| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第11-13页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一章 雌激素促进小鼠成骨细胞前体细胞增殖能力 | 第18-29页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第18-22页 |
| 1.1.1 实验仪器 | 第18-19页 |
| 1.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第19-21页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| 1.2. 实验方法 | 第22-27页 |
| 1.2.1 细胞培养,冻存,复苏 | 第22-23页 |
| 1.2.2 MTT法检测Mc3T3-E1细胞增殖率 | 第23页 |
| 1.2.3 细胞周期检测 | 第23-24页 |
| 1.2.4 Real-time PCR 检测 Mc3T3-El 细胞 ERa，p 以及 Cydin D1 mRNA 表达 | 第24-27页 |
| 1.4 | 第27页 |
| 1.4.3 检测E2处理MC3T3-E1细胞后ERα,β以及Cyclin D1mRNA表达 | 第27页 |
| 1.5 讨论 | 第27-28页 |
| 1.6 结论 | 第28-29页 |
| 第二章 雌激素调控Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞增殖 | 第29-44页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第30-34页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第31-33页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第34页 |
| 2.2.2 Western blot检测蛋白表达 | 第34-37页 |
| 2.2.3 免疫荧光 | 第37页 |
| 2.2.4 检测E2与β-catenin关系 | 第37-38页 |
| 2.3 统计学方法 | 第38页 |
| 2.4 结果 | 第38-42页 |
| 2.4.1 雌二醇促进MC3T3-E1细胞Wnt/β-catenin信号通路关键因子表达 | 第38-40页 |
| 2.4.2 E2与β-catenin关系 | 第40-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42-43页 |
| 2.6 结论 | 第43-44页 |
| 第三章 雌激素经ERα介导Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞增殖 | 第44-66页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第44-51页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第44-45页 |
| 3.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第45-48页 |
| 3.1.3 主要仪器及耗材 | 第48-50页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第50-51页 |
| 3.1.5 实验用菌种和质粒 | 第51页 |
| 3.2. 实验方法 | 第51-59页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第51页 |
| 3.2.2 雌激素受体ERα,ERβ沉默载体构建 | 第51-57页 |
| 3.2.3 雌激素受体ERtt, ERpRNAi慢病毒包装 | 第57-58页 |
| 3.2.4 雌激素受体ERa，ERpRNAi慢病毒感染成骨细胞 | 第58-59页 |
| 3.2.5 ERa , ERg RNAi干扰后经典Wnt通路信号分子蛋白表达 | 第59页 |
| 3.2.6 MTT检测雌激素受体干扰后经E2处理的Mc3T3-El细胞生长曲线 | 第59页 |
| 3.3 统计学分析 | 第59页 |
| 3.4 结果 | 第59-64页 |
| 3.4.1 Plentilox 3.7-ER siRNA构建及鉴定结果 | 第59-61页 |
| 3.4.2 293FT细胞包装病毒及感染Mc3T3-E1细胞 | 第61-62页 |
| 3.4.3 Western Blot检测ER干扰后ERap蛋白表达及Wnt信号通路关键分子表达 | 第62-63页 |
| 3.4.4 雌激素受体干扰后Mc3T3-E1细胞生长 | 第63-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-65页 |
| 3.6 结论 | 第65-66页 |
| 总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 综述 | 第74-98页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 攻读学位期间所发表的论文及主要研究成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
