摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-21页 |
1.1 山药概况 | 第9页 |
1.2 植物块茎(根)生长发育研究进展 | 第9-14页 |
1.2.1 环境因素对植物块茎(根)生长发育的影响 | 第10-11页 |
1.2.2 外源激素对植物块茎(根)生长发育的影响 | 第11页 |
1.2.3 碳水化合物及相关酶对植物块茎(根)生长发育的影响 | 第11-12页 |
1.2.4 功能基因对植物块茎(根)生长发育的调控 | 第12-14页 |
1.3 差异表达基因的分离方法 | 第14-18页 |
1.3.1 示差筛选和扣除杂交 | 第14页 |
1.3.2 mRNA差异显示技术 | 第14-15页 |
1.3.3 cDNA代表性序列差别分析 | 第15页 |
1.3.4 抑制性消减杂交 | 第15页 |
1.3.5 基因表达系列分析法 | 第15-16页 |
1.3.6 cDNA微列阵 | 第16页 |
1.3.7 cDNA-AFLP技术 | 第16-18页 |
1.4 本研究的内容、目的意义和技术路线 | 第18-21页 |
1.4.1 研究的内容 | 第18-19页 |
1.4.2 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
1.4.3 技术路线 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 试验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 材料 | 第21页 |
2.1.2 试验试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.4 引物和接头序列 | 第22-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-35页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第24页 |
2.2.2 双链cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.3 cDNA-AFLP体系的建立 | 第25-29页 |
2.2.4 差异片段回收及二次PCR | 第29-30页 |
2.2.5 反向Southern blot | 第30-32页 |
2.2.6 PCR产物的纯化 | 第32页 |
2.2.7 差异片段的克隆 | 第32-33页 |
2.2.8 测序 | 第33-35页 |
3 结果与分析 | 第35-48页 |
3.1 总RNA的提取 | 第35页 |
3.2 双链cDNA的合成及检测 | 第35-36页 |
3.3 cDNA-AFLP体系的建立 | 第36-39页 |
3.3.1 预扩增 | 第36-37页 |
3.3.2 选择性扩增 | 第37-39页 |
3.4 回收差异片段的检测 | 第39-40页 |
3.5 反向Southern blot验证 | 第40-42页 |
3.5.1 探针效率检测 | 第40-41页 |
3.5.2 反向Southern blot检测 | 第41-42页 |
3.6 PCR产物纯化检测 | 第42页 |
3.7 差异片段的克隆 | 第42-43页 |
3.7.1 阳性克隆筛选 | 第42页 |
3.7.2 菌液的扩增检测 | 第42-43页 |
3.8 差异条带测序结果与分析 | 第43-48页 |
3.8.1 测序结果 | 第43-45页 |
3.8.2 序列比对结果与分析 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-53页 |
4.1 cDNA-AFLP分离山药块茎膨大相关基因的可行性 | 第48页 |
4.2 两种山药块茎发育相关差异片段 | 第48-53页 |
4.2.1 线粒体内膜酶Tim50与植物生长发育的关系 | 第49-50页 |
4.2.2 ATP合酶与植物生长发育的关系 | 第50页 |
4.2.3 叶绿体分子伴侣蛋白与植物生长发育的关系 | 第50-51页 |
4.2.4 TAR1蛋白与植物生长发育的关系 | 第51页 |
4.2.5 转录终止因子MTERF8与植物生长发育的关系 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
附录 | 第64-66页 |
作者简介 | 第66页 |