芝多糖修饰硫化铋纳米材料降低肾毒性并提高免疫力的问题探讨 | 第66-69页 |
参考文献 | 第67-69页 |
综述 | 第69-88页 |
参考文献 | 第79-88页 |
英文缩写列表 | 第88-89页 |
研究生期间发表论文以及参与课题 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-93页 |