| 摘要 | 第2-3页 |
| ABSTRACT | 第3-4页 |
| 缩略词对照表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-18页 |
| 前言 | 第9页 |
| 1.1 黄芪的成分与功效 | 第9-13页 |
| 1.1.1 黄芪的化学成分 | 第10-11页 |
| 1.1.2 黄芪的抗肿瘤作用 | 第11-12页 |
| 1.1.3 黄芪对免疫功能的调节 | 第12-13页 |
| 1.2 结直肠癌的发生与治疗 | 第13-15页 |
| 1.2.1 结直肠癌发病率和死亡率的时间趋势 | 第14页 |
| 1.2.2 结直肠癌发病的风险因素 | 第14-15页 |
| 1.2.3 结直肠癌的治疗和生存 | 第15页 |
| 1.3 黄芪治疗肿瘤的现状 | 第15-16页 |
| 1.4 研究背景 | 第16页 |
| 1.5 研究内容 | 第16页 |
| 1.6 技术路线 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-35页 |
| 2.1 实验设备与仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.3 黄芪皂苷的配置和用量 | 第21页 |
| 2.4 主要溶液和培养基配方 | 第21-23页 |
| 2.4.1 抗生素应用液 | 第21页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE相关溶液 | 第21-22页 |
| 2.4.3 细菌用培养基 | 第22-23页 |
| 2.4.4 其他溶液 | 第23页 |
| 2.5 细胞系 | 第23页 |
| 2.6 细胞的培养 | 第23-24页 |
| 2.6.1 细胞的冻存 | 第23-24页 |
| 2.6.2 细胞的复苏 | 第24页 |
| 2.6.3 细胞的传代 | 第24页 |
| 2.7 DLD1-shPLK2慢病毒稳定细胞株的构建 | 第24-28页 |
| 2.7.1 质粒的构建 | 第24-27页 |
| 2.7.2 质粒的提取 | 第27-28页 |
| 2.7.3 细胞DNA转染 | 第28页 |
| 2.7.4 慢病毒的包装 | 第28页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR (Realtime quantitative PCR) | 第28-30页 |
| 2.8.1 细胞总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.8.2 逆转录反应 | 第29-30页 |
| 2.8.3 实时荧光定量PCR引物 | 第30页 |
| 2.8.4 实时荧光定量PCR | 第30页 |
| 2.9 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第30-33页 |
| 2.9.1 蛋白的提取 | 第31页 |
| 2.9.2 蛋白的定量 | 第31-32页 |
| 2.9.3 蛋白免疫印迹 | 第32-33页 |
| 2.10 CCK8细胞增殖实验 | 第33页 |
| 2.11 细胞克隆形成实验 | 第33-34页 |
| 2.12 Transwell迁移实验 | 第34页 |
| 2.13 细胞划痕实验 | 第34页 |
| 2.14 数据处理与统计分析 | 第34-35页 |
| 3 实验结果与分析 | 第35-47页 |
| 3.1 黄芪皂苷对结直肠癌细胞活性的影响 | 第35-36页 |
| 3.2 黄芪皂苷对结直肠癌细胞系DLD1增殖能力的影响 | 第36页 |
| 3.3 黄芪皂苷对肠癌细胞系DLD1迁移能力的抑制 | 第36-38页 |
| 3.4 黄芪皂苷对结肠癌细胞系HCT116迁移能力的影响 | 第38-39页 |
| 3.5 黄芪皂苷对肠癌细胞系HCT15迁移能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.6 黄芪皂苷对肠癌细胞系HT29迁移能力的影响 | 第40-41页 |
| 3.7 黄芪皂苷下调PLK2的表达 | 第41-43页 |
| 3.8 PLK2在不同肠癌细胞系中的表达 | 第43页 |
| 3.9 PLK2在DLD1细胞系中的敲降效果 | 第43-44页 |
| 3.10 敲降PLK2对细胞系DLD1增殖的影响 | 第44-45页 |
| 3.11 敲降PLK2对肠癌细胞系DLD1迁移能力的影响 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 5 全文总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第62-63页 |
