| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-31页 |
| 第一章 G蛋白偶联受体在真核生物中的研究进展 | 第13-31页 |
| 1 G蛋白偶联受体概述 | 第13-15页 |
| 1.1 G蛋白偶联受体简介 | 第13页 |
| 1.2 G蛋白偶联受体的结构和功能 | 第13-15页 |
| 2 G蛋白偶联受体的研究进展 | 第15-26页 |
| 2.1 G蛋白偶联受体在人类中的研究进展 | 第15-18页 |
| 2.2 G蛋白偶联受体在植物中的研究进展 | 第18-20页 |
| 2.3 G蛋白偶联受体在模式真菌中的研究进展 | 第20-23页 |
| 2.4 G蛋白偶联受体在卵菌中的研究进展 | 第23-26页 |
| 参考文献 | 第26-31页 |
| 下篇 研究内容 | 第31-75页 |
| 第一章 大豆疫霉PsGK4互作蛋白的筛选鉴定 | 第33-53页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 1.1 供试菌株 | 第35页 |
| 1.2 PsGK4的蛋白结构分析 | 第35页 |
| 1.3 载体构建 | 第35-36页 |
| 1.3.1 PsGK4-RFP过表达载体的构建 | 第35页 |
| 1.3.2 PsGK4融合GST标签的原核表达载体构建 | 第35页 |
| 1.3.3 Ps359771、Ps247465、Ps500558融合His标签的原核表达载体构建 | 第35-36页 |
| 1.4 大豆疫霉遗传转化 | 第36-37页 |
| 1.5 过表达转化子的筛选 | 第37页 |
| 1.6 Western-blot | 第37-38页 |
| 1.7 免疫共沉淀体内筛选PsGK4互作蛋白 | 第38-39页 |
| 1.8 原核诱导表达蛋白 | 第39-40页 |
| 1.9 互作蛋白一对一互作验证 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-47页 |
| 2.1 PsGK4的转录分析 | 第40-41页 |
| 2.2 PsGK4蛋白结构预测 | 第41页 |
| 2.3 PsGK4~(1-57aa)过表达载体的构建 | 第41页 |
| 2.4 PsGK4~(1-57aa)-RFP过表达转化子的筛选鉴定 | 第41-42页 |
| 2.5 CO-IP筛选PsGK4互作蛋白结果分析 | 第42-44页 |
| 2.5.1 蛋白质鉴定统计 | 第42-43页 |
| 2.5.2 蛋白质筛选鉴定 | 第43-44页 |
| 2.6 Pull-down一对一互作验证 | 第44-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 第二章 大豆疫霉PsIMPA1沉默突变体的RNA-seq分析 | 第53-75页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 1.1 供试菌株 | 第54-55页 |
| 1.2 质粒构建和大豆疫霉转化 | 第55页 |
| 1.3 大豆疫霉的培养和孢子囊阶段菌体的获得 | 第55页 |
| 1.4 大豆疫霉侵染阶段菌丝的获得 | 第55页 |
| 1.5 总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 1.6 RNA-seq | 第56页 |
| 1.7 数据处理与分析 | 第56-58页 |
| 1.7.1 标准信息分析流程 | 第56-57页 |
| 1.7.2 去除杂质数据 | 第57页 |
| 1.7.3 测序质量评估 | 第57页 |
| 1.7.4 基因表达量统计 | 第57-58页 |
| 1.7.5 基因表达数据分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-70页 |
| 2.1 样品RNA电泳检测 | 第59页 |
| 2.2 被检测基因的数量分布统计 | 第59-60页 |
| 2.3 差异表达基因的筛选 | 第60-61页 |
| 2.4 菌丝和孢子囊阶段编码产物含有核定位信号的基因的转录水平分析 | 第61-62页 |
| 2.5 不同基因家族中差异表达基因的统计 | 第62-63页 |
| 2.6 菌丝和孢子囊阶段G蛋白信号通路基因的转录水平分析 | 第63-64页 |
| 2.7 菌丝和孢子囊阶段转录因子的转录水平分析 | 第64-67页 |
| 2.8 菌丝和孢子囊阶段促有丝分裂原蛋白激酶的转录水平分析 | 第67-69页 |
| 2.9 菌丝和孢子囊阶段SNARE蛋白家族基因的转录水平分析 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 附录1 试剂及培养基 | 第75-77页 |
| 攻读硕士期间发表的研究论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
