| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第8-27页 |
| 1.1 m~6A甲基化简介 | 第8-15页 |
| 1.1.1 m~6A的发现及分布特点 | 第8-10页 |
| 1.1.2 m~6A的形成与去甲基化 | 第10-12页 |
| 1.1.3 m~6A的生物学功能 | 第12-15页 |
| 1.2 m~6A甲基化位点的检测方法 | 第15-22页 |
| 1.2.1 基于免疫共沉淀反应的高通量测序法(m6A-seq) | 第15-18页 |
| 1.2.2 基于特异性酶切和放射性标记的薄层色谱法(SCARLET) | 第18-19页 |
| 1.2.3 DNA聚合酶单碱基延伸法 | 第19-21页 |
| 1.2.4 连接酶选择性连接法 | 第21-22页 |
| 1.3 聚合酶链式反应(PCR)概述 | 第22-27页 |
| 1.3.1 PCR反应简介 | 第22页 |
| 1.3.2 PCR反应原理 | 第22-23页 |
| 1.3.3 实时定量PCR | 第23-24页 |
| 1.3.4 基于连接反应的PCR技术及其应用 | 第24-27页 |
| 第2章 基于连接-聚合酶链式反应定量分析RNA中的6-甲基腺嘌呤 | 第27-46页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验部分 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验试剂和仪器 | 第28-30页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-45页 |
| 2.3.1 基于连接-聚合酶链式反应定量分析RNA中6-甲基腺嘌呤的原理 | 第32-34页 |
| 2.3.2 连接酶的比较与筛选 | 第34-36页 |
| 2.3.3 分析方法对于不同核心序列的通用性评估 | 第36-37页 |
| 2.3.4 连接反应温度对实验的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.5 连接时间对实验的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.6 连接酶的用量对实验的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.7 分析方法的灵敏度与选择性 | 第40-42页 |
| 2.3.8 Hela细胞和HEK293T细胞MALAT1 LncRNA 2577~(th)位点上m~6A的含量检测 | 第42-45页 |
| 2.4 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间成果 | 第57页 |
