| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 一、引言 | 第9-12页 |
| 二、实验材料 | 第12-15页 |
| 1、实验试剂 | 第12-13页 |
| 2、主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 3、溶液配制 | 第14-15页 |
| 三、实验方法 | 第15-29页 |
| 1、统计方法 | 第15页 |
| 2、食管癌细胞系及其常规处理 | 第15-16页 |
| 2.1 细胞的复苏 | 第15页 |
| 2.2 细胞的培养和传代 | 第15-16页 |
| 2.3 细胞的冻存 | 第16页 |
| 3、构建质粒 | 第16-18页 |
| 3.1 构建AJUBA敲降和过表达野生型以及突变型AJUBA质粒 | 第16-17页 |
| 3.2 质粒中量提取 | 第17-18页 |
| 4、慢病毒的包装与感染 | 第18-20页 |
| 4.1 慢病毒的包装 | 第18-19页 |
| 4.2 慢病毒感染目的细胞系(10cm皿) | 第19-20页 |
| 5、RT-PCR半定量检测mRNA水平 | 第20-22页 |
| 5.1 食管鳞癌细胞系总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 5.2 反转录生成cDNA | 第21页 |
| 5.3 荧光定量RT-PCR反应 | 第21-22页 |
| 6、western blot检测蛋白的表达水平 | 第22-26页 |
| 6.1 总蛋白的提取 | 第22页 |
| 6.2 蛋白浓度的测定 | 第22-24页 |
| 6.3 western blot蛋白印迹检测蛋白表达水平 | 第24-26页 |
| 7、细胞功能学实验 | 第26-29页 |
| 7.1 细胞增殖实验 | 第26页 |
| 7.2 细胞迁移实验 | 第26-27页 |
| 7.3 细胞侵袭实验 | 第27-29页 |
| 四、实验结果 | 第29-46页 |
| 1、临床队列分析 | 第29-32页 |
| 1.1 队列信息 | 第29页 |
| 1.2 AJUBA突变与临床资料的相关性分析 | 第29-31页 |
| 1.3 AJUBA突变组预后有更好的趋势 | 第31-32页 |
| 2、细胞系的构建 | 第32-40页 |
| 2.1 敲降细胞系的构建 | 第32-39页 |
| 2.2 过表达细胞系的构建 | 第39-40页 |
| 3、过表达细胞系的细胞功能实验 | 第40-46页 |
| 3.1 CCK-8细胞增殖实验 | 第40-41页 |
| 3.2 细胞迁移实验 | 第41-43页 |
| 3.3 细胞侵袭实验 | 第43-46页 |
| 五、讨论 | 第46-48页 |
| 六、结论 | 第48-49页 |
| 七、参考文献 | 第49-51页 |
| 八、附录 | 第51-52页 |
| 中英文缩略词表 | 第51-52页 |
| 文献综述 | 第52-58页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |