缩略语 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
前言 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-24页 |
1 基因芯片概述 | 第17-18页 |
1.1 基因芯片 | 第17页 |
1.2 基因芯片原理 | 第17页 |
1.3 基因芯片应用 | 第17-18页 |
2 LncRNA与mRNA | 第18-20页 |
2.1 LncRNA | 第18-20页 |
2.2 mRNA | 第20页 |
2.3 LncRNA-mRNA芯片 | 第20页 |
3 类风湿关节炎概述 | 第20-21页 |
4 类叶牡丹研究进展 | 第21-22页 |
5 研究目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 类叶牡丹各成分对L929细胞活性的影响 | 第24-32页 |
1 材料与细胞 | 第24-26页 |
1.1 细胞株 | 第24页 |
1.2 实验药品 | 第24页 |
1.3 实验试剂及耗材 | 第24-25页 |
1.4 培养基及其他溶液的配制 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-27页 |
2.1 小鼠成纤维细胞L929的培养及形态学观察 | 第26页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第26页 |
2.1.2 细胞传代 | 第26页 |
2.1.3 细胞冻存 | 第26页 |
2.2 绘制L929细胞生长曲线 | 第26-27页 |
2.3 MTT法检测类叶牡丹成分对L929细胞毒活性 | 第27页 |
2.3.1 实验分组 | 第27页 |
2.3.2 操作步骤 | 第27页 |
3 统计学分析 | 第27页 |
4 实验结果 | 第27-31页 |
4.1 细胞生长情况 | 第27-28页 |
4.2 绘制细胞生长曲线 | 第28-29页 |
4.3 细胞毒性实验结果 | 第29-31页 |
4.3.1 类叶牡丹有效部位对L929细胞活性的影响 | 第29-30页 |
4.3.2 类叶牡丹特征性成分对L929细胞活性的影响 | 第30-31页 |
4.3.3 类叶牡丹有效部位及特征性成分IC50值 | 第31页 |
5 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 类叶牡丹各成分抗炎活性作用研究 | 第32-43页 |
1 材料与细胞 | 第32-33页 |
1.1 细胞株 | 第32页 |
1.2 实验药品 | 第32页 |
1.3 实验试剂及耗材 | 第32-33页 |
1.4 药物的配制 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-35页 |
2.1 实验分组 | 第33页 |
2.2 诱导剂TNF-α浓度的确定 | 第33-34页 |
2.3 细胞炎症模型的建立和药物处理 | 第34页 |
2.4 IL-6含量的测定 | 第34-35页 |
2.5 类叶牡丹有效部位对细胞形态的影响 | 第35页 |
3 统计学分析 | 第35页 |
4 实验结果 | 第35-41页 |
4.1 TNF-α浓度确定 | 第35-36页 |
4.2 IL-6含量测定结果 | 第36-40页 |
4.2.1 绘制IL-6标准曲线 | 第36-37页 |
4.2.2 类叶牡丹各成分对TNF-α诱导L929细胞分泌IL-6的影响 | 第37-40页 |
4.3 TNF-α与类叶牡丹有效部位对L929细胞形态的影响 | 第40-41页 |
5 本章小结 | 第41-43页 |
第四章 LncRNA-mRNA芯片筛选类叶牡丹有效部位对TNF-α诱导L929细胞差异基因 | 第43-62页 |
1 材料与细胞 | 第43-44页 |
1.1 细胞株 | 第43页 |
1.2 实验药品 | 第43页 |
1.3 实验试剂及设备 | 第43-44页 |
1.4 药物的配制 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-50页 |
2.1 实验分组 | 第44页 |
2.2 实验步骤 | 第44-50页 |
2.2.1 基因芯片实验流程 | 第44-45页 |
2.2.2 RNA的放大和标记 | 第45-49页 |
2.2.3 芯片杂交 | 第49-50页 |
2.2.4 芯片扫描 | 第50页 |
3 统计学分析 | 第50页 |
4 实验结果 | 第50-60页 |
4.1 RNA的抽取纯化与质检 | 第50-51页 |
4.2 芯片杂交扫描结果分析 | 第51-52页 |
4.2.1 芯片扫描图 | 第51-52页 |
4.2.2 箱线图 | 第52页 |
4.3 基因差异表达分析 | 第52-57页 |
4.4 富集分析 | 第57-59页 |
4.4.1 差异表达基因的GO富集分析 | 第57-58页 |
4.4.2 差异表达基因的KEGG富集分析 | 第58-59页 |
4.5 基因间互作网络 | 第59-60页 |
4.6 LncRNA和mRNA共表达网络 | 第60页 |
5 本章小结 | 第60-62页 |
第五章 荧光定量PCR验证差异基因表达 | 第62-75页 |
1 材料与细胞 | 第62-63页 |
1.1 细胞株 | 第62页 |
1.2 实验药品 | 第62页 |
1.3 实验试剂及耗材 | 第62-63页 |
1.4 药物的配制 | 第63页 |
1.4.1 受试药物溶液 | 第63页 |
1.4.2 TNF-α的配制 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-67页 |
2.1 实验分组 | 第63页 |
2.2 实验步骤 | 第63-67页 |
2.2.1 细胞处理 | 第63-64页 |
2.2.2 RNA的提取 | 第64页 |
2.2.3 测RNA的浓度 | 第64-65页 |
2.2.4 逆转录成cDNA | 第65页 |
2.2.5 引物及其处置 | 第65-66页 |
2.2.6 qPCR操作步骤 | 第66-67页 |
2.2.7 计算结果 | 第67页 |
3 统计学分析 | 第67页 |
4 实验结果 | 第67-72页 |
4.1 RNA浓度及纯度检测结果 | 第67页 |
4.2 引物熔时曲线与扩增曲线 | 第67-69页 |
4.3 mRNA相对表达量 | 第69页 |
4.4 对Hist1h2bj的影响 | 第69页 |
4.5 对Hist1h2ba的影响 | 第69-70页 |
4.6 对Zfp36的影响 | 第70-71页 |
4.7 对Egr1的影响 | 第71页 |
4.8 对Cxcl2的影响 | 第71-72页 |
4.9 对Ccl3的影响 | 第72页 |
5 本章小结 | 第72-75页 |
全文结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第84-87页 |
个人简历 | 第87页 |