摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
1.1 研究背景 | 第8-14页 |
1.1.1 乳腺癌研究现状 | 第8页 |
1.1.2 LncRNA的概述 | 第8-10页 |
1.1.3 细胞增殖与细胞周期简介 | 第10-11页 |
1.1.4 CDK2的概述 | 第11-12页 |
1.1.5 HSP90的概述 | 第12-14页 |
1.2 研究意义 | 第14页 |
1.3 研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-28页 |
2.1 材料 | 第15-18页 |
2.1.0 细胞株 | 第15页 |
2.1.1 抗体 | 第15页 |
2.1.2 实验试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 实验仪器与耗材 | 第16-17页 |
2.1.4 引物 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-28页 |
2.2.1 细胞的培养 | 第18页 |
2.2.2 微阵列分析 | 第18-19页 |
2.2.3 转染LncRNA Smart Silencer和siRNA敲低Lnc712和HSP90的表达 | 第19页 |
2.2.4 细胞活力检测 | 第19页 |
2.2.5 细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.6 荧光定量PCR | 第20-21页 |
2.2.7 细胞总蛋白的提取 | 第21页 |
2.2.8 蛋白浓度的测定 | 第21页 |
2.2.9 蛋白免疫印迹 | 第21-22页 |
2.2.10 流式细胞术测定细胞周期 | 第22-23页 |
2.2.11 LncRNA探针的制备 | 第23-25页 |
2.2.12 RNA pulldown实验 | 第25-26页 |
2.2.13 免疫共沉淀 | 第26页 |
2.2.14 原位杂交(FISH) | 第26-28页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第28-39页 |
3.1 Lnc712在乳腺癌细胞中高表达 | 第28-29页 |
3.1.1 微阵列分析筛选乳腺癌细胞中差异表达的LncRNAs | 第28页 |
3.1.2 荧光定量PCR验证Lnc712的差异性表达 | 第28-29页 |
3.1.3 小结与讨论 | 第29页 |
3.2 Lnc712在乳腺癌细胞中的功能研究 | 第29-31页 |
3.2.1 LncRNA Smart Silencer敲低Lnc712的mRNA水平分析 | 第29-30页 |
3.2.2 LncRNA Smart Silencer敲低Lnc712的生物学功能分析 | 第30-31页 |
3.2.3 小结与讨论 | 第31页 |
3.3 Lnc712的作用靶点 | 第31-33页 |
3.3.1 CDK2与Lnc712的相关性 | 第31-32页 |
3.3.2 LncRNA Smart Silencer敲低Lnc712调节CDK2表达 | 第32-33页 |
3.3.3 小结与讨论 | 第33页 |
3.4 Lnc712调节CDK2的机制研究 | 第33-37页 |
3.4.1 Lnc712与HSP90相结合 | 第33-35页 |
3.4.2 siRNA敲低HSP90的mRNA水平分析 | 第35页 |
3.4.3 siRNA敲低HSP90调节CDK2的表达 | 第35-36页 |
3.4.4 Lnc712调节HSP90/Cdc37复合物的形成 | 第36-37页 |
3.4.5 小结与讨论 | 第37页 |
3.5 临床组织研究 | 第37-39页 |
第四章 总结与展望 | 第39-41页 |
4.1 主要结论 | 第39页 |
4.2 问题与展望 | 第39-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的文章 | 第49页 |