| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 木质纤维素类生物质资源生产燃料乙醇 | 第10-13页 |
| 1.1.1 木质纤维素燃料乙醇的生产及其意义 | 第10-12页 |
| 1.1.2 国内外燃料乙醇的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 木糖利用微生物及木糖代谢途径 | 第13-17页 |
| 1.2.1 可以利用木糖的微生物 | 第13页 |
| 1.2.2 木糖代谢途径及工程菌株的改造 | 第13-17页 |
| 1.3 影响木糖发酵的因素 | 第17-18页 |
| 1.3.1 溶氧 | 第17-18页 |
| 1.3.2 pH值 | 第18页 |
| 1.4 重组菌株的代谢流研究 | 第18-19页 |
| 1.5 课题研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 1.5.1 课题研究的目的 | 第19页 |
| 1.5.2 课题研究的意义 | 第19-20页 |
| 1.6 课题研究路线 | 第20-21页 |
| 1.7 课题资助名称 | 第21-22页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第22-42页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-29页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.3 PCR扩增引物 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要生物化学及分子生物学试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要生化试剂及缓冲液配制方法 | 第25-28页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 出发菌株的选择 | 第29-30页 |
| 2.2.2 出发菌株发酵条件的优化 | 第30-31页 |
| 2.2.3 出发菌株产醇能力验证 | 第31-32页 |
| 2.2.4 基因表达水平验证 | 第32-35页 |
| 2.2.5 QT-PCR研究木糖各代谢基因转录表达情况 | 第35-37页 |
| 2.2.6 木糖代谢各基因酶活表达情况 | 第37-40页 |
| 2.2.7 验证木糖代谢流是否通畅 | 第40-41页 |
| 2.3 乙醇检测方法和统计分析 | 第41-42页 |
| 2.3.1 HPLC·检测乙醇方法 | 第41页 |
| 2.3.2 统计分析方法 | 第41-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-72页 |
| 3.1 出发菌株的选择 | 第42-45页 |
| 3.1.1 不同工程菌株混和碳源发酵 | 第42-44页 |
| 3.1.2 试验菌株利用葡萄糖/木糖发酵产醇情况 | 第44-45页 |
| 3.2 工程菌株ZLYRHZ7的生长特点 | 第45-47页 |
| 3.2.1 工程菌株ZLYRHZ7的生长曲线 | 第45-46页 |
| 3.2.2 工程菌株ZLYRHZ7的OD_(600nm)和菌体干重之间关系 | 第46-47页 |
| 3.3 工程菌株ZLYRHZ7发酵条件的优化 | 第47-57页 |
| 3.3.1 不同溶氧条件对工程菌株ZLYRHZ7发酵的影响 | 第47-54页 |
| 3.3.2 不同碳源比例对工程菌株ZLYRHZ7发酵的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.3 ZLYRHZ7在优化的摇瓶条件下利用不同浓度葡萄糖和木糖产醇能力验证 | 第55-57页 |
| 3.4 工程菌株ZLYRHZ7基因表达结果 | 第57-61页 |
| 3.4.1 工程菌株基因组的提取结果 | 第57-58页 |
| 3.4.2 木糖代谢相关基因PCR扩增结果 | 第58-61页 |
| 3.5 工程菌株ZLYRHZ7转录水平分析结果 | 第61-66页 |
| 3.5.1 工程菌株ZLYRHZ7 RNA提取结果 | 第61-63页 |
| 3.5.2 QRT-PCR检测结果 | 第63-66页 |
| 3.6 基因表达水平-蛋白酶活的测定 | 第66-69页 |
| 3.6.1 考马斯亮蓝测定总蛋白质浓度结果 | 第66-67页 |
| 3.6.2 木糖还原酶酶活力的测定结果 | 第67-68页 |
| 3.6.3 木糖醇脱氢酶酶活力的测定结果 | 第68-69页 |
| 3.6.4 木酮糖激酶酶活力的测定结果 | 第69页 |
| 3.7 工程菌株ZLYRHZ7代谢流的验证 | 第69-72页 |
| 3.7.1 工程菌株ZLZYRHZ7木糖一木糖醇代谢通路的验证 | 第69-70页 |
| 3.7.2 工程菌株ZLYRHZ7木糖醇-木酮糖代谢通路的验证 | 第70-71页 |
| 3.7.3 工程菌株ZLYRHZ7木酮糖下游代谢通路的验证 | 第71-72页 |
| 第4章 结果讨论 | 第72-80页 |
| 4.1 溶氧对于发酵的影响 | 第72-73页 |
| 4.2 底物对于发酵结果的影响 | 第73-75页 |
| 4.3 木糖代谢相关基因表达情况 | 第75-78页 |
| 4.4 工程菌株ZLYRHZ7木糖代谢通路的验证 | 第78-80页 |
| 第5章 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
