| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文章综述 | 第8-16页 |
| 1.1 RIG-I 简介 | 第8-9页 |
| 1.1.1 RIG-I 概述 | 第8页 |
| 1.1.2 RIG-I 的结构 | 第8-9页 |
| 1.2 RIG-I 介导的信号通路 | 第9-11页 |
| 1.3 禽 RIG-I 样受体研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3.1 禽 RIG-I 研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.2 禽 MDA5 概述 | 第12-13页 |
| 1.3.3 禽 LGP-2 概述 | 第13页 |
| 1.4 PiggyBac 简介 | 第13-15页 |
| 1.4.1 转座子概述 | 第13-14页 |
| 1.4.2 PiggyBac 转座子概述 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 研究内容 | 第16-51页 |
| 2.1 材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验动物、所用载体和细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.4 实验中所用溶液的配制 | 第17-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-33页 |
| 2.2.1 常用试验技术及试剂盒的使用方法 | 第19-24页 |
| 2.2.2 引物的设计 | 第24-26页 |
| 2.2.3 鹅源 RIG-I 基因全长及 CARD 区域的 PCR 扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.4 原核表达载体 pET-32a-CARD 的构建及鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 PiggyBac-RIG-I 载体的构建及鉴定 | 第28页 |
| 2.2.6 鹅源 RIG-I CARD 区域多克隆抗血清的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.7 RT-PCR 鉴定引物的特异性验证 | 第29-30页 |
| 2.2.8 鸡胚成纤维细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2.9 DF-1 细胞对嘌呤霉素的敏感性实验 | 第30-31页 |
| 2.2.10 构建稳定表达鹅源 RIG-I 的鸡胚成纤维细胞系 | 第31页 |
| 2.2.11 细胞系稳定传代的鉴定 | 第31-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-49页 |
| 2.3.1 鹅源 RIG-I 全基因的 PCR 扩增 | 第33-34页 |
| 2.3.2 鹅源 RIG-I 基因 CARD 区域的 PCR 扩增 | 第34页 |
| 2.3.3 pET-32A-CARD 载体的 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.4 PiggyBac-513B-1-RIG-I 载体的 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.5 鹅源 RIG-I CARD 区域多克隆抗血清的制备 | 第36-40页 |
| 2.3.6 RT-PCR 鉴定引物特异性验证 | 第40-42页 |
| 2.3.7 DF-1 细胞对嘌呤霉素的敏感性实验 | 第42页 |
| 2.3.8 转染用质粒浓度测定 | 第42-44页 |
| 2.3.9 细胞系鉴定 | 第44-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
