| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-61页 |
| ·纤维素的研究概况 | 第15-18页 |
| ·纤维素的化学组成及结构 | 第15-16页 |
| ·纤维素的降解 | 第16-18页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第18-38页 |
| ·纤维素酶研究的发展史 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶系组成 | 第19-20页 |
| ·纤维素酶作用机理 | 第20-24页 |
| ·纤维素酶结构和功能 | 第24-28页 |
| ·产纤维素酶的微生物 | 第28-30页 |
| ·纤维素酶的基因克隆 | 第30-35页 |
| ·纤维素酶在原核生物中的表达 | 第35-36页 |
| ·纤维素酶在真核生物中的表达 | 第36-38页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第38-41页 |
| ·纤维素酶在食品业的应用 | 第38-39页 |
| ·纤维素酶在酿造、发酵工业上的应用 | 第39页 |
| ·纤维素酶在纺织洗涤业的应用 | 第39-40页 |
| ·纤维素酶在造纸业上的应用 | 第40页 |
| ·纤维素酶在饲料业上的应用 | 第40页 |
| ·纤维素酶在能源和环境保护上的应用 | 第40-41页 |
| ·酶的分子改造 | 第41-55页 |
| ·酶分子改造的研究方法 | 第41-51页 |
| ·分子改造技术的应用 | 第51-52页 |
| ·纤维素酶的分子改造 | 第52-55页 |
| ·同源建模 | 第55-58页 |
| ·同源建模原理及步骤 | 第55-56页 |
| ·同源建模的应用 | 第56-58页 |
| ·选题的目的意义、研究内容、技术路线 | 第58-61页 |
| ·选题的目的意义 | 第58-59页 |
| ·研究内容 | 第59-60页 |
| ·技术路线 | 第60-61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-85页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·菌株与质粒 | 第61页 |
| ·酶和生化试剂 | 第61页 |
| ·仪器 | 第61页 |
| ·溶液及培养基配制 | 第61-62页 |
| ·溶液 | 第61-62页 |
| ·培养基 | 第62页 |
| ·嗜热真菌纤维二糖水解酶CBHⅡ、Ⅰ的分子改造试验方法 | 第62-82页 |
| ·PCR引物 | 第62-63页 |
| ·总RNA的提取（Trizol法） | 第63页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第63-64页 |
| ·嗜cbh2.cbh基因的PCR扩增 | 第64-71页 |
| ·嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶的基因cbh2、cbh1 在毕赤酵母中的表达 | 第71-77页 |
| ·突变体库的构建 | 第77-79页 |
| ·突变体库的筛选方法 | 第79-80页 |
| ·蛋白质含量和突变体序列的测定 | 第80-81页 |
| ·突变纤维二糖水解酶Ⅱ、Ⅰ工程菌表达产物的纯化及酶学性质 | 第81-82页 |
| ·同源建模 | 第82页 |
| ·嗜热真菌内切葡聚糖酶EG1 的氨基酸的定点突变的试验方法 | 第82-85页 |
| 3 结果与分析 | 第85-126页 |
| ·嗜热真菌纤维二糖水解酶CBHⅡ的分子改造实验结果 | 第85-101页 |
| ·嗜热毛壳菌C.thermophilum CT2 总RNA 的提取 | 第85页 |
| ·CBH2 基因的PCR扩增 | 第85-86页 |
| ·嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶Ⅱ的基因cbh2 在毕赤酵母中的表达 | 第86-91页 |
| ·突变体库的构建 | 第91-92页 |
| ·突变体库的筛选 | 第92-93页 |
| ·突变体酵母工程菌CBHⅡX16 和CBHⅡX305 的序列测定 | 第93-94页 |
| ·突变体酵母工程菌CBHⅡX16 和CBHⅡX305 表达产物的纯化及酶学性质 | 第94-98页 |
| ·同源建模 | 第98-101页 |
| ·嗜热真菌纤维二糖水解酶CBHⅠ的分子改造实验结果 | 第101-116页 |
| ·Chaetomium thermophilum CT2总RNA的提取 | 第101页 |
| ·CBH1 基因的PCR扩增 | 第101-102页 |
| ·嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶Ⅰ的基因cbh1 在毕赤酵母中的表达 | 第102-105页 |
| ·突变体库的构建 | 第105-106页 |
| ·突变体库的筛选 | 第106-107页 |
| ·突变体酵母工程菌CBHⅠX88 和CBHⅠX260 的序列测定 | 第107页 |
| ·突变体酵母工程菌CBHⅠX88 和CBHⅠX260 表达产物的纯化及酶学性质 | 第107-112页 |
| ·同源建模 | 第112-116页 |
| ·嗜热真菌内切葡聚糖酶EG1 的氨基酸的定点突变的实验结果与分析 | 第116-126页 |
| ·点突变酶测序结果 | 第116-118页 |
| ·点突变酵母菌落PCR鉴定及工程菌的构建 | 第118-119页 |
| ·点突变酵母工程菌产酶SDS-PAGE检测 | 第119-120页 |
| ·表达内切葡聚糖酶的纯化及酶活测定 | 第120-121页 |
| ·WTEG1 和3 个点突变酶的酶学性质 | 第121-124页 |
| ·同源建模 | 第124-126页 |
| 4 讨论 | 第126-134页 |
| ·突变库的构建 | 第126-127页 |
| ·筛选方法 | 第127页 |
| ·CBHⅡ突变酶性质改变的可能机制 | 第127-129页 |
| ·突变酶酶活力增加的可能机制 | 第128页 |
| ·突变酶热稳定性增加的可能机制 | 第128-129页 |
| ·突变酶PH增加的可能机制 | 第129页 |
| ·CBHⅠ突变酶性质改变的可能机制 | 第129-131页 |
| ·突变酶活力增加的可能机制 | 第129-130页 |
| ·突变酶热稳定性增加的可能机制 | 第130页 |
| ·突变酶反应最适PH值升高的可能机制 | 第130-131页 |
| ·定点突变 | 第131-132页 |
| ·内切葡聚糖酶EG1 的点突变酶性质改变的可能机制 | 第132页 |
| ·纤维素酶的分子改造 | 第132-134页 |
| 5 结论 | 第134-136页 |
| ·嗜热毛壳菌（C.thermophilum CT2）的纤维二糖水解酶Ⅱ的分子改造 | 第134页 |
| ·嗜热毛壳菌（C.thermophilum CT2）的纤维二糖水解酶Ⅰ的分子改造 | 第134-135页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种的内切葡聚糖酶EG1 进行分子改造 | 第135-136页 |
| 6 参考文献 | 第136-155页 |
| 7 致谢 | 第155-156页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第156-157页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第157页 |
