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BAT1在小鼠晶状体上皮细胞中对Hsf4b转录活性调控的机制研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
英文缩略词表(ABBREVIATION)第13-15页
前言第15-17页
1 实验材料、仪器与试剂第17-25页
    1.1 菌株、质粒和细胞株第17页
    1.2 仪器设备第17-18页
    1.3 主要试剂第18页
    1.4 主要溶液的配制第18-25页
        1.4.1 实验室培养基配制第18-20页
        1.4.2 核质分离试剂第20-21页
        1.4.3 SDS-PAGE 电泳液配制第21-25页
2 实验方法第25-37页
    2.1 感受态细菌的制备第25页
    2.2 质粒的转化第25页
    2.3 质粒的提取第25-26页
    2.4 细胞培养第26页
    2.5 细胞计数第26-27页
    2.6 细胞稳定株的构建第27-28页
        2.6.1 细胞培养、转染第27页
        2.6.2 构建稳定株第27-28页
    2.7 细胞免疫荧光第28页
    2.8 RNA 抽取第28页
    2.9 逆转录第28-29页
    2.10 Realtime PCR第29页
    2.11 western blotting 检测蛋白表达水平第29-32页
    2.12 Luciferase Assay第32-33页
    2.13 核质分离实验方法第33页
    2.14 体内 pull down assay 实验方法第33-34页
    2.15 构建突变质粒第34-37页
3 实验结果第37-45页
    3.1 质粒的鉴定第37页
    3.2 稳定株的构建第37-38页
    3.3 BAT1 与 Hsf4b 细胞免疫荧光结果分析第38-39页
    3.4 Realtime PCR 测定 BAT1 对 Hsf4b 下游基因αB 和 hsp25 在 mRNA 水平的情况第39-40页
    3.5 luciferase assay 实验结果第40页
    3.6 western blotting 检测下游蛋白表达情况第40-41页
    3.7 核质输出实验结果第41-42页
    3.8 pull down 实验结果第42页
    3.9 构建 BAT1K95E 突变质粒,酶切鉴定及测序结果第42-43页
    3.10 构建 mLEC-BAT1K95E、mLEC-Hsf4b/BAT1K95E 稳定株第43-44页
    3.11 Realtime PCR 测定核输出位点突变的 BAT1 对 Hsf4b 下游基因αB 在 mRNA 水平的情况第44-45页
4 讨论第45-47页
结论第47-49页
参考文献第49-51页
综述第51-65页
    参考文献第60-65页
致谢第65-67页
在读期间发表的论文及获奖情况第67-68页

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