抗粗缩病RNA干扰表达载体的构建和玉米茎尖生长点原位转化
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-26页 |
| ·玉米粗缩病的概况 | 第9-14页 |
| ·玉米粗缩病的危害 | 第9页 |
| ·玉米粗缩病的病原及症状 | 第9-11页 |
| ·玉米粗缩病的发病规律 | 第11页 |
| ·玉米粗缩病的发生及防治 | 第11-13页 |
| ·玉米粗缩病抗病遗传研究 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰及其在植物研究中的应用 | 第14-19页 |
| ·RNAi的发现 | 第14-15页 |
| ·RNAi的分子机制 | 第15-16页 |
| ·RNAi的特点 | 第16页 |
| ·RNAi技术在植物上的应用 | 第16-19页 |
| ·玉米遗传转化的研究进展 | 第19-25页 |
| ·玉米转化受体系统的研究 | 第19-21页 |
| ·玉米转化方法的研究进展 | 第21-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第26页 |
| ·酶和试剂 | 第26-27页 |
| ·培养基和抗生素 | 第27-28页 |
| ·载体的构建 | 第28-35页 |
| ·目的片段的获得 | 第28-31页 |
| ·中间载体的构建 | 第31-33页 |
| ·RNAi表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·冻融法转化农杆菌C58 | 第35-36页 |
| ·玉米茎尖生长点的原位转化 | 第36-37页 |
| ·侵染液的制备 | 第36页 |
| ·受体材料的准备 | 第36页 |
| ·侵染及培养 | 第36页 |
| ·除草剂临界浓度筛选 | 第36-37页 |
| ·抗性植株筛选与移栽 | 第37页 |
| ·转基因植株的检测 | 第37-38页 |
| ·玉米基因组DNA提取 | 第37-38页 |
| ·选择标记基因Bar的PCR检测 | 第38页 |
| ·目的基因片段的PCR检测 | 第38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-47页 |
| ·模板序列的获得与测序结果 | 第38-40页 |
| ·载体的构建结果 | 第40-42页 |
| ·pSKintron-R1质粒 | 第40页 |
| ·pMRNAi质粒 | 第40-42页 |
| ·RNAi表达载体pERNAi及其鉴定 | 第42页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第42-43页 |
| ·玉米茎尖生长点转化的影响因素 | 第43-44页 |
| ·农杆菌菌浓度的影响 | 第43页 |
| ·侵染时间的影响 | 第43-44页 |
| ·表面活性剂的影响 | 第44页 |
| ·除草剂临界浓度和植株抗性筛选 | 第44-45页 |
| ·抗性植株PCR检测结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·以茎尖生长点为受体的原位转化 | 第47-49页 |
| ·关于RNAi载体构建 | 第49页 |
| ·关于重叠PCR技术 | 第49-51页 |
| 5. 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
