| 摘要 | 第4-11页 |
| ABSTRACT | 第11-19页 |
| 目录 | 第20-23页 |
| 缩略语表 | 第23-25页 |
| 前言 | 第25-29页 |
| 第一章 脑胶质瘤组织和细胞中PAX6、miR-223的差异性表达及靶向关系 | 第29-59页 |
| 1.1 材料 | 第29-32页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第29-30页 |
| 1.1.2 组织芯片信息 | 第30页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第31-32页 |
| 1.2 方法 | 第32-46页 |
| 1.2.1 不同脑胶质瘤组织中PAX6的表达检测 | 第32-33页 |
| 1.2.2 qRT-PCR检测不同脑胶质瘤细胞系中PAX6和niiR-223 mRNA的表达 | 第33-37页 |
| 1.2.3 生物信息学分析 | 第37页 |
| 1.2.4 双焚光素酸报告基因实验 | 第37-46页 |
| 1.2.5 数据处理 | 第46页 |
| 1.3 结果 | 第46-55页 |
| 1.3.1 PAX6蛋白在正常胚脑组织与脑胶质瘤组织芯片中IHC结果 | 第46-48页 |
| 1.3.2 脑胶质瘤细胞(A172、U251、U373、U138、XB1330)与胚脑胶质细胞(HFGC)中PAX6 mRNA和miR-223的表达 | 第48-50页 |
| 1.3.3 miR-223的靶基因预测结果 | 第50-51页 |
| 1.3.4 双荧光素酶报告基因检测miR-223与PAX6的靶向关系 | 第51-55页 |
| 1.4 讨论 | 第55-57页 |
| 1.5 小结 | 第57-59页 |
| 第二章 脑胶质瘤细胞中miR-223对PAX6表达的影响 | 第59-93页 |
| 2.1 材料 | 第59-61页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第59页 |
| 2.1.2 miRNAs 模拟物 | 第59-60页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第60页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2.2 方法 | 第61-78页 |
| 2.2.1 PAX6慢病毒干扰载体的构建 | 第61-67页 |
| 2.2.2 PAX6-pcDNA3.1表达载体的构建 | 第67-71页 |
| 2.2.3 脑胶质瘤细胞系U251、U373经转染、感染后PAX6的表达 | 第71-77页 |
| 2.2.4 统计分析 | 第77-78页 |
| 2.3 结果 | 第78-89页 |
| 2.3.1 慢病毒pLKD-CMV-G&NR-U6-shRNA载体构建 | 第78-80页 |
| 2.3.2 PAX6过表达重组质粒的构建结果 | 第80-89页 |
| 2.4 讨论 | 第89-92页 |
| 2.5 小结 | 第92-93页 |
| 第三章 miR-223靶向调控PAX6在脑胶质瘤细胞中的作用研究 | 第93-114页 |
| 3.1 材料 | 第93-95页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第93页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第93-94页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第94-95页 |
| 3.2 方法 | 第95-98页 |
| 3.2.1 质粒转染、感染 | 第95页 |
| 3.2.2 MTT检测细胞生长水平 | 第95-96页 |
| 3.2.3 FCM检测细胞周期 | 第96页 |
| 3.2.4 Transwell小室侵袭实验 | 第96-98页 |
| 3.2.5 western blot检测蛋白表达 | 第98页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第98页 |
| 3.3 结果 | 第98-108页 |
| 3.3.1 MTT检测细胞增殖结果 | 第98-99页 |
| 3.3.2 FCM检测细胞周期 | 第99-101页 |
| 3.3.3 Transwell侵袭实验 | 第101-103页 |
| 3.3.4 Western Blot检测 | 第103-108页 |
| 3.4 讨论 | 第108-113页 |
| 3.5 小结 | 第113-114页 |
| 结论 | 第114-115页 |
| 综述 | 第115-119页 |
| 参考文献 | 第119-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第135-138页 |
| 在读期间发表的科研论文 | 第135-136页 |
| 在读期间发表的会议摘要 | 第136-137页 |
| 在读期间参与的科研课题 | 第137-138页 |
| 在读期间获得的奖励 | 第138页 |
