| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 参考文献 | 第14-16页 |
| 第一章 麦胚凝集素修饰聚乙二醇-聚乳酸纳米粒的制备与表征 | 第16-30页 |
| 1 仪器和材料 | 第16-18页 |
| ·仪器 | 第16-17页 |
| ·材料和试剂 | 第17页 |
| ·溶液的配制 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-23页 |
| ·PEG-PLA纳米粒(NP)的制备 | 第18-19页 |
| ·WGA的巯基化 | 第19-20页 |
| ·不同WGA修饰密度的纳米粒制备 | 第20-21页 |
| ·NP和WGA-NP的表征 | 第21-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-27页 |
| ·WGA浓度及巯基化程度的测定与计算 | 第23页 |
| ·粒径及Zeta电位 | 第23-24页 |
| ·WGA-NP表面共价连接WGA的鉴定 | 第24-27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| ·纳米粒制备方法的选择 | 第27页 |
| ·凝集素修饰纳米粒制备条件的优化 | 第27-28页 |
| 5 小结 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-30页 |
| 第二章 WGA-NP体外细胞摄取及其机理研究 | 第30-58页 |
| 第一节 Calu-3细胞模型建立及鉴定 | 第31-39页 |
| 1 仪器和材料 | 第31-32页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·材料和试剂 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-35页 |
| ·细胞培养条件 | 第32页 |
| ·Calu-3细胞单层的培养 | 第32页 |
| ·Calu-3细胞模型的验证 | 第32-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-38页 |
| ·细胞形态和酸性蛋白染色 | 第35-36页 |
| ·电镜观察细胞单层分子形态 | 第36页 |
| ·细胞经FITC-WGA染色后的分布情况 | 第36-37页 |
| ·跨膜电阻值TEER | 第37页 |
| ·荧光素钠与地塞米松转运实验 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 小结 | 第39页 |
| 第二节 Calu-3细胞摄取WGA-NP的机理研究 | 第39-55页 |
| 1 仪器和材料 | 第39-40页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·材料和试剂 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-45页 |
| ·载香豆素-6的WGA-NP和NP的制备及表征 | 第40-41页 |
| ·香豆素-6体外HPLC分析方法建立 | 第41页 |
| ·载药量和包封率测定 | 第41-42页 |
| ·载香豆素-6的NP和WGA-NP的体外泄漏试验 | 第42页 |
| ·Calu-3细胞摄取载香豆素-6的NP和WGA-NP的定性观察 | 第42页 |
| ·各因素对Calu-3细胞摄取载香豆素-6的NP和WGA-NP的影响 | 第42-43页 |
| ·Calu-3细胞摄取WGA-NP的机理考察 | 第43-44页 |
| ·样品分析方法及评价指标 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-54页 |
| ·载香豆素-6的NP、WGA-NP粒径分布及Zeta电位 | 第45-46页 |
| ·香豆素-6体外HPLC分析方法建立 | 第46页 |
| ·包封率和载药量测定 | 第46-47页 |
| ·体外泄漏试验 | 第47-48页 |
| ·Calu-3细胞摄取载香豆素-6的NP和WGA-NP的定性观察 | 第48页 |
| ·Calu-3摄取载香豆素-6的NP和WGA-NP的定量分析 | 第48-50页 |
| ·Calu-3细胞摄取WGA-NP的机理考察 | 第50-54页 |
| 4 讨论 | 第54页 |
| ·影响摄取的因素 | 第54页 |
| ·细胞摄取及胞内转运机制 | 第54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 第三章 WGA-NP经鼻入脑转运机理研究 | 第58-80页 |
| 1 仪器和材料 | 第58-60页 |
| ·仪器 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·实验动物 | 第59页 |
| ·溶液的配制 | 第59-60页 |
| 2 实验方法 | 第60-63页 |
| ·载香豆素-6的WGA-NP与载DiR的NP/WGA-NP的制备 | 第60页 |
| ·活体成像观察载DiR的两种纳米粒裸鼠鼻腔给药后脑内递药特性 | 第60页 |
| ·载香豆素-6的WGA-NP大鼠给药后在鼻腔与嗅球的分布 | 第60-62页 |
| ·~(125)I-WGA-NP大鼠鼻腔给药后入脑通路研究 | 第62-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-76页 |
| ·活体成像观察两种纳米粒鼻腔给药后脑内递药特性 | 第63-64页 |
| ·载香豆素-6的WGA-NP鼻腔给药后在大鼠鼻粘膜上的分布 | 第64-69页 |
| ·载香豆素-6的WGA-NP鼻腔给药后在大鼠嗅球的分布 | 第69-70页 |
| ·~(125)I-WGA-NP大鼠鼻腔给药后经鼻入脑通路及脑内转运研究 | 第70-76页 |
| 4 讨论 | 第76-77页 |
| ·活体成像结果与药动学结果的相关性 | 第76页 |
| ·关于WGA-NP经鼻入脑转运通路的探讨 | 第76-77页 |
| 5 总结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 WGA-NP细胞毒性的评价 | 第80-92页 |
| 1 仪器和材料 | 第80页 |
| ·仪器 | 第80页 |
| ·材料和试剂 | 第80页 |
| 2 实验方法 | 第80-82页 |
| ·CCK-8法测定WGA对Calu-3细胞活力的影响 | 第80-81页 |
| ·CCK-8法测定NP和WGA-NP对Calu-3细胞活力的影响 | 第81页 |
| ·上清培养液中乳酸脱氢酶(LDH)测定 | 第81-82页 |
| ·细胞内谷胱甘肽(GSH)与活性氧(ROS)的测定 | 第82页 |
| 3 实验结果 | 第82-89页 |
| ·CCK-8法测定WGA对细胞活力的影响 | 第82-83页 |
| ·CCK-8法测定NP和WGA-NP对细胞活力的影响 | 第83-85页 |
| ·上清中乳酸脱氢酶的测定 | 第85-87页 |
| ·谷胱甘肽与活性氧的测定 | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| ·WGA-NP与NP对Calu-3细胞的毒性 | 第89-90页 |
| ·Calu-3细胞毒性与鼻粘膜毒性 | 第90页 |
| 5 小结 | 第90页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 全文总结 | 第92-93页 |
| 在校期间发表论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
