中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
1. 骨骼肌的组成和发生 | 第14-15页 |
2. MyoD基因家族概况及研究进展 | 第15-19页 |
2.1 MyoD基因 | 第16-18页 |
2.2 MyoG基因 | 第18-19页 |
2.3 Myf5基因 | 第19页 |
3. MSTN基因 | 第19-22页 |
3.1 MSTN基因及编码蛋白特性 | 第20页 |
3.2 MSTN的作用机制及功能 | 第20-22页 |
4. Smads基因家族 | 第22-24页 |
4.1 Smads基因家族结构与功能 | 第22-23页 |
4.2 Smad 3基因结构与功能 | 第23-24页 |
5. 实时荧光定量PCR技术 | 第24-28页 |
5.1 荧光定量PCR的定量方法 | 第25页 |
5.2 荧光定量PCR的荧光标记方法的分类 | 第25-26页 |
5.2.1 DNA结合染料法 | 第25页 |
5.2.2 探针法 | 第25-26页 |
5.3 荧光定量PCR的应用 | 第26-28页 |
5.3.1 医学领域的应用 | 第26-27页 |
5.3.2 畜牧学领域的应用 | 第27-28页 |
6. 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
第二章 MSTN基因、MYOD基因家族和SMAD3基因多态性及其与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第29-112页 |
第一节 MSTN基因的多态性及其与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第29-48页 |
1. 材料与方法 | 第29-36页 |
1.1 试验材料 | 第29-32页 |
1.1.1 试验动物 | 第29页 |
1.1.2 主要实验仪器与设备 | 第29-30页 |
1.1.3 生物学分析软件 | 第30页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第30-31页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第31-32页 |
1.2 试验方法 | 第32-34页 |
1.2.1 鸡血液DNA提取 | 第32页 |
1.2.2 引物设计 | 第32页 |
1.2.3 PCR-RFLP分析 | 第32页 |
1.2.4 多态片段的回收和序列测定 | 第32-33页 |
1.2.5 肌肉样本石蜡切片制作 | 第33-34页 |
1.3 统计方法 | 第34-36页 |
1.3.1 群体基因频率、基因型频率的计算以及卡方检验 | 第34-35页 |
1.3.2 遗传多样性参数 | 第35-36页 |
1.3.3 统计分析模型 | 第36页 |
1.3.4 基因位点的方差组分分析 | 第36页 |
2. 结果与分析 | 第36-45页 |
2.1 鸡基因组DNA和PCR产物检测结果 | 第36-37页 |
2.1.1 基因组DNA提取结果 | 第36-37页 |
2.1.2 引物MYOE1-3 PCR扩增效果及BbvI酶切检测 | 第37页 |
2.2 MSTN基因不同基因型个体测序及分析 | 第37-38页 |
2.3 边鸡MSTN基因的遗传学分析 | 第38页 |
2.4 MSTN基因与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第38-45页 |
2.4.1 MSTN基因与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第38-39页 |
2.4.2 七世代边鸡MSTN基因G2283A位点的方差组分分析 | 第39页 |
2.4.3 MSTN基因与八世代边鸡母鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第39-41页 |
2.4.4 边鸡八世代母鸡MSTN不同基因型个体生长和屠体性状的表型相关分析 | 第41-44页 |
2.4.5 八世代边鸡MSTN基因G2283A位点不同基因型个体肌纤维特性比较分析 | 第44-45页 |
3. 讨论 | 第45-48页 |
3.1 边鸡MSTN基因的多态性和群体遗传学分析 | 第45页 |
3.2 边鸡MSTN基因G2283A位点多态性与生长和屠体性状相关性 | 第45-47页 |
3.3 边鸡八世代母鸡MSTN基因G2283A位点不同基因型个体肌纤维特性 | 第47-48页 |
第二节 MYOD基因的多态性及其与边鸡生长和屠体性状状的相关性分析 | 第48-70页 |
1 材料与方法 | 第48-50页 |
1.1 试验材料 | 第48页 |
1.1.1 试验动物 | 第48页 |
1.1.2 主要实验仪器与设备 | 第48页 |
1.1.3 生物学分析软件 | 第48页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第48页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第48页 |
1.2 试验方法 | 第48-49页 |
1.2.1 鸡血液DNA提取 | 第48-49页 |
1.2.2 引物设计 | 第49页 |
1.2.3 PCR-SSCP分析 | 第49页 |
1.2.4 多态片段的回收和序列测定 | 第49页 |
1.3 统计方法 | 第49-50页 |
1.3.1 群体基因频率、基因型频率的计算以及卡方检验 | 第49页 |
1.3.2 遗传多样性参数 | 第49-50页 |
1.3.3 统计分析模型 | 第50页 |
2. 结果与分析 | 第50-66页 |
2.1 引物PCR产物检测 | 第50-51页 |
2.2 MyoD基因PCR-SSCP分析 | 第51页 |
2.3 MyoD基因不同基因型个体测序及分析 | 第51-53页 |
2.4 边鸡MyoD基因的群体遗传学分析 | 第53页 |
2.5 MyoD基因与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第53-66页 |
2.5.1 MyoD基因与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第53-59页 |
2.5.2 MyoD基因MD-3和MD-4位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对边鸡快慢型群体的生长和屠体性状联合效应分析 | 第59-66页 |
3. 讨论 | 第66-70页 |
3.1 MyoD基因的多态性及群体遗传学分析 | 第66页 |
3.2 MyoD基因多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第66-70页 |
3.2.1 MyoD基因MD-3和MD-4位点与七世代边鸡生长性状的相关性分析 | 第66-67页 |
3.2.2 MyoD基因MD-3和MD-4位点不同基因型组合与七世代边鸡生长性状的相关性分析 | 第67-68页 |
3.2.3 MyoD基因MD-3和MD-4位点与MSTN基因G2283A位点对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第68-70页 |
第三节 MYOG基因的多态性及其与边鸡生长和屠体性状状的相关性分析 | 第70-82页 |
1 材料与方法 | 第70-71页 |
1.1 试验材料 | 第70页 |
1.1.1 试验动物 | 第70页 |
1.1.2 主要实验仪器与设备 | 第70页 |
1.1.3 生物学分析软件 | 第70页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第70页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第70页 |
1.2 试验方法 | 第70-71页 |
1.2.1 鸡血液DNA提取 | 第70页 |
1.2.2 引物设计 | 第70-71页 |
1.2.3 PCR-SSCP分析 | 第71页 |
1.2.4 多态片段的回收和序列测定 | 第71页 |
1.3 统计方法 | 第71页 |
2. 结果与分析 | 第71-79页 |
2.1 引物PCR产物检测 | 第71页 |
2.2 MyoG基因PCR-SSCP分析 | 第71-72页 |
2.3 MyoG基因不同基因型个体测序及分析 | 第72-73页 |
2.4 边鸡MyoG基因的群体遗传学分析 | 第73页 |
2.5 MyoG基因多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第73-79页 |
2.5.1 MyoG基因MG-5位点与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第73-74页 |
2.5.2 MyoG基因与MSTN基因不同基因型组合对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第74-79页 |
3. 讨论 | 第79-82页 |
3.1 MyoG基因的多态性及群体遗传学分析 | 第79页 |
3.2 MyoG基因的多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第79-82页 |
3.2.1 MyoG基因的多态性与七世代边鸡生长性状的相关性分析 | 第79-80页 |
3.2.2 MyoG基因MG-5位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第80-82页 |
第四节 MYF5基因多态性及其与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第82-102页 |
1. 材料与方法 | 第82-83页 |
1.1 试验材料 | 第82页 |
1.1.1 实验动物 | 第82页 |
1.1.2 主要实验仪器与设备 | 第82页 |
1.1.3 生物学分析软件 | 第82页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第82页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第82页 |
1.2 试验方法 | 第82-83页 |
1.2.1 鸡血液DNA提取 | 第82页 |
1.2.2 引物设计 | 第82-83页 |
1.2.3 PCR-SSCP分析 | 第83页 |
1.2.4 多态片段的回收和序列测定 | 第83页 |
1.3 统计方法 | 第83页 |
2. 结果与分析 | 第83-98页 |
2.1 引物PCR产物检测 | 第83页 |
2.2 Myf5基因PCR-SSCP分析 | 第83-84页 |
2.3 Myf5基因不同基因型个体测序及分析 | 第84-85页 |
2.4 边鸡Myf5基因的群体遗传学分析 | 第85-86页 |
2.4.1 边鸡Myf5基因MY5-1位点的群体遗传学分析 | 第85页 |
2.4.2 边鸡Myf5基因MY5-3位点的群体遗传学分析 | 第85-86页 |
2.5 Myf5基因多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第86-98页 |
2.5.1 Myf5基因MY5-1位点与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第86-87页 |
2.5.2 Myf5基因MY5-3位点与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第87页 |
2.5.3 七世代边鸡Myf5基因MY5-3位点的方差组分分析 | 第87-88页 |
2.5.4 Myf5基因MY5-1和MY5-3位点不同基因型组合对七世代边鸡母鸡生长性状的联合效应分析 | 第88-89页 |
2.5.5 八世代边鸡Myf5基因MY5-1和MY5-3位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对生长和屠体性状的联合效应分析 | 第89-98页 |
3. 讨论 | 第98-102页 |
3.1 Myf5基因的多态性及群体遗传学分析 | 第98页 |
3.2 Myf5基因的多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第98-102页 |
3.2.1 Myf5基因MY5-1和MY5-3位点与七世代边鸡生长性状的相关性分析 | 第98-99页 |
3.2.2 Myf5基因MY5-1和MY5-3位点不同基因型组合对七世代边鸡生长性状的联合效应分析 | 第99-100页 |
3.2.3 Myf5基因MY5-1和MY5-3位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第100-102页 |
第五节 SMAD 3基因的多态性及其与边鸡生长和屠体性状状的相关性分析 | 第102-112页 |
1 材料与方法 | 第102-103页 |
1.1 试验材料 | 第102页 |
1.1.1 试验动物 | 第102页 |
1.1.2 主要实验仪器与设备 | 第102页 |
1.1.3 生物学分析软件 | 第102页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第102页 |
1.1.5 主要试剂的配制 | 第102页 |
1.2 试验方法 | 第102-103页 |
1.2.1 鸡血液DNA提取 | 第102页 |
1.2.2 引物设计 | 第102-103页 |
1.2.3 PCR-SSCP分析 | 第103页 |
1.2.4 多态片段的回收和序列测定 | 第103页 |
1.3 统计方法 | 第103页 |
2. 结果与分析 | 第103-110页 |
2.1 引物PCR产物检测 | 第103-104页 |
2.2 Smad3基因PCR-SSCP分析 | 第104页 |
2.3 Smad 3基因不同基因型个体测序及分析 | 第104-105页 |
2.4 边鸡Smad 3基因的群体遗传学分析 | 第105页 |
2.5 Smad 3基因多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第105-110页 |
2.5.1 Smad 3基因S8位点与七世代边鸡母鸡生长性状的相关性分析 | 第105页 |
2.5.2 七世代边鸡Smad 3基因S8位点的方差组分分析 | 第105-106页 |
2.5.3 Smad3基因S8位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第106-110页 |
3. 讨论 | 第110-112页 |
3.1 Smad3基因的多态性及群体遗传学分析 | 第110页 |
3.2 Smad3基因多态性与边鸡生长和屠体性状的相关性分析 | 第110-112页 |
3.2.1 Smad3基因S8位点与七世代边鸡生长性状的相关性分析 | 第110页 |
3.2.2 Smad3基因S8位点位点与MSTN基因G2283A位点不同基因型组合对边鸡快慢型群体生长和屠体性状的联合效应分析 | 第110-112页 |
第三章 MSTN基因、MYOD基因家族和SMAD3基因在边鸡肌肉组织中表达水平的研究 | 第112-133页 |
1 材料与方法 | 第112-115页 |
1.1 试验鸡群和样本采集 | 第112页 |
1.2 主要试剂 | 第112-113页 |
1.3 主要仪器设备 | 第113页 |
1.4 分析工具软件 | 第113页 |
1.5 实验方法 | 第113-115页 |
1.5.1 主要试剂配制 | 第113页 |
1.5.2 鸡组织总RNA的提取和检测(Trizol法) | 第113-114页 |
1.5.3 引物设计和PCR扩增 | 第114页 |
1.5.4 RNA反转录 | 第114页 |
1.5.5 目的基因和内参基因的PCR扩增 | 第114-115页 |
1.5.6 扩增片段的测序 | 第115页 |
1.5.7 标准曲线的绘制 | 第115页 |
1.5.8 实时荧光定量PCR | 第115页 |
1.6 统计软件和方法 | 第115页 |
2 结果与分析 | 第115-127页 |
2.1 RNA的提取结果 | 第115-116页 |
2.2 目的基因和内参基因常规PCR检测结果 | 第116-117页 |
2.3 目的基因和内参基因的溶解曲线 | 第117-119页 |
2.4 目的基因和内参基因的标准曲线 | 第119-121页 |
2.5 候选基因表达水平相对定量分析 | 第121-127页 |
2.5.1 MSTN基因表达水平相对定量分析 | 第121-122页 |
2.5.2 MyoD基因表达水平相对定量分析 | 第122-123页 |
2.5.3 MyoG基因表达水平相对定量分析 | 第123-124页 |
2.5.4 Myf5基因表达水平相对定量分析 | 第124-126页 |
2.5.5 Smad3基因表达水平相对定量分析 | 第126-127页 |
3. 讨论 | 第127-133页 |
3.1 荧光定量PCR的影响因素 | 第127-128页 |
3.2 MSTN基因的表达 | 第128-129页 |
3.3 MyoD基因的表达 | 第129页 |
3.4 MyoG基因的表达 | 第129-130页 |
3.5 Myf5基因的表达 | 第130-131页 |
3.6 Smad3基因的表达 | 第131-132页 |
3.7 MSTN基因、MyoD基因家族及Smad3基因的表达水平关系 | 第132-133页 |
全文结论 | 第133-134页 |
创新点 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第143-144页 |