摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第9-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-31页 |
2.1 实验材料 | 第14-19页 |
2.1.1 实验细胞来源 | 第14页 |
2.1.2 主要实验设备 | 第14-15页 |
2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第16-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-21页 |
2.2.1 SMMC7721 细胞的培养 | 第19-21页 |
2.3 IGF-1 的处理及干预方法 | 第21-22页 |
2.3.1 含有 IGF-1 细胞培养液配制 | 第21页 |
2.3.2 实验分组 | 第21-22页 |
2.4 台盼蓝染色检测细胞存活率 | 第22页 |
2.5 四哇蓝快速比色法(MTT)检测细胞的死亡率 | 第22-23页 |
2.6 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人肝癌细胞中 BMP-2、p38 等基因的表达 | 第23-27页 |
2.6.1 细胞总 RNA 的制备 | 第23-24页 |
2.6.2 RNA 质量鉴定 | 第24-25页 |
2.6.3 逆转录合成 cDNA | 第25-26页 |
2.6.4 引物设计与合成 | 第26页 |
2.6.5 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第26-27页 |
2.7 Western blot 检测人肝癌细胞中 BMP-2、磷酸化 p38 等蛋白表达 | 第27-30页 |
2.7.1 细胞蛋白提取液的制备 | 第27页 |
2.7.2 考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白含量 | 第27-28页 |
2.7.3 SDS-PAGE 灌胶 | 第28页 |
2.7.4 电泳 | 第28页 |
2.7.5 转膜 | 第28-29页 |
2.7.6 检测转印膜上的蛋白质 | 第29页 |
2.7.7 免疫显色 | 第29-30页 |
2.7.8 密度扫描分析 | 第30页 |
2.8 统计学分析方法 | 第30-31页 |
第3章 结果 | 第31-36页 |
3.1 IGF-1 对 SMMC7721 细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
3.2 IGF-1 对 SMMC7721 细胞 BMP-2 mRNA 及蛋白表达的影响 | 第32-34页 |
3.3 IGF-1 及 SB203580 对 SMMC7721 细胞 p38 及 BMP-2 mRNA 表达的影响 | 第34页 |
3.4 IGF-1 对 SMMC7721 细胞磷酸化 ERK、JNK 等蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
第4章 讨论 | 第36-39页 |
第5章 结论与展望 | 第39-40页 |
5.1 结论 | 第39页 |
5.2 展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
综述 | 第46-52页 |
参考文献 | 第50-52页 |