| 缩略语表 | 第5-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 文献回顾 | 第13-18页 |
| 实验一 PPENK-MIDGE-NLS基因载体的构建 | 第18-36页 |
| 1 材料 | 第18-22页 |
| 1.1 主要仪器 | 第18-19页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第19-20页 |
| 1.3 试剂配制 | 第20-21页 |
| 1.4 质粒及菌株 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-31页 |
| 2.1 重组质粒pEGFP-N1-PPENK的构建 | 第22页 |
| 2.2 NLS与基因载体的连接 | 第22-25页 |
| 2.3 MIDGE表达框 | 第25-29页 |
| 2.4 PPENK-MIDGE-NLS基因载体的构建 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-34页 |
| 3.1 ODN1与NLS的连接 | 第31页 |
| 3.2 HPLC对ODN1-NLS连接产物的检测 | 第31-32页 |
| 3.3 MIDGE表达框的获得 | 第32-33页 |
| 3.4 PPENK-MIDGE-NLS基因载体 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 实验二 PPENK-MIDGE-NLS基因载体对活体细胞的转染 | 第36-51页 |
| 1 材料 | 第36-41页 |
| 1.1 主要仪器 | 第36-37页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第37页 |
| 1.3 试剂配制 | 第37-41页 |
| 1.4 实验动物 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-45页 |
| 2.1 局部注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体的转染效果 | 第41-43页 |
| 2.2 静脉注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体的转染效果 | 第43-45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| 3.1 PPENK-MIDGE-NLS基因载体局部注射对活体细胞的转染效果 | 第45-47页 |
| 3.2 静脉注射基因载体对白细胞的转染 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 实验三 PPENK-MIDGE-NLS基因载体减轻心肌缺血再灌注损伤 | 第51-62页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| 1.1 主要仪器 | 第51-52页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第52页 |
| 1.3 试剂配制 | 第52页 |
| 1.4 实验动物 | 第52页 |
| 2 方法 | 第52-55页 |
| 2.1 心肌缺血再灌注损伤模型的建立 | 第52-53页 |
| 2.2 PPENK-MIDGE-NLS基因载体对损伤心肌的保护作用 | 第53-55页 |
| 3 结果 | 第55-60页 |
| 3.1 血流动力学改变 | 第55-57页 |
| 3.2 心肌酶谱的改变 | 第57页 |
| 3.3 心肌梗死面积的变化 | 第57-58页 |
| 3.4 基因载体在心肌组织的表达 | 第58-59页 |
| 3.5 心肌凋亡半定量分析 | 第59-60页 |
| 3.6 心肌损伤区域PENK蛋白表达量的改变 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
