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雌二醇通过Wnt/β-catenin信号通路调节成骨细胞增殖的作用机制研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
目录第11-13页
符号说明第13-15页
前言第15-18页
第一章 雌激素促进小鼠成骨细胞前体细胞增殖能力第18-29页
    1.1 材料和试剂第18-22页
        1.1.1 实验仪器第18-19页
        1.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒第19-21页
        1.1.3 主要试剂的配制第21-22页
    1.2. 实验方法第22-27页
        1.2.1 细胞培养,冻存,复苏第22-23页
        1.2.2 MTT法检测Mc3T3-E1细胞增殖率第23页
        1.2.3 细胞周期检测第23-24页
        1.2.4 Real-time PCR 检测 Mc3T3-El 细胞 ERa,p 以及 Cydin D1 mRNA 表达第24-27页
    1.4第27页
        1.4.3 检测E2处理MC3T3-E1细胞后ERα,β以及Cyclin D1mRNA表达第27页
    1.5 讨论第27-28页
    1.6 结论第28-29页
第二章 雌激素调控Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞增殖第29-44页
    2.1 材料和试剂第30-34页
        2.1.1 实验仪器第30-31页
        2.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒第31-33页
        2.1.3 主要试剂的配制第33-34页
    2.2 实验方法第34-38页
        2.2.1 细胞培养第34页
        2.2.2 Western blot检测蛋白表达第34-37页
        2.2.3 免疫荧光第37页
        2.2.4 检测E2与β-catenin关系第37-38页
    2.3 统计学方法第38页
    2.4 结果第38-42页
        2.4.1 雌二醇促进MC3T3-E1细胞Wnt/β-catenin信号通路关键因子表达第38-40页
        2.4.2 E2与β-catenin关系第40-42页
    2.5 讨论第42-43页
    2.6 结论第43-44页
第三章 雌激素经ERα介导Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞增殖第44-66页
    3.1 材料和试剂第44-51页
        3.1.1 实验仪器第44-45页
        3.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒第45-48页
        3.1.3 主要仪器及耗材第48-50页
        3.1.4 主要试剂的配制第50-51页
        3.1.5 实验用菌种和质粒第51页
    3.2. 实验方法第51-59页
        3.2.1 细胞培养第51页
        3.2.2 雌激素受体ERα,ERβ沉默载体构建第51-57页
        3.2.3 雌激素受体ERtt, ERpRNAi慢病毒包装第57-58页
        3.2.4 雌激素受体ERa,ERpRNAi慢病毒感染成骨细胞第58-59页
        3.2.5 ERa , ERg RNAi干扰后经典Wnt通路信号分子蛋白表达第59页
        3.2.6 MTT检测雌激素受体干扰后经E2处理的Mc3T3-El细胞生长曲线第59页
    3.3 统计学分析第59页
    3.4 结果第59-64页
        3.4.1 Plentilox 3.7-ER siRNA构建及鉴定结果第59-61页
        3.4.2 293FT细胞包装病毒及感染Mc3T3-E1细胞第61-62页
        3.4.3 Western Blot检测ER干扰后ERap蛋白表达及Wnt信号通路关键分子表达第62-63页
        3.4.4 雌激素受体干扰后Mc3T3-E1细胞生长第63-64页
    3.5 讨论第64-65页
    3.6 结论第65-66页
总结第66-67页
参考文献第67-74页
综述第74-98页
    参考文献第85-98页
攻读学位期间所发表的论文及主要研究成果第98-99页
致谢第99页

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