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基于LncRNA-mRNA芯片技术的类叶牡丹抗类风湿性关节炎作用的机制研究

缩略语第7-9页
中文摘要第9-12页
Abstract第12-15页
前言第16-17页
第一章 文献综述第17-24页
    1 基因芯片概述第17-18页
        1.1 基因芯片第17页
        1.2 基因芯片原理第17页
        1.3 基因芯片应用第17-18页
    2 LncRNA与mRNA第18-20页
        2.1 LncRNA第18-20页
        2.2 mRNA第20页
        2.3 LncRNA-mRNA芯片第20页
    3 类风湿关节炎概述第20-21页
    4 类叶牡丹研究进展第21-22页
    5 研究目的及意义第22-24页
第二章 类叶牡丹各成分对L929细胞活性的影响第24-32页
    1 材料与细胞第24-26页
        1.1 细胞株第24页
        1.2 实验药品第24页
        1.3 实验试剂及耗材第24-25页
        1.4 培养基及其他溶液的配制第25-26页
    2 实验方法第26-27页
        2.1 小鼠成纤维细胞L929的培养及形态学观察第26页
            2.1.1 细胞复苏第26页
            2.1.2 细胞传代第26页
            2.1.3 细胞冻存第26页
        2.2 绘制L929细胞生长曲线第26-27页
        2.3 MTT法检测类叶牡丹成分对L929细胞毒活性第27页
            2.3.1 实验分组第27页
            2.3.2 操作步骤第27页
    3 统计学分析第27页
    4 实验结果第27-31页
        4.1 细胞生长情况第27-28页
        4.2 绘制细胞生长曲线第28-29页
        4.3 细胞毒性实验结果第29-31页
            4.3.1 类叶牡丹有效部位对L929细胞活性的影响第29-30页
            4.3.2 类叶牡丹特征性成分对L929细胞活性的影响第30-31页
            4.3.3 类叶牡丹有效部位及特征性成分IC50值第31页
    5 本章小结第31-32页
第三章 类叶牡丹各成分抗炎活性作用研究第32-43页
    1 材料与细胞第32-33页
        1.1 细胞株第32页
        1.2 实验药品第32页
        1.3 实验试剂及耗材第32-33页
        1.4 药物的配制第33页
    2 实验方法第33-35页
        2.1 实验分组第33页
        2.2 诱导剂TNF-α浓度的确定第33-34页
        2.3 细胞炎症模型的建立和药物处理第34页
        2.4 IL-6含量的测定第34-35页
        2.5 类叶牡丹有效部位对细胞形态的影响第35页
    3 统计学分析第35页
    4 实验结果第35-41页
        4.1 TNF-α浓度确定第35-36页
        4.2 IL-6含量测定结果第36-40页
            4.2.1 绘制IL-6标准曲线第36-37页
            4.2.2 类叶牡丹各成分对TNF-α诱导L929细胞分泌IL-6的影响第37-40页
        4.3 TNF-α与类叶牡丹有效部位对L929细胞形态的影响第40-41页
    5 本章小结第41-43页
第四章 LncRNA-mRNA芯片筛选类叶牡丹有效部位对TNF-α诱导L929细胞差异基因第43-62页
    1 材料与细胞第43-44页
        1.1 细胞株第43页
        1.2 实验药品第43页
        1.3 实验试剂及设备第43-44页
        1.4 药物的配制第44页
    2 实验方法第44-50页
        2.1 实验分组第44页
        2.2 实验步骤第44-50页
            2.2.1 基因芯片实验流程第44-45页
            2.2.2 RNA的放大和标记第45-49页
            2.2.3 芯片杂交第49-50页
            2.2.4 芯片扫描第50页
    3 统计学分析第50页
    4 实验结果第50-60页
        4.1 RNA的抽取纯化与质检第50-51页
        4.2 芯片杂交扫描结果分析第51-52页
            4.2.1 芯片扫描图第51-52页
            4.2.2 箱线图第52页
        4.3 基因差异表达分析第52-57页
        4.4 富集分析第57-59页
            4.4.1 差异表达基因的GO富集分析第57-58页
            4.4.2 差异表达基因的KEGG富集分析第58-59页
        4.5 基因间互作网络第59-60页
        4.6 LncRNA和mRNA共表达网络第60页
    5 本章小结第60-62页
第五章 荧光定量PCR验证差异基因表达第62-75页
    1 材料与细胞第62-63页
        1.1 细胞株第62页
        1.2 实验药品第62页
        1.3 实验试剂及耗材第62-63页
        1.4 药物的配制第63页
            1.4.1 受试药物溶液第63页
            1.4.2 TNF-α的配制第63页
    2 实验方法第63-67页
        2.1 实验分组第63页
        2.2 实验步骤第63-67页
            2.2.1 细胞处理第63-64页
            2.2.2 RNA的提取第64页
            2.2.3 测RNA的浓度第64-65页
            2.2.4 逆转录成cDNA第65页
            2.2.5 引物及其处置第65-66页
            2.2.6 qPCR操作步骤第66-67页
            2.2.7 计算结果第67页
    3 统计学分析第67页
    4 实验结果第67-72页
        4.1 RNA浓度及纯度检测结果第67页
        4.2 引物熔时曲线与扩增曲线第67-69页
        4.3 mRNA相对表达量第69页
        4.4 对Hist1h2bj的影响第69页
        4.5 对Hist1h2ba的影响第69-70页
        4.6 对Zfp36的影响第70-71页
        4.7 对Egr1的影响第71页
        4.8 对Cxcl2的影响第71-72页
        4.9 对Ccl3的影响第72页
    5 本章小结第72-75页
全文结论第75-76页
参考文献第76-83页
致谢第83-84页
攻读硕士学位期间发表的论文第84-87页
个人简历第87页

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