摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
目录 | 第9-11页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
1 绪论 | 第13-16页 |
2 材料与方法 | 第16-30页 |
2.1 主要实验材料 | 第16-21页 |
2.1.1 细胞系 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 主要耗材 | 第17页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
2.1.5 主要试剂的配制 | 第18-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 技术路线 | 第21-22页 |
2.2.2 细胞培养 | 第22页 |
2.2.3 qRT-PCR检测TRIM29(ATDC)在5-8F和6-10B中的mRNA表达水平 | 第22-24页 |
2.2.4 Western blotting检测TRIM29(ATDC)在5-8F和6-10B中的蛋白表达水平 | 第24-25页 |
2.2.5 TRIM29基因siRNA干扰质粒、表达质粒的设计合成及最佳干扰质粒的筛选 | 第25-26页 |
2.2.6 建立稳定转染细胞系 | 第26-27页 |
2.2.7 MTT法检测细胞增殖 | 第27页 |
2.2.8 流式细胞仪分析细胞周期 | 第27-28页 |
2.2.9 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第28页 |
2.2.10 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第28-29页 |
2.3 统计学处理 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-43页 |
3.1 QRT-PCR检测TRIM29(ATDC)在5-8F和6-10B中的MRNA表达水平 | 第30页 |
3.2 Western blotting检测TRIM29(ATDC)在5-8F和6-10B中的蛋白表达水平 | 第30-33页 |
3.2.1 蛋白浓度测定结果 | 第31-32页 |
3.2.2 Western blotting检测TRIM29(ATDC)在两株细胞中的蛋白表达水平 | 第32-33页 |
3.3 最佳干扰质粒的筛选 | 第33页 |
3.4 建立稳定转染细胞系 | 第33-36页 |
3.4.1 确定G418最佳筛选浓度 | 第33页 |
3.4.2 质粒转染 | 第33-35页 |
3.4.3 筛选阳性细胞 | 第35-36页 |
3.5 MTT法检测细胞增殖 | 第36-37页 |
3.5.1 TRIM29低表达对鼻咽癌细胞5-8F增殖的影响 | 第36页 |
3.5.2 TRIM29过表达对鼻咽癌细胞6-10B增殖的影响 | 第36-37页 |
3.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第37-38页 |
3.7 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第38-40页 |
3.7.1 TRIM29低表达对鼻咽癌细胞5-8F迁移能力的影响 | 第38-39页 |
3.7.2 TRIM29过表达对鼻咽癌细胞6-10B迁移能力的影响 | 第39-40页 |
3.8 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第40-43页 |
3.8.1 TRIM29低表达对鼻咽癌细胞5-8F侵袭能力的影响 | 第40-41页 |
3.8.2 TRIM29过表达对鼻咽癌细胞6-10B侵袭能力的影响 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
综述 | 第53-63页 |
参考文献 | 第59-63页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |