| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略表 | 第7-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-19页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 Nrf2-ARE研究背景 | 第12-16页 |
| 2.1 Nrf2-ARE信号通路 | 第12-14页 |
| 2.2 Nrf2基本结构 | 第14页 |
| 2.3 Keap1蛋白的结构 | 第14-15页 |
| 2.4 小Maf蛋白的结构和分类 | 第15-16页 |
| 3 Nrf2-ARE研究进展 | 第16-17页 |
| 3.1 抗癌症作用 | 第16页 |
| 3.2 内质网应激和心血管疾病 | 第16页 |
| 3.3 线粒体功能 | 第16-17页 |
| 4 微囊藻毒素的研究进展 | 第17页 |
| 5 研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 褶纹冠蚌Nrf2和MafK基因的表达与功能分析 | 第19-66页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.2 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.3 仪器及试剂 | 第20-22页 |
| 2.3.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.3.2 实验试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
| 2.4 引物表 | 第22-23页 |
| 2.5 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.5.1 总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.5.2 SMART cDNA的合成 | 第23-25页 |
| 2.5.3 CpNrf2和CpMafK基因的克隆 | 第25-27页 |
| 2.5.4 CpNrf2和CpMafK基因的生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 2.5.5 RT-PCR检测CpNrf2和CpMaf K基因的表达水平 | 第29-30页 |
| 2.5.6 CpNrf2和CpMafK基因的原核表达及纯化 | 第30-33页 |
| 2.5.7 褶纹冠蚌2个Sigma-GST基因启动子的克隆 | 第33页 |
| 2.5.8 CpMafK蛋白与CpGST1和Cp GST2基因启动子的亲和分析 | 第33-34页 |
| 2.5.9 CpNrf2和CpMafK多克隆抗体的制备及其性能鉴定 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-60页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第35页 |
| 3.2 褶纹冠蚌Nrf2和MafK基因的克隆 | 第35-37页 |
| 3.3 Cp Nrf2基因cDNA序列及推导氨基酸序列分析 | 第37-40页 |
| 3.4 CpMafK基因cDNA序列及推导氨基酸序列分析 | 第40-42页 |
| 3.5 CpNrf2氨基酸推导序列的同源性比对 | 第42-45页 |
| 3.6 CpMafK氨基酸推导序列的同源性比对 | 第45-46页 |
| 3.7 Nrf2基因系统进化分析 | 第46-47页 |
| 3.8 MafK基因系统进化分析 | 第47-49页 |
| 3.9 CpNrf2和CpMafK基因的组织表达 | 第49-50页 |
| 3.10 微囊藻毒素和生理盐水刺激后CpNrf2和CpMafK基因的表达变化 | 第50-52页 |
| 3.11 CpNrf2基因的原核表达及纯化 | 第52-53页 |
| 3.12 CpMafK基因的原核表达及纯化 | 第53-54页 |
| 3.13 测定融合蛋白的浓度 | 第54-55页 |
| 3.14 Sigma-GST启动子序列分析 | 第55-58页 |
| 3.15 CpMafK蛋白与CpGST1和CpGST2基因启动子的亲和分析 | 第58页 |
| 3.16 Western blot检测CpNrf2和Cp MafK多抗血清 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 5 结论与展望 | 第64-66页 |
| 5.1 主要结论 | 第64页 |
| 5.1.1 褶纹冠蚌Nrf2与MafK基因的克隆和表达分析 | 第64页 |
| 5.1.2 MafK蛋白与下游解毒酶GST基因启动子序列的亲和分析 | 第64页 |
| 5.2 创新点 | 第64-65页 |
| 5.3 研究展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第77页 |
